【正文】 半抗原一般用均相酶免疫測定法。雙位點(diǎn)一步法鉤狀效應(yīng)產(chǎn)生是因?yàn)椤赫_答案』E『答案解析』雙位點(diǎn)一步法鉤狀效應(yīng)產(chǎn)生是因?yàn)闃?biāo)本中的抗原濃度過高。ELISA技術(shù)中，最常用來檢測抗體的方法是『正確答案』B『答案解析』ELISA技術(shù)中，最常用來檢測抗體的方法是間接法。以下關(guān)于酶標(biāo)記抗體或抗原不正確的是，因?yàn)橛坞x的酶或未標(biāo)記上的抗原或抗體成分在測定過程中被洗掉『正確答案』C『答案解析』每批制備的酶標(biāo)志物都要進(jìn)行質(zhì)量和標(biāo)記率的鑒定，質(zhì)量鑒定包括酶活性和抗體（抗原）的免疫活性鑒定。競爭抗體與待測抗體的特異性及親和力越接近，則測定的可靠性越強(qiáng)。（二）檢測抗體的方法：最常用的方法，屬非競爭性結(jié)合試驗(yàn)。雙抗體夾心法只適用于二價(jià)或以上的較大分子抗原的測定，不能用于小分子半抗原的檢測。：將待測樣品抗原、酶標(biāo)抗原及特異性抗體進(jìn)行一次性溫育，待反應(yīng)達(dá)平衡后，測定離心沉淀物（酶標(biāo)抗原抗體復(fù)合物）中加入酶底物液后的呈色吸光度值。反應(yīng)后酶活力大小與標(biāo)本中的半抗原量呈一定的比例，從酶活力的測定結(jié)果就可推算出標(biāo)本中半抗原的量。：包被的蛋白質(zhì)濃度過低，固相載體表面不能被此蛋白質(zhì)完全覆蓋，其后加入的血清標(biāo)本和酶結(jié)合物中的蛋白質(zhì)也會部分地吸附于固相載體表面，最后產(chǎn)生非特異性顯色致本底偏高，在這種情況下，需用1%～5%的牛血清白蛋白或5%～20%小牛血清再包被一次，消除此干擾，此過程稱為封閉。目前采用非共價(jià)和化學(xué)偶聯(lián)共價(jià)吸附方法進(jìn)行抗原或抗體的固相化可改善上述缺點(diǎn)：易與抗體（抗原）形成化學(xué)偶聯(lián)，且結(jié)合容量大。（抗原）具有免疫活性。①優(yōu)點(diǎn)：操作簡便、有效，重復(fù)性好。TMB穩(wěn)定性好，成色無需避光，無致突變作用，是目前ELISA中應(yīng)用最廣泛的底物。酶變性后，RZ值不變但活性降低，因此使用酶制劑時(shí)，酶活性單位比RZ值更為重要。用于均相酶免疫測定的酶還要求當(dāng)抗體與酶標(biāo)抗原結(jié)合后，酶活性可出現(xiàn)抑制或激活。產(chǎn)生的甲肝抗體為IgM，ELISA檢測用捕獲法?！癫《境Ｒ娍键c(diǎn)病毒是非細(xì)胞型微生物，基本結(jié)構(gòu)是核心、衣殼。巴西諾卡菌七葉苷、黃嘌呤、肌醇、甘露醇均為陽性。治療藥物首選青霉素。治療藥物首選紅霉素。有獨(dú)特的發(fā)育周期：①原體有高度感染性，無繁殖能力；②始體（網(wǎng)狀體），有繁殖能力，沒有感染性。2破傷風(fēng)梭菌，嚴(yán)格厭氧，有周鞭毛、無莢膜。1彎曲菌屬，不分解糖類，氧化酶陽性，分離培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中需含有大量抗生素，初次分離，須在5%O10%CO85%N2的氣體環(huán)境中生長。嗜血桿菌的菌落呈露滴狀。假單胞菌屬、產(chǎn)檢桿菌屬、不動(dòng)桿菌屬等不能發(fā)酵葡萄糖，均為非發(fā)酵革蘭陰性桿菌。副溶血性弧菌是一種嗜鹽菌，常存在與海水及海類產(chǎn)品中，是沿海地區(qū)食物中毒最常見的病原菌?；魜y弧菌根據(jù)生物學(xué)特性上的差異，分為古典生物型和Eltor生物型兩個(gè)生物型，兩個(gè)生物型的抗原同屬O1群霍亂弧菌。●耶爾森菌屬普通變性桿菌引起食物中毒，奇異變性桿菌引起嬰幼兒腸炎鼠疫耶爾森菌是鼠疫的病原菌，我國將其列為甲類傳染病。傷寒沙門菌檢測用肥達(dá)試驗(yàn)：用已知的傷寒沙門菌O、H抗原，副傷寒甲、乙H抗原稀釋后與被檢血清作定量凝集試驗(yàn)，以檢測患者血清中抗體的含量，來判斷機(jī)體是否受沙門菌感染而導(dǎo)致腸熱癥并判別沙門菌的種類。志賀菌屬是細(xì)菌性痢疾最常見的病原菌，中國最常見的是福氏（B群）和宋氏（D群）。腸道內(nèi)感染：（1）產(chǎn)毒素性（ETEC）：主要引起旅游者腹瀉、嬰兒腹瀉?！衲c桿菌科腸桿菌科共同特征：革蘭氏陰性桿菌、氧化酶陰性、觸酶和硝酸鹽還原試驗(yàn)為陽性。在血瓊脂平板、巧克力瓊脂或EPV瓊脂，置5%～10%C02環(huán)境中，35℃培養(yǎng)18～24h后可見圓形、灰褐色、濕潤、光滑、邊緣整齊、直徑1～2mm的小菌落。鏈球菌感染引起的變態(tài)反應(yīng)疾病為風(fēng)濕熱、腎小球腎炎，為Ⅲ。肺炎鏈球菌矛頭狀排列，由于其能產(chǎn)生自溶酶，菌落呈臍窩狀，鑒別試驗(yàn)：奧普托欣試驗(yàn)（Optochin），陽性、膽汁溶菌試驗(yàn)陽性、莢膜腫脹試驗(yàn)陽性、草綠色溶血圈。葡萄球菌的細(xì)胞壁上有葡萄球菌A蛋白（SPA），可以與人類IgG的Fc段結(jié)合，可進(jìn)行協(xié)同凝集試驗(yàn)。產(chǎn)AmpC酶菌株對β內(nèi)酰胺類抗生素（青霉素類、頭孢菌素類及氨曲南）及含酶抑制劑復(fù)合制劑耐藥?！艚瘘S色葡萄球菌ATCC25923，大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853，糞腸球菌ATCC29212或ATCC33186。包括萬古霉素、去甲萬古霉素、替考拉寧、多粘菌素、桿菌肽等。②第二代：對G和G+細(xì)菌均有作用；比較這類藥的抗菌活性強(qiáng)度依次為環(huán)丙沙星、氧氟沙星、羅美沙星、氟羅沙星、培氟沙星、諾氟沙星；③第三代：對G+菌作用高于第二代的4～8倍，對厭氧菌亦有作用；司帕沙星、妥舒沙星、左氧氟沙星、加替沙星、格帕沙星、莫西沙星等。五、細(xì)菌毒力鑒定▲內(nèi)毒素常采用鱟試驗(yàn)——內(nèi)毒素激活鱟試劑中凝固酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟堂?，凝固蛋白原生成凝固蛋白。若加入試劑后無顏色反應(yīng)，可能是：①硝酸鹽沒有被還原，試驗(yàn)陰性；②硝酸鹽被還原為氨和氮等其他產(chǎn)物而導(dǎo)致假陰性結(jié)果，這時(shí)應(yīng)在試管內(nèi)加入少許鋅粉（還原劑），如出現(xiàn)紅色則表明試驗(yàn)確實(shí)為陰性。丙二酸鹽利用試驗(yàn)的陽性結(jié)果為深藍(lán)色。硫化氫試驗(yàn)是細(xì)菌能分解含硫氨基酸，產(chǎn)生的H2S與Fe2+反應(yīng)呈黑色為陽性。細(xì)菌血液培養(yǎng)使用的抗凝劑為聚苯乙烯磺酸鈉（SPS）。1最常用的營養(yǎng)培養(yǎng)基：血平板和巧克力平板。1細(xì)菌在液體培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象有三種，分別是：①混濁（大多數(shù)細(xì)菌）；②沉淀（鏈狀生長的細(xì)菌，如鏈球菌、炭疽芽孢桿菌等）；③菌膜（專性需氧菌，如銅綠假單胞菌等）。細(xì)菌L型的培養(yǎng)基必須采用高滲（3%～5%NaCl、10%～20%蔗糖等）低瓊脂培養(yǎng)基。③痰標(biāo)本需要經(jīng)過酸或堿處理后，使痰液化后接種。（5）內(nèi)毒素血癥：革蘭陰性細(xì)菌侵入血流，并在其大量繁殖，崩解后釋放大量內(nèi)毒素。細(xì)菌毒素根據(jù)來源、性質(zhì)和作用特點(diǎn)不同分為外毒素和內(nèi)毒素。細(xì)菌分泌的侵襲性酶類主要有：（1）透明質(zhì)酸酶：分解結(jié)締組織的透明質(zhì)酸，易于細(xì)菌擴(kuò)散。（2）轉(zhuǎn)導(dǎo)：是以噬菌體為媒介，將供體菌的基因轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi)，導(dǎo)致受體菌基因改變的過程。細(xì)菌常見的變異現(xiàn)象：（1）形態(tài)與結(jié)構(gòu)變異：如細(xì)菌L型。（4）無菌和無菌操作：無菌是指沒有活的微生物存在。一般約8～18小時(shí)。②微需氧菌：在5%～6%的低氧環(huán)境中才能生長。細(xì)菌L型保留了親代的遺傳特性，可返祖，可致病。僅少數(shù)革蘭陰性細(xì)菌具有性菌毛，較普通菌毛少，只有1～4根，比普通菌毛長且粗，呈中空管狀，是兩菌之間傳遞遺傳物質(zhì)的通道。革蘭陽性菌細(xì)胞壁有五肽交聯(lián)橋，是青霉素作用的部位。第二章細(xì)菌的基本性狀常見考點(diǎn)一、細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)（一）細(xì)菌的大小和形態(tài)細(xì)菌個(gè)體微小，通常以微米作為測量單位。每種細(xì)菌DNA中的G（鳥嘌呤）+C（胞嘧啶）含量摩爾百分比有一定范圍，變化不大，DNA（G+C）mol%可以作為細(xì)菌分類的一個(gè)重要依據(jù)。緒論一、微生物的分類及命名微生物的分類等級為界、門、綱、目、科、屬、種，種是最基本的分類單位。填報(bào)個(gè)人報(bào)名信息。醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)技術(shù)資格考試科目臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技士/技師/主管技師資格考試科目分為：“基礎(chǔ)知識”、“相關(guān)專業(yè)知識”、“專業(yè)知識”、“專業(yè)實(shí)踐能力”等4個(gè)科目。難度是國家統(tǒng)一出題，應(yīng)該級別越高考試的難度越大。所有4個(gè)科目在2年內(nèi)全部合格者可申請?jiān)摷墝I(yè)技術(shù)資格。步驟查看報(bào)名流程，了解報(bào)名順序及注意事項(xiàng)后點(diǎn)擊開始報(bào)名，進(jìn)入報(bào)名頁面醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。注意事項(xiàng)：考生在確認(rèn)單上簽字后，不得再對報(bào)名信息進(jìn)行修改。如細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體和螺旋體。1929年，弗萊明發(fā)現(xiàn)了青霉素。外膜層是革蘭陰性菌特細(xì)胞壁的特殊成分，從外向內(nèi)依次是脂多糖、脂質(zhì)雙層、脂蛋白。（二）細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)鞭毛：細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官，是由細(xì)胞質(zhì)伸出的蛋白性絲狀物?！?xì)菌L型即為細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型。（2）合適的pH：～，有個(gè)別例外，～、～。（3）細(xì)菌的生長曲線分為四個(gè)時(shí)期：①遲緩期：適應(yīng)階段，此階段細(xì)菌幾乎不繁殖。細(xì)菌的控制：（1）消毒：殺死物體上的病原微生物但不一定殺死細(xì)菌芽胞的方法。（7）紫外線殺菌的主要機(jī)制是干擾DNA的復(fù)制。（6）酶活性變異（7）生化特性的變異細(xì)菌的R質(zhì)粒是耐藥質(zhì)粒，可通過細(xì)菌間的接合或通過噬菌體進(jìn)行傳遞。質(zhì)粒也是細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。（6）激酶：將血纖維蛋白酶原激活為纖維蛋白酶，以分解纖維蛋白，防止形成血凝塊。（2）菌血癥：致病菌侵入血流，但不在其生長繁殖。結(jié)果判定：染紫色為革蘭陽性，染紅色為革蘭陰性。三、細(xì)菌接種與培養(yǎng)技術(shù)液體培養(yǎng)基是在肉浸液中加入1%%NaCl，蛋白胨的作用為提供細(xì)菌生長繁殖所需的氮源。斜面接種法主要用于純種增菌及保留菌種或生化反應(yīng)。如產(chǎn)氣莢膜梭菌。1特殊培養(yǎng)基：包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基。七葉苷水解試驗(yàn)主要用于D族鏈球菌與其他鏈球菌的鑒別，前者為陽性（黑色）。苯丙氨酸脫氨酶的陽性結(jié)果為綠色，氨基酸脫羧酶的陽性結(jié)果為培養(yǎng)基從黃色變?yōu)樽仙?。DNA酶試驗(yàn)：細(xì)菌產(chǎn)生DNA酶分解DNA，是菌落周圍出現(xiàn)透明環(huán)。O/129抑菌試驗(yàn)：O/129抑菌試驗(yàn)為藥敏試驗(yàn)，0／129（二氨基喋啶）對弧菌屬細(xì)菌有抑制作用，而對氣單胞菌屬細(xì)菌無抑制作用。種類：①鏈霉菌屬：如鏈霉素、卡那霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴龍霉素、新霉素；②小單胞菌屬：如慶大霉素、福提霉素；③半合成氨基苷類：阿米卡星、奈替米星、地貝卡星等，氨基苷類抗菌藥物對需氧G桿菌有較強(qiáng)的抗菌活性，對G+球菌有一定的活性。分為短效（土霉素、四環(huán)素）、中效（地美環(huán)素、美他環(huán)素）和長效（多西環(huán)素、米諾環(huán)素）。抑菌圈的大小可以反映待檢菌對測定藥物的敏感程度，與該藥對待檢菌的最低抑菌濃度（MIC）呈負(fù)相關(guān)，即抑菌圈愈大，MIC愈小?？菇Y(jié)核分枝桿菌的首選一線藥物是異煙肼、利福平。葡萄球菌觸和鏈球菌鑒別用觸酶試驗(yàn)，葡萄球菌觸酶陽性，鏈球菌是陰性?！锟吹侥堂?、耐熱DNA酶陽性，就選金黃色葡萄糖球菌。B群鏈球菌可以水解馬尿酸和CAMP試驗(yàn)陽性。G+，成雙或短鏈狀排列的卵圓形球菌，無芽胞，無莢膜，部分腸球菌有稀疏鞭毛。淋病奈瑟菌人類是唯一宿主。大腸埃希菌在EMB平板上是帶有金屬光澤呈藍(lán)紫色的菌落，麥康凱和SS瓊脂上呈粉紅色菌落。（5）腸粘附性（EaggEC）：嬰兒急性水樣腹瀉。SS瓊脂和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基：約2～4mm的透明或半透明菌落，對膽鹽耐受。營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上呈遷徙生長。小腸結(jié)腸耶爾森菌是人畜共患病原菌?；魜y弧菌在堿性蛋白胨水上生長迅速，～。氣單胞菌屬運(yùn)動(dòng)活潑，在血平板上形成大而扁平的β溶血性菌落。流感嗜血桿菌能產(chǎn)生自溶酶，生長需要Ⅴ、Ⅹ因子。1布魯菌屬是人畜共患病原菌，包括羊、牛、豬、狗、綿羊布魯菌等。犰狳對本菌高度敏感，為本菌的良好動(dòng)物模型。懷疑食物中毒，從患者血清中檢出毒素是最直接、有效的方法。3鸚鵡熱衣原體，氣溶膠傳播，引起非典型肺炎（人畜共患病原體）。4立克次體不能人工培養(yǎng)，檢測是利用變性桿菌的公共抗原檢測（共同抗原），OX19對應(yīng)流行性斑疹傷寒，鼠型斑疹傷寒。50、諾卡菌屬主要有星型諾卡和巴西諾卡致病，星型諾卡菌落表面無白色菌絲，巴西諾卡表面有白色菌絲，諾卡菌屬抗酸染色是弱陽性，諾卡菌為革蘭氏陽性桿菌，有細(xì)長的菌絲，菌絲末端不膨大。新型隱球菌鑒別要點(diǎn)：①墨汁染色，在黑色背景下可見到透亮菌體和寬厚莢膜；②沙保弱培養(yǎng)基上可生成酵母型菌落；③脲酶試驗(yàn)（＋）。腮腺炎病毒是有包膜的RNA病毒，感染后可引起一側(cè)或雙側(cè)腮腺腫大，青春期感染者，男性易并發(fā)睪丸炎。用于標(biāo)記的酶應(yīng)符合：，催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高，純度高。輔基是酶活性基團(tuán)，而主酶則與酶活性無關(guān)，HRP的純度用RZ（HRP分別在403nm和275nm處的吸光度比值）表示。OPD在HRP的作用下顯橙黃色，加強(qiáng)酸如硫酸或鹽酸終止反應(yīng)后呈棕黃色，最大吸收峰在492nm波長。二、酶標(biāo)記抗體或抗原（一）酶標(biāo)記抗體或抗原的制備標(biāo)記方法應(yīng)符合：技術(shù)方法簡單、產(chǎn)率高，且重復(fù)性好；標(biāo)記反應(yīng)不影響酶和抗原或抗體的活性；酶標(biāo)志物穩(wěn)定，應(yīng)避免酶、抗體（抗原）以及酶標(biāo)志物各自形成聚合物等。HRP標(biāo)記抗體或抗原的最常用方法。（二）固相載體的種類和選擇：聚苯乙烯塑料最常采用。（三）包被與封閉：將抗原或抗體結(jié)合在固相載體上的過程。該法主要用于小分子激素和半抗原（如藥物）的測定，均相法的優(yōu)點(diǎn)是適合于自動(dòng)化測定，但反應(yīng)中被抑制的酶活力較小，需用靈敏的光度計(jì)測定，反應(yīng)的溫度也需嚴(yán)格控制。二、異相酶免疫測定是目前應(yīng)用最廣泛的一類標(biāo)記免疫測定技術(shù)。二、方法類型及反應(yīng)原理（一）檢測抗原的方法：屬于非競爭結(jié)合，檢測抗原最常用的方法，檢測含有至少兩個(gè)抗原決定簇的多價(jià)抗原。用于測定小分子抗原，如藥物、激素等。由于機(jī)