【正文】 生成紅色化合物，本試驗呈現(xiàn)紅色為陽性。枸櫞酸鹽利用試驗的陽性結(jié)果為深藍(lán)色，陰性為綠色。硝酸鹽還原試驗：出現(xiàn)紅色為陽性。奧普托欣（Optochin）試驗：幾乎所有肺炎鏈球菌對奧普托欣試驗敏感，而奧普托欣試驗對其他鏈球菌則無抑制作用。種類：①第一代：為窄譜抗菌藥物，對G+球菌無作用；主要作用于大腸埃希菌，且迅速出現(xiàn)耐藥，較少應(yīng)用于臨床?！请念悾簩儆跉⒕鷦芘c一個或多個肽聚糖合成中間產(chǎn)物形成復(fù)合物，阻斷肽聚糖合成，阻止細(xì)胞壁合成。采用標(biāo)準(zhǔn)菌株是進(jìn)行質(zhì)控的主要措施。耐甲氧西林金葡菌(MRSA)用β內(nèi)酰胺類抗生素治療無效。主要見于金黃色葡萄球菌。無鞭毛、無芽胞。草綠色鏈球菌是引起亞急性心內(nèi)膜炎最常見的病原菌。專性需氧，氧化酶陽性?！艨ㄋ继m漢菌：氧化酶和觸酶陽性，產(chǎn)DNA酶，大部分菌株還原硝酸鹽和亞硝酸鹽，營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上18～20℃即可生長，借此可與奈瑟菌屬相鑒別。大腸埃希菌腸道外感染以尿系統(tǒng)感染為主，常見腎盂腎炎。需氧或兼性厭氧。傷寒沙門菌的抗原主要包括菌體（O）抗原、鞭毛（H）抗原和表面（Vi）抗原。變形桿菌X1XXk等類型的O抗原與立克次體有共同抗原成分，可發(fā)生外斐反應(yīng)。包括弧菌屬、氣單胞菌屬、鄰單胞菌屬等?；魜y弧菌的生物分型霍亂弧菌采集的標(biāo)本若不能及時在堿性蛋白胨水中增菌，應(yīng)置于文臘二氏保存液活卡布運(yùn)送培養(yǎng)基中由專人運(yùn)送。鄰單胞菌屬引起水樣腹瀉，與志賀菌類似，也是引起食物中毒。有金黃色葡萄糖球菌（可產(chǎn)生Ⅴ、Ⅹ因子）時候，會出現(xiàn)衛(wèi)星生長現(xiàn)象。如果在做題看到有什么草原養(yǎng)羊、羊接觸史的話，就選布魯菌感染。2厭氧菌屬，特征是在無氧條件下才能生長，懷疑厭氧菌感染用皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)。3衣原體，細(xì)胞內(nèi)專性寄生。3支原體，無細(xì)胞壁，能在人工培養(yǎng)基上生長，能通過細(xì)菌濾器，是最小的原核細(xì)胞型微生物，典型特征是菌落為“荷包蛋”樣。4鉤端螺旋體通過疫水傳播，是典型的人畜共患病，鼠和豬是最常見的儲存宿主和傳染源，是一種自然疫源性疾病。不同種類可產(chǎn)生不同色素，如橙紅、粉紅、黃、黃綠、紫以及其他顏色。黃曲霉菌產(chǎn)生的黃曲霉毒素可以致癌。傳播途徑是糞口傳播，引起甲肝，還可以引起病毒血癥。，酶活性不受樣品中其他成分的影響，受檢組織或體液中不存在與標(biāo)記酶相同的內(nèi)源性酶或抑制物。酶活性以單位U表示：即1分鐘將1μmol底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物所需的酶量。（2）四甲基聯(lián)苯胺（TMB）：TMB經(jīng)HRP作用后變?yōu)樗{(lán)色，加入硫酸終止反應(yīng)后變?yōu)辄S色，最大吸收峰波長450nm。（1）一步法：連接AP。常用免疫電泳或雙相擴(kuò)散法進(jìn)行鑒定。主要缺點(diǎn)是抗體（抗原）結(jié)合容量不高、固相抗體（抗原）脫吸附率較高且不均一，孔間變異大，重復(fù)性差，從而影響測定的靈敏度、精確度及檢測范圍。包被好的固相載體在低溫可放置一段時間而不失去免疫活性。當(dāng)與抗體結(jié)合后，所標(biāo)的酶與抗體密切接觸，使酶的活性中心受到影響而活性被抑制。酶標(biāo)志物具有更好的穩(wěn)定性，且無放射性污染。如血清標(biāo)本中有類風(fēng)濕因子（RF）存在，則可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)，因為RF是一種抗變性IgG的自身抗體，它能與多種動物的變性IgG的Fc部分結(jié)合，因此RF就可作為固相抗體和酶標(biāo)抗體之間的橋接抗原。特點(diǎn)是：①酶標(biāo)記抗原與樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的非標(biāo)記抗原具有相同的與固相抗體結(jié)合的能力；②反應(yīng)體系中，固相抗體和酶標(biāo)抗原是固定限量，且前者的結(jié)合位點(diǎn)少于酶標(biāo)記和非標(biāo)記抗原的分子數(shù)量和；③免疫反應(yīng)后，結(jié)合于固相載體上復(fù)合物中被測定的酶標(biāo)抗原的量（酶活性）與樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中非標(biāo)記抗原的濃度成反比。一般抗體檢測是較少采用，當(dāng)相應(yīng)抗原材料中含有與抗人IgG反應(yīng)的物質(zhì)，而且不易得到足夠的純化抗原或抗原的結(jié)合特異性不穩(wěn)定時，可采用這種方法測定抗體，目前臨床運(yùn)用較多的是乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb）和乙型肝炎病毒e抗體（HBeAb）的檢測。酶放大免疫測定技術(shù)（EMIT）主要用來檢測『正確答案』C『答案解析』酶放大免疫測定技術(shù)（EMIT）主要用來檢測半抗原。將抗原或抗體固相化的過程稱為『正確答案』B『答案解析』將抗原或抗體固相化的過程稱為包被。ELISA技術(shù)中待測孔（管）顯色顏色的深淺與待測抗原或抗體呈負(fù)相關(guān)的是『正確答案』D『答案解析』ELISA技術(shù)中待測孔（管）顯色顏色的深淺與待測抗原或抗體呈負(fù)相關(guān)的是競爭法。ELISA一般不用于檢測、補(bǔ)體、腫瘤標(biāo)志物等蛋白質(zhì)『正確答案』E『答案解析』ELISA一般不用于檢測半抗原。第五篇：2017年吉林省臨床醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)中級主管技師職稱考試試題2017年吉林省臨床醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)中級主管技師職稱考試試題一、單項選擇題（共27題，每題的備選項中，只有 1 個事最符合題意）傷寒發(fā)病第一周時陽性檢出率最高的 A．糞便培養(yǎng) B．血液培養(yǎng) C．尿液培養(yǎng) D．肥達(dá)反應(yīng) E．嘔吐物培養(yǎng)與HLAB27抗原相關(guān)性顯著的疾病是 A．SLE B．RA C．甲狀腺炎 D．重癥肌無力 E．強(qiáng)直性脊柱炎分離純化的淋巴細(xì)胞亞群的原則是 A．細(xì)胞的大小 B．細(xì)胞的密度C．細(xì)胞所帶的電荷D．相應(yīng)細(xì)胞的特性和不同標(biāo)志 E．細(xì)胞的黏滯性中胚葉造血期的起止時間分別為A．胚胎的第二周開始止于胚胎的第九周 B．胚胎的第四周開始止于胚胎的第十二周 C．胚胎的第三周開始止于胚胎的第九周 D．胚胎的第二周開始止于胚胎的第十二周 E．胚胎的第四周開始止于胚胎的第九周易檢出寄生蟲蟲體或蟲卵的膽汁是__ A．D液 B．A膽汁 C．B膽汁 D．C膽汁 E．胃液患者，女性，40歲，發(fā)熱，牙齦出血伴月經(jīng)量增多兩周就診，體檢：℃，貧血貌，淺表淋巴結(jié)（），胸骨壓痛（+），肝肋下1cm，化驗：Hb72g/L,WBC32109/L,PLT28109/L，骨髓增生明顯活躍，原始細(xì)胞占92%，為明確診斷，通常宜首選下列哪項檢查 A．血細(xì)胞化學(xué)染色 B．染色體核型分析 C．骨髓病理組織學(xué)檢查 D．分子生物學(xué)檢查 E．免疫學(xué)檢查下面哪一項不是爆發(fā)調(diào)查的內(nèi)容 A．核實(shí)診斷，證實(shí)爆發(fā)B．全面考察疫情，計算各種罹患率，描述疾病分布 C．形成有關(guān)致病因素的假設(shè)并加以檢驗D．把病例隨機(jī)分為兩組，一組給以干預(yù)措施，一組作為對照繼續(xù)觀察 E．調(diào)查的同時采取措施，控制疫情胎兒合成的第一種Ig是 A．IgA B．IgD C．IgE D．IgG E．IgM單向瓊脂擴(kuò)散法的檢測敏感度 A．不高，檢測時間長達(dá)48～72小時 B．高，檢測時間長達(dá)48～72小時 C．不高，檢測時間僅需12小時 D．高，檢測時間僅需12小時 E．高，檢測時間為2小時尿葡萄糖試帶法產(chǎn)生假陰性反應(yīng)的常見干擾物質(zhì)是 A．過氧化物 B．稀氨溶液 C．維生素C D．青霉素 E．鏈霉素1受血者配血試驗的血標(biāo)本必須是輸血前幾天的 A．1天之內(nèi)的 B．2天之內(nèi)的 C．4天之內(nèi)的 D．3天之內(nèi)的 E．5天之內(nèi)的1單側(cè)游離缺失采用混合支持式活動義齒修復(fù)，應(yīng)制?。ǎＳ靡环N標(biāo)記物可檢測多種與抗原相應(yīng)的抗體的ELISA方法是『正確答案』B『答案解析』用一種標(biāo)記物可檢測多種與抗原相應(yīng)的抗體的ELISA方法是間接法。下列有關(guān)雙位點(diǎn)一步法ELISA的敘述中，錯誤的是，另一種作為酶標(biāo)抗體，會出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)『正確答案』A『答案解析』雙位點(diǎn)一步法：在雙抗體夾心法基礎(chǔ)上，進(jìn)一步發(fā)展了雙位點(diǎn)一步法。常用免疫電泳或雙相擴(kuò)散法，出現(xiàn)沉淀線表示酶標(biāo)記物中的抗體（抗原）具有免疫活性。主要用于血清中某種抗體亞型成分（如IgM）的測定，最常用的是病原體急性感染診斷中的IgM型抗體。原理：將抗原包被在固相載體上，加入待測樣本形成固相抗原受檢抗體復(fù)合物；經(jīng)溫育洗滌后，加入酶標(biāo)二抗，常用羊抗人IgG，在固相上即形成固相抗原待測抗體酶標(biāo)抗抗體復(fù)合物，加入底物后根據(jù)顯色的深淺確定待測抗體含量。：針對抗原分子上兩個不同且空間距離較遠(yuǎn)的決定簇，包被使用一種單抗，酶標(biāo)記使用另一種單抗。：先將樣品（或標(biāo)準(zhǔn)品）與抗體混合反應(yīng)達(dá)平衡，然后加入酶標(biāo)記抗原繼續(xù)溫育一段時間，測定離心沉淀物（酶標(biāo)抗原抗體復(fù)合物）中加入酶底物液后的呈色吸光度值。（二）克隆酶供體免疫分析（CDEIA）DNA重組技術(shù)可分別合成某種功能酶（如βD半乳糖苷酶）分子的兩個片段，大片段稱為酶受體（EA），小分子稱作酶供體（ED），兩者單獨(dú)均無酶活性，一定條件下結(jié)合形成四聚體方具酶活性。第二節(jié)　酶免疫技術(shù)的分類包括兩種：酶免疫組織化學(xué)技術(shù)：用于組織切片或其他標(biāo)本中抗原的定位。均勻地分散到整個反應(yīng)溶液中，因此反應(yīng)速度快。，滴加酶的底物溶液，若沉淀線上顯色，則酶標(biāo)記物中的酶活性仍保留。②缺點(diǎn)：交聯(lián)時分子間比例不嚴(yán)格，大小不一，影響效果。缺點(diǎn)是水溶性差。（AP）：大腸桿菌來源的AP分子量80kD，；小牛腸黏膜AP分子量為100kD，；后一種AP的活性高于前者。，方法簡單易行、敏感和重復(fù)性好。乙型肝炎病毒（HBV）是DNA病毒，引起乙肝，嚴(yán)重可發(fā)展為肝癌。流感病毒是有包膜的RNA病毒，包膜上的血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）是重要的表面抗原，其中HA極易發(fā)生變異。星型不分解黃嘌呤。4梅毒螺旋體為密螺旋體，用鍍銀染色。3肺炎支原體通過呼吸道傳播，引起原發(fā)性非典型肺炎。每個發(fā)育周期是40～72h。芽胞呈正圓形，寬于菌體，位于菌體頂端，細(xì)菌呈鼓槌狀。1幽門螺桿菌呈海鷗狀彎曲，脲酶強(qiáng)陽性（快速分解尿素）是特征，標(biāo)本采集部位是胃，十二指腸。副流感嗜血桿菌的形態(tài)、菌落與銅綠假單胞菌為專性需氧菌，在普通培養(yǎng)基上菌落有生姜味，可產(chǎn)生水溶性的綠色素，在血平板上產(chǎn)生透明溶血環(huán)。1副溶血性弧菌與霍亂區(qū)別用蔗糖發(fā)酵試驗，前者不發(fā)酵蔗糖，在TCBS上呈藍(lán)綠色菌落，后者呈黃色菌落。O1群霍亂弧菌根據(jù)菌體抗原含有A、B、C3種抗原因子的不同，又可將其分為小川型、稻葉型和彥島型，以小川型和稻葉型為常見流行型。鼠疫耶爾森菌為G，桿菌，球桿狀，兩極濃染，有莢膜，無鞭毛，無芽胞。菌體（O）抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體以IgM為主，H抗原則以IgG為主。志賀菌屬用SS培養(yǎng)基或中國藍(lán)（麥康凱）平板，菌落為紅色或粉紅色。（2）腸致病性（EPEC）：嬰兒腹瀉。腸桿菌中志賀、克雷伯、鼠疫耶爾菌屬、EIEC沒有鞭毛，也就是說它們的動力陰性。淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌用麥芽糖發(fā)酵試驗區(qū)別，前者不發(fā)酵乳糖，后者發(fā)酵乳糖。化膿性鏈球菌產(chǎn)生的酶有脫氧核糖核酸酶（鏈道酶）、透明質(zhì)酸酶（擴(kuò)散因子）、鏈激酶（溶解纖維蛋白酶）。本菌是社區(qū)獲得性肺炎的最常見病原菌。葡萄球菌抵抗力強(qiáng)，耐熱、耐干燥、耐高鹽，是抵抗力最強(qiáng)的無芽胞細(xì)菌。治療有效的藥物主要有碳青霉烯類(亞胺培南)和第四代頭(頭孢吡肟、頭孢匹羅)以及某些喹酮類和氨基糖苷類抗生素?！?，過高或過低的pH值會影響藥物效能。◆大環(huán)內(nèi)酯類的抗生素是抑菌劑。（四）大環(huán)內(nèi)酯類作用機(jī)制：可逆結(jié)合細(xì)菌核糖體50S大亞基的23S單位，抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成和肽鏈延伸；種類：國內(nèi)常用有紅霉素、吉他霉素、麥迪霉素、乙酰螺旋霉素。▲外毒素常用體內(nèi)及體外毒力試驗檢測，也用ELISA法測定。若仍不產(chǎn)生紅色，表示試驗為假陰性。枸櫞酸鹽利用試驗在腸桿菌科中埃希菌屬、志賀菌屬、愛德華菌屬和耶爾森菌屬均為陰性，沙門菌屬、克雷伯菌屬通常為陽性。主要用于腸桿菌科中屬及種的鑒別。四、細(xì)菌生化鑒定技術(shù)（一）碳水化合物代謝試驗碳水化合物代謝試驗包括：糖（醇、苷）類發(fā)酵試驗、葡萄糖氧化/發(fā)酵試驗、甲基紅試驗（MR）、VP試驗、β半乳糖苷酶試驗（ONPG）、七葉苷水解試驗。1鑒別培養(yǎng)基：如糖發(fā)酵管、三糖鐵培養(yǎng)基、枸櫞酸鹽培養(yǎng)基、克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）、伊紅美藍(lán)瓊脂和動力吲哚尿素（MIU）等培養(yǎng)基。1血瓊脂上的溶血現(xiàn)象：α溶血：又叫草綠色溶血，菌落周圍血培養(yǎng)基變?yōu)榫G色環(huán)狀。制備好的培養(yǎng)基放于4℃活冷暗處一般可以保存一周，最多不超過2周。臨床意義：一般用于分枝桿菌屬的檢查，如結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)桿菌等。第四章細(xì)菌檢驗技術(shù)常見考點(diǎn)一、細(xì)菌染色標(biāo)本鏡檢▲染色標(biāo)本檢查的基本程序是涂片、干燥、固定、染色、鏡檢。（1）外毒素的特性：①主要是革蘭陽性菌產(chǎn)生；②具有菌種特異性；③毒性作用強(qiáng)；④毒性作用有組織選擇性；⑤具有良好的免疫原性：%的甲醛處理可失去毒性但仍保持免疫原性變?yōu)轭惗舅?，可刺激幾天產(chǎn)生抗毒素；⑥不耐熱；⑦都是蛋白質(zhì)，易被酸及蛋白水解酶滅活。（2）膠原酶：分解細(xì)胞外基質(zhì)的膠原蛋白。（3）接合：受體菌和供體菌直接接觸，供體菌通過性菌毛將所帶有的F質(zhì)粒或類似遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移至受體菌的過程。①莢膜變異，從有到無；②鞭毛變異（HO變異），從有到無；③芽胞變異，從有到無。防止微生物進(jìn)入機(jī)體或者其他操作對象的方法稱為無菌操作。③穩(wěn)定期：細(xì)菌繁殖數(shù)與死亡