【正文】 半抗原一般用均相酶免疫測定法。雙位點一步法鉤狀效應產生是因為『正確答案』E『答案解析』雙位點一步法鉤狀效應產生是因為標本中的抗原濃度過高。ELISA技術中，最常用來檢測抗體的方法是『正確答案』B『答案解析』ELISA技術中，最常用來檢測抗體的方法是間接法。以下關于酶標記抗體或抗原不正確的是，因為游離的酶或未標記上的抗原或抗體成分在測定過程中被洗掉『正確答案』C『答案解析』每批制備的酶標志物都要進行質量和標記率的鑒定，質量鑒定包括酶活性和抗體（抗原）的免疫活性鑒定。競爭抗體與待測抗體的特異性及親和力越接近，則測定的可靠性越強。（二）檢測抗體的方法：最常用的方法，屬非競爭性結合試驗。雙抗體夾心法只適用于二價或以上的較大分子抗原的測定，不能用于小分子半抗原的檢測。：將待測樣品抗原、酶標抗原及特異性抗體進行一次性溫育，待反應達平衡后，測定離心沉淀物（酶標抗原抗體復合物）中加入酶底物液后的呈色吸光度值。反應后酶活力大小與標本中的半抗原量呈一定的比例，從酶活力的測定結果就可推算出標本中半抗原的量。：包被的蛋白質濃度過低，固相載體表面不能被此蛋白質完全覆蓋，其后加入的血清標本和酶結合物中的蛋白質也會部分地吸附于固相載體表面，最后產生非特異性顯色致本底偏高，在這種情況下，需用1%～5%的牛血清白蛋白或5%～20%小牛血清再包被一次，消除此干擾，此過程稱為封閉。目前采用非共價和化學偶聯(lián)共價吸附方法進行抗原或抗體的固相化可改善上述缺點：易與抗體（抗原）形成化學偶聯(lián)，且結合容量大。（抗原）具有免疫活性。①優(yōu)點：操作簡便、有效，重復性好。TMB穩(wěn)定性好，成色無需避光，無致突變作用，是目前ELISA中應用最廣泛的底物。酶變性后，RZ值不變但活性降低，因此使用酶制劑時，酶活性單位比RZ值更為重要。用于均相酶免疫測定的酶還要求當抗體與酶標抗原結合后，酶活性可出現(xiàn)抑制或激活。產生的甲肝抗體為IgM，ELISA檢測用捕獲法?！癫《境Ｒ娍键c病毒是非細胞型微生物，基本結構是核心、衣殼。巴西諾卡菌七葉苷、黃嘌呤、肌醇、甘露醇均為陽性。治療藥物首選青霉素。治療藥物首選紅霉素。有獨特的發(fā)育周期：①原體有高度感染性，無繁殖能力；②始體（網(wǎng)狀體），有繁殖能力，沒有感染性。2破傷風梭菌，嚴格厭氧，有周鞭毛、無莢膜。1彎曲菌屬，不分解糖類，氧化酶陽性，分離培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中需含有大量抗生素，初次分離，須在5%O10%CO85%N2的氣體環(huán)境中生長。嗜血桿菌的菌落呈露滴狀。假單胞菌屬、產檢桿菌屬、不動桿菌屬等不能發(fā)酵葡萄糖，均為非發(fā)酵革蘭陰性桿菌。副溶血性弧菌是一種嗜鹽菌，常存在與海水及海類產品中，是沿海地區(qū)食物中毒最常見的病原菌?；魜y弧菌根據(jù)生物學特性上的差異，分為古典生物型和Eltor生物型兩個生物型，兩個生物型的抗原同屬O1群霍亂弧菌?！褚疇柹鷮倨胀ㄗ冃詶U菌引起食物中毒，奇異變性桿菌引起嬰幼兒腸炎鼠疫耶爾森菌是鼠疫的病原菌，我國將其列為甲類傳染病。傷寒沙門菌檢測用肥達試驗：用已知的傷寒沙門菌O、H抗原，副傷寒甲、乙H抗原稀釋后與被檢血清作定量凝集試驗，以檢測患者血清中抗體的含量，來判斷機體是否受沙門菌感染而導致腸熱癥并判別沙門菌的種類。志賀菌屬是細菌性痢疾最常見的病原菌，中國最常見的是福氏（B群）和宋氏（D群）。腸道內感染：（1）產毒素性（ETEC）：主要引起旅游者腹瀉、嬰兒腹瀉。●腸桿菌科腸桿菌科共同特征：革蘭氏陰性桿菌、氧化酶陰性、觸酶和硝酸鹽還原試驗為陽性。在血瓊脂平板、巧克力瓊脂或EPV瓊脂，置5%～10%C02環(huán)境中，35℃培養(yǎng)18～24h后可見圓形、灰褐色、濕潤、光滑、邊緣整齊、直徑1～2mm的小菌落。鏈球菌感染引起的變態(tài)反應疾病為風濕熱、腎小球腎炎，為Ⅲ。肺炎鏈球菌矛頭狀排列，由于其能產生自溶酶，菌落呈臍窩狀，鑒別試驗：奧普托欣試驗（Optochin），陽性、膽汁溶菌試驗陽性、莢膜腫脹試驗陽性、草綠色溶血圈。葡萄球菌的細胞壁上有葡萄球菌A蛋白（SPA），可以與人類IgG的Fc段結合，可進行協(xié)同凝集試驗。產AmpC酶菌株對β內酰胺類抗生素（青霉素類、頭孢菌素類及氨曲南）及含酶抑制劑復合制劑耐藥?！艚瘘S色葡萄球菌ATCC25923，大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853，糞腸球菌ATCC29212或ATCC33186。包括萬古霉素、去甲萬古霉素、替考拉寧、多粘菌素、桿菌肽等。②第二代：對G和G+細菌均有作用；比較這類藥的抗菌活性強度依次為環(huán)丙沙星、氧氟沙星、羅美沙星、氟羅沙星、培氟沙星、諾氟沙星；③第三代：對G+菌作用高于第二代的4～8倍，對厭氧菌亦有作用；司帕沙星、妥舒沙星、左氧氟沙星、加替沙星、格帕沙星、莫西沙星等。五、細菌毒力鑒定▲內毒素常采用鱟試驗——內毒素激活鱟試劑中凝固酶原轉變?yōu)槟堂?，凝固蛋白原生成凝固蛋白。若加入試劑后無顏色反應，可能是：①硝酸鹽沒有被還原，試驗陰性；②硝酸鹽被還原為氨和氮等其他產物而導致假陰性結果，這時應在試管內加入少許鋅粉（還原劑），如出現(xiàn)紅色則表明試驗確實為陰性。丙二酸鹽利用試驗的陽性結果為深藍色。硫化氫試驗是細菌能分解含硫氨基酸，產生的H2S與Fe2+反應呈黑色為陽性。細菌血液培養(yǎng)使用的抗凝劑為聚苯乙烯磺酸鈉（SPS）。1最常用的營養(yǎng)培養(yǎng)基：血平板和巧克力平板。1細菌在液體培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象有三種，分別是：①混濁（大多數(shù)細菌）；②沉淀（鏈狀生長的細菌，如鏈球菌、炭疽芽孢桿菌等）；③菌膜（專性需氧菌，如銅綠假單胞菌等）。細菌L型的培養(yǎng)基必須采用高滲（3%～5%NaCl、10%～20%蔗糖等）低瓊脂培養(yǎng)基。③痰標本需要經過酸或堿處理后，使痰液化后接種。（5）內毒素血癥：革蘭陰性細菌侵入血流，并在其大量繁殖，崩解后釋放大量內毒素。細菌毒素根據(jù)來源、性質和作用特點不同分為外毒素和內毒素。細菌分泌的侵襲性酶類主要有：（1）透明質酸酶：分解結締組織的透明質酸，易于細菌擴散。（2）轉導：是以噬菌體為媒介，將供體菌的基因轉移到受體菌內，導致受體菌基因改變的過程。細菌常見的變異現(xiàn)象：（1）形態(tài)與結構變異：如細菌L型。（4）無菌和無菌操作：無菌是指沒有活的微生物存在。一般約8～18小時。②微需氧菌：在5%～6%的低氧環(huán)境中才能生長。細菌L型保留了親代的遺傳特性，可返祖，可致病。僅少數(shù)革蘭陰性細菌具有性菌毛，較普通菌毛少，只有1～4根，比普通菌毛長且粗，呈中空管狀，是兩菌之間傳遞遺傳物質的通道。革蘭陽性菌細胞壁有五肽交聯(lián)橋，是青霉素作用的部位。第二章細菌的基本性狀常見考點一、細菌的形態(tài)與結構（一）細菌的大小和形態(tài)細菌個體微小，通常以微米作為測量單位。每種細菌DNA中的G（鳥嘌呤）+C（胞嘧啶）含量摩爾百分比有一定范圍，變化不大，DNA（G+C）mol%可以作為細菌分類的一個重要依據(jù)。緒論一、微生物的分類及命名微生物的分類等級為界、門、綱、目、科、屬、種，種是最基本的分類單位。填報個人報名信息。醫(yī)學檢驗專業(yè)技術資格考試科目臨床醫(yī)學檢驗技士/技師/主管技師資格考試科目分為：“基礎知識”、“相關專業(yè)知識”、“專業(yè)知識”、“專業(yè)實踐能力”等4個科目。難度是國家統(tǒng)一出題，應該級別越高考試的難度越大。所有4個科目在2年內全部合格者可申請該級專業(yè)技術資格。步驟查看報名流程，了解報名順序及注意事項后點擊開始報名，進入報名頁面醫(yī)`學教育網(wǎng)搜集整理。注意事項：考生在確認單上簽字后，不得再對報名信息進行修改。如細菌、支原體、衣原體、立克次體和螺旋體。1929年，弗萊明發(fā)現(xiàn)了青霉素。外膜層是革蘭陰性菌特細胞壁的特殊成分，從外向內依次是脂多糖、脂質雙層、脂蛋白。（二）細菌的特殊結構鞭毛：細菌的運動器官，是由細胞質伸出的蛋白性絲狀物?！毦鶯型即為細菌細胞壁缺陷型。（2）合適的pH：～，有個別例外，～、～。（3）細菌的生長曲線分為四個時期：①遲緩期：適應階段，此階段細菌幾乎不繁殖。細菌的控制：（1）消毒：殺死物體上的病原微生物但不一定殺死細菌芽胞的方法。（7）紫外線殺菌的主要機制是干擾DNA的復制。（6）酶活性變異（7）生化特性的變異細菌的R質粒是耐藥質粒，可通過細菌間的接合或通過噬菌體進行傳遞。質粒也是細菌的遺傳物質。（6）激酶：將血纖維蛋白酶原激活為纖維蛋白酶，以分解纖維蛋白，防止形成血凝塊。（2）菌血癥：致病菌侵入血流，但不在其生長繁殖。結果判定：染紫色為革蘭陽性，染紅色為革蘭陰性。三、細菌接種與培養(yǎng)技術液體培養(yǎng)基是在肉浸液中加入1%%NaCl，蛋白胨的作用為提供細菌生長繁殖所需的氮源。斜面接種法主要用于純種增菌及保留菌種或生化反應。如產氣莢膜梭菌。1特殊培養(yǎng)基：包括厭氧培養(yǎng)基和細菌L型培養(yǎng)基。七葉苷水解試驗主要用于D族鏈球菌與其他鏈球菌的鑒別，前者為陽性（黑色）。苯丙氨酸脫氨酶的陽性結果為綠色，氨基酸脫羧酶的陽性結果為培養(yǎng)基從黃色變?yōu)樽仙NA酶試驗：細菌產生DNA酶分解DNA，是菌落周圍出現(xiàn)透明環(huán)。O/129抑菌試驗：O/129抑菌試驗為藥敏試驗，0／129（二氨基喋啶）對弧菌屬細菌有抑制作用，而對氣單胞菌屬細菌無抑制作用。種類：①鏈霉菌屬：如鏈霉素、卡那霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴龍霉素、新霉素；②小單胞菌屬：如慶大霉素、福提霉素；③半合成氨基苷類：阿米卡星、奈替米星、地貝卡星等，氨基苷類抗菌藥物對需氧G桿菌有較強的抗菌活性，對G+球菌有一定的活性。分為短效（土霉素、四環(huán)素）、中效（地美環(huán)素、美他環(huán)素）和長效（多西環(huán)素、米諾環(huán)素）。抑菌圈的大小可以反映待檢菌對測定藥物的敏感程度，與該藥對待檢菌的最低抑菌濃度（MIC）呈負相關，即抑菌圈愈大，MIC愈小?？菇Y核分枝桿菌的首選一線藥物是異煙肼、利福平。葡萄球菌觸和鏈球菌鑒別用觸酶試驗，葡萄球菌觸酶陽性，鏈球菌是陰性。★看到凝固酶、耐熱DNA酶陽性，就選金黃色葡萄糖球菌。B群鏈球菌可以水解馬尿酸和CAMP試驗陽性。G+，成雙或短鏈狀排列的卵圓形球菌，無芽胞，無莢膜，部分腸球菌有稀疏鞭毛。淋病奈瑟菌人類是唯一宿主。大腸埃希菌在EMB平板上是帶有金屬光澤呈藍紫色的菌落，麥康凱和SS瓊脂上呈粉紅色菌落。（5）腸粘附性（EaggEC）：嬰兒急性水樣腹瀉。SS瓊脂和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基：約2～4mm的透明或半透明菌落，對膽鹽耐受。營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上呈遷徙生長。小腸結腸耶爾森菌是人畜共患病原菌?；魜y弧菌在堿性蛋白胨水上生長迅速，～。氣單胞菌屬運動活潑，在血平板上形成大而扁平的β溶血性菌落。流感嗜血桿菌能產生自溶酶，生長需要Ⅴ、Ⅹ因子。1布魯菌屬是人畜共患病原菌，包括羊、牛、豬、狗、綿羊布魯菌等。犰狳對本菌高度敏感，為本菌的良好動物模型。懷疑食物中毒，從患者血清中檢出毒素是最直接、有效的方法。3鸚鵡熱衣原體，氣溶膠傳播，引起非典型肺炎（人畜共患病原體）。4立克次體不能人工培養(yǎng)，檢測是利用變性桿菌的公共抗原檢測（共同抗原），OX19對應流行性斑疹傷寒，鼠型斑疹傷寒。50、諾卡菌屬主要有星型諾卡和巴西諾卡致病，星型諾卡菌落表面無白色菌絲，巴西諾卡表面有白色菌絲，諾卡菌屬抗酸染色是弱陽性，諾卡菌為革蘭氏陽性桿菌，有細長的菌絲，菌絲末端不膨大。新型隱球菌鑒別要點：①墨汁染色，在黑色背景下可見到透亮菌體和寬厚莢膜；②沙保弱培養(yǎng)基上可生成酵母型菌落；③脲酶試驗（＋）。腮腺炎病毒是有包膜的RNA病毒，感染后可引起一側或雙側腮腺腫大，青春期感染者，男性易并發(fā)睪丸炎。用于標記的酶應符合：，催化反應的轉化率高，純度高。輔基是酶活性基團，而主酶則與酶活性無關，HRP的純度用RZ（HRP分別在403nm和275nm處的吸光度比值）表示。OPD在HRP的作用下顯橙黃色，加強酸如硫酸或鹽酸終止反應后呈棕黃色，最大吸收峰在492nm波長。二、酶標記抗體或抗原（一）酶標記抗體或抗原的制備標記方法應符合：技術方法簡單、產率高，且重復性好；標記反應不影響酶和抗原或抗體的活性；酶標志物穩(wěn)定，應避免酶、抗體（抗原）以及酶標志物各自形成聚合物等。HRP標記抗體或抗原的最常用方法。（二）固相載體的種類和選擇：聚苯乙烯塑料最常采用。（三）包被與封閉：將抗原或抗體結合在固相載體上的過程。該法主要用于小分子激素和半抗原（如藥物）的測定，均相法的優(yōu)點是適合于自動化測定，但反應中被抑制的酶活力較小，需用靈敏的光度計測定，反應的溫度也需嚴格控制。二、異相酶免疫測定是目前應用最廣泛的一類標記免疫測定技術。二、方法類型及反應原理（一）檢測抗原的方法：屬于非競爭結合，檢測抗原最常用的方法，檢測含有至少兩個抗原決定簇的多價抗原。用于測定小分子抗原，如藥物、激素等。由于機