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]藥大生化內(nèi)部資料doc-閱讀頁

2024-08-03 04:20本頁面
  

【正文】 。 米氏方程(MichaelisMentent equation):表示一個酶促反應(yīng)的起始速度(υ)與底物濃度([s])關(guān)系的速度方程:υ=υmax[s]/(Km+[s])變構(gòu)酶 (allosteric enzyme) 具有變構(gòu)效應(yīng)的酶。變構(gòu)酶分子組成,一般是多亞基的,分子中凡與底物分子相結(jié)合的部位稱為催化部位(catalytic site),凡與效應(yīng)劑相結(jié)合的部位稱為調(diào)節(jié)部位(regulatory site),這二部位可以在不同的亞基上,或者位于同一亞基。 酶活力  酶活力單位的量度。固定化酶(2010年名詞解釋第三題)固定化酶(immobilized enzyme)不溶于水的酶。同工酶來源于同一種系、機體或細胞的同一種酶具有不同的形式。產(chǎn)生同工酶的主要原因是在進化過程中基因發(fā)生變異,而其變異程度尚不足以成為一個新酶。酶的活性中心酶的活性中心:酶分子中氨基酸殘基的側(cè)鏈有不同的化學(xué)組成。這些必需基團在一級結(jié)構(gòu)上可能相距很遠,但在空間結(jié)構(gòu)上彼此靠近,組成具有特定空間結(jié)構(gòu)的區(qū)域,能和底物特異結(jié)合并將底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。其中一些與酶的活性密切相關(guān)的化學(xué)基團稱作酶的必需基團(essential group)酶的競爭性抑制競爭性抑制作用(petitive inhibition):通過增加底物濃度可以逆轉(zhuǎn)的一種酶抑制類型。這種抑制使Km增大而υmax不變。也指物質(zhì)在生物體內(nèi)的一系列氧化過程。呼吸鏈實際上呼吸鏈的作用代表著線粒體最基本的功能,呼吸鏈中的遞氫體(hydrogen carrier)和遞電子體(electron carrier)就是能傳遞氫原子或電子的載體,由于氫原子可以看作是由質(zhì)子和核外電子組成的,所以遞氫體也是遞電子體,遞氫體和遞電子體的本質(zhì)是酶、輔酶、輔基或輔因子。氧化磷酸化氧化磷酸化,生物化學(xué)過程,是物質(zhì)在體內(nèi)氧化時釋放的能量供給ADP與無機磷合成ATP的偶聯(lián)反應(yīng)。在真核細胞的線粒體或細菌中,物質(zhì)在體內(nèi)氧化時釋放的能量供給ADP與無機磷合成ATP的偶聯(lián)反應(yīng)。這種含有高能鍵的物質(zhì),其高能鍵斷裂后,釋放高能磷酸基團,使ADP磷酸化生成ATP的過程,被稱為底物水平磷酸化作用(substrate level phosphorylation)?;瘜W(xué)組成為糖醛酸和酪氨基己糖交替出現(xiàn),有時含硫鍵。重要的粘多糖有:硫酸皮膚素,硫酸類肝素,硫酸角質(zhì)素,硫酸軟骨素和透明質(zhì)酸等TCA循環(huán)三羧酸循環(huán):體內(nèi)物質(zhì)糖類、脂肪或氨基酸有氧氧化的主要過程。乳酸循環(huán)在激烈運動時,糖酵解的速度超過通過呼吸鏈再形成NAD+的速度,這時肌肉中酵解形成的丙酮酸由乳酸脫氫酶轉(zhuǎn)變?yōu)槿樗?,使NAD+再生,使酵解過程繼續(xù)進行,肌肉中的乳酸擴散到血液并隨著血液進入肝臟細胞,在肝細胞內(nèi)通過葡萄糖異生途徑轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟?,又回到血液隨血液供應(yīng)肌肉和腦對葡萄糖的需要。糖異生作用糖異生體內(nèi)從非糖類物質(zhì)如氨基酸、丙酮酸、甘油等合成葡萄糖的代謝,是維持血糖水平的重要過程。在哺乳動物中,肝與腎是糖異生的主要器官。肝臟具有較強的合成酮體的酶系,但卻缺乏利用酮體的酶系。進食糖類物質(zhì)也不會導(dǎo)致酮體增多?;ㄉ南┧釓膩営退嵘?。必需氨基酸 必需氨基酸指的是人體自身不能合成或合成速度不能滿足人體需要,必須從食物中攝取的氨基酸。對嬰兒來說,組氨酸和精氨酸也是必需氨基酸。尿素循環(huán)精氨酸在釋放了尿素后產(chǎn)生的鳥氨酸,和氨甲酰磷酸反應(yīng)產(chǎn)生瓜氨酸,瓜氨酸又和天冬氨酸反應(yīng)生成精氨基琥珀酸,精氨基琥珀酸為酶裂解,產(chǎn)物為精氨酸及延胡索酸。轉(zhuǎn)氨基作用是氨基酸脫氨基作用的一種途徑。聯(lián)合脫氨基作用聯(lián)合脫氨基作用是體內(nèi)主要的脫氨方式。   L-谷氨酸脫氫酶主要分布于肝、腎、腦等組織中,而α酮戊二酸參加的轉(zhuǎn)氨基作用普遍存在于各組織中,所以此種聯(lián)合脫氨主要在肝、腎、腦等組織中進行。  ?。╬urine nucleotide cycle):骨骼肌和心肌組織中L谷氨酸脫氫酶的活性很低,因而不能通過上述形式的聯(lián)合脫氨反應(yīng)脫氨。   一種氨基酸經(jīng)過兩次轉(zhuǎn)氨作用可將α氨基轉(zhuǎn)移至草酰乙酸生成門冬氨酸。一碳單位 一碳單位:就是指具有一個碳原子的基團?!?一碳單位的主要生理功能是作為嘌呤和嘧啶的合成原料,是氨基酸和核苷酸聯(lián)系的紐帶。 半保留復(fù)制DNA生物合成時,以母鏈DNA兩股單鏈各自作為模板(template),按堿基配對規(guī)律,合成與模板互補的子鏈。兩個子代DNA都和親代DNA堿基序列一致。遺傳中心法則中心法則(genetic central dogma),是指遺傳信息從DNA傳遞給RNA,再從RNA傳遞給蛋白質(zhì),即完成遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程。這是所有有細胞結(jié)構(gòu)的生物所遵循的法則。遺傳密碼包含在脫氧核糖核酸或核糖核酸核苷酸序列中的遺傳信息。它決定蛋白質(zhì)中的氨基酸排列順序,因而決定蛋白質(zhì)的化學(xué)構(gòu)成和生物學(xué)功能。岡崎片段:相對比較短的DNA鏈(大約1000核苷酸殘基),是在DNA的滯后鏈的不連續(xù)合成期間生成的片段,這是ReijiOkazaki在DNA合成實驗中添加放射性的脫氧核苷酸前體觀察到的。作為蛋白質(zhì)生物合成的第一步,轉(zhuǎn)錄是mRNA以及非編碼RNA(tRNA、rRNA等)的合成步驟。即以雙鏈DNA中的一條鏈為模板,以腺三磷(ATP)、胞三磷(CTP)、鳥三磷(GTP)和尿三磷(UTP)4種核苷三磷酸為原料,在RNA聚合酶催化下合成RNA的過程。其過程先以經(jīng)剪切作用除去內(nèi)含子的成熟mRNA為模板,合成RNA/DNA雜化雙鏈,然后水解RNA鏈,再以剩下的DNA單鏈為模板合成DNA雙鏈。核蛋白體循環(huán)是指活化的氨基酸在核糖體上,以mRNA為模板合成多肽鏈的過程??勾x物抗代謝物:在微生物生長過程中常常需要一些生長因子才能正常生長,可以利用生長因子的結(jié)構(gòu)類似物干擾集體的正常代謝,以達到抑制微生物生長的目的。基因工程藥物  基因工程藥物是先確定對某種疾病有預(yù)防和治療作用的蛋白質(zhì),然后將控制該蛋白質(zhì)合成過程的基因取出來,經(jīng)過一系列基因操作,最后將該基因放入可以大量生產(chǎn)的受體細胞中去,這些受體細胞包括細菌、酵母菌、動物或動物細胞、植物或植物細胞,在受體細胞不斷繁殖過程中,大規(guī)模生產(chǎn)具有預(yù)防和治療這些疾病的蛋白質(zhì),即基因疫苗或藥物。就是利用基因工程技術(shù)、細胞工程技術(shù)、微生物工程技術(shù)、酶工程技術(shù)、蛋白質(zhì)工程技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)等來研究和開發(fā)藥物,用來診斷、治療和預(yù)防疾病的發(fā)生。生物藥物 生物藥物是指運用生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)等的研究成果,從生物體、生物組織、細胞、體液等,綜合利用物理學(xué)、化學(xué)、生物化學(xué)、生物技術(shù)和藥學(xué)等學(xué)科的原理和方法制造的一類用于預(yù)防、治療和診斷的制品。單克隆抗體當(dāng)機體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。如果能選出一個制造一種專一抗體的漿細胞進行培養(yǎng),就可得到由單細胞經(jīng)分裂增殖而形成細胞群,即單克隆?;蛭膸煲粋€生物體的基因組DNA用限制性內(nèi)切酶部分酶切后,將酶切片段插入到載體DNA分子中,所有這些插入了基因組DNA片段的載體分子的集合體,將包含這個生物體的整個基因組,也就是構(gòu)成了這個生物體的基因文庫。以mRNA為模板,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化,在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA,與適當(dāng)?shù)妮d體(常用噬菌體或質(zhì)粒載體)連接后轉(zhuǎn)化受體菌,則每個細菌含有一段cDNA,并能繁殖擴增,這樣包含著細胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細胞的cDNA文庫。 核酸雜交( Hybridization): 互補的核苷酸序列(DNA與DNA、DNA與RNA、RNA與RNA等)通過WatsonCrick堿基配對形成非共價鍵,從而形成穩(wěn)定的同源或異源雙鏈分子的過程,成為核酸分子雜交技術(shù),又稱核酸雜交。雜交的雙方是待測核酸及探針。探針以放射核素或非放射性核素標(biāo)記,以利于雜交信號的檢測。分子病由于遺傳上的原因而造成的蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)或合成量的異常所引起的疾病。如果DNA分子的堿基種類或順序發(fā)生變化,那么由它所編碼的蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)就發(fā)生相應(yīng)的變化,嚴重的蛋白質(zhì)分子異??蓪?dǎo)致疾病的發(fā)生?;蚯贸コ松锛毎⒄婧松锏纳臣毎?、體細胞或干細胞基因組中的基因等。常用同源重組的方法。 該技術(shù)是上個世紀90年代出現(xiàn)的最新外源DNA導(dǎo)入技術(shù)。指外源DNA與受體細胞基因組中序列相同或相近的基因發(fā)生同源重組,從而代替受體細胞基因組中的相同/相似的基因序列,整合入受體細胞的基因組中?;蚯度胗址Q基因置換,它是利用內(nèi)源基因序列兩側(cè)或外面的斷裂點,用同源序列的目的基因整個置換內(nèi)源基因。由于常用計算機硅芯片作為固相支持物,所以稱為DNA芯片?! 。ㄒ唬?變性  核酸在變性因子作用下,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開,氫鍵斷裂,成為無規(guī)則的線團樣,此種由螺旋向線團轉(zhuǎn)化的作用稱為核酸的變性。  引起核酸變性的因素很多,由于溫度升高而引起的變性稱熱變性。C~80176。DNA中GC堿基配對愈多,變性溫度值也愈高。這一現(xiàn)象稱為增色效應(yīng)?! 。ǘ?復(fù)性  變性DNA在適當(dāng)條件下,彼此分開的兩條鏈重新締合恢復(fù)其天然DNA性質(zhì),這一過程稱為復(fù)性或退火。DNA樣品的性質(zhì)與復(fù)性速度有關(guān)。蛋白質(zhì)印跡用來檢測在不均一的蛋白質(zhì)樣品中是否存在目標(biāo)蛋白的一種方法。親和層析利用分子與其配體間特殊的、可逆性的親和結(jié)合作用而進行分離的一種層析技術(shù)。如用寡脫氧胸苷酸纖維素分離純化信使核糖核酸;用DNA纖維素分離依賴DNA的DNA聚合酶;用瓊脂糖抗體制劑分離抗原;用金屬螯合柱分離帶有成串組氨酸標(biāo)簽的重組蛋白質(zhì)等。那些沒有親和力的蛋白質(zhì)由于不被吸附,直接流出,從而與被分離的蛋白質(zhì)分開,然后選用適當(dāng)?shù)南疵撘海?改變結(jié)合條件將被結(jié)合的蛋白質(zhì)洗脫下來,這種分離純化蛋白質(zhì)的方法稱為親和層析。離子交換層析固定相是離子交換劑的層析分離技術(shù)。在生物化學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域此法常用于分離蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)物質(zhì),多是交聯(lián)的聚糖(如葡聚糖或瓊脂糖)類物質(zhì),使蛋白質(zhì)混合物中的物質(zhì)按分子大小的不同進行分離。一種利用帶孔凝膠珠作基質(zhì),按照分子大小分離蛋白質(zhì)或其它分子混合物的層析技術(shù)。問答題(有些和名解重復(fù))蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)二級結(jié)構(gòu):多肽鏈或多核苷酸鏈沿分子的一條軸所形成的旋轉(zhuǎn)和折疊等,主要是由分子內(nèi)的氫鍵維系的局部空間排列。DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的特點:(1)主鏈(backbone)  由脫氧核糖和磷酸基通過酯鍵交替連接而成。主鏈處于螺旋的外則,這正好解釋了由糖和磷酸構(gòu)成的主鏈的親水性。 (2)堿基對(base pair)  堿基位于螺旋的內(nèi)則,它們以垂直于螺旋軸的取向通過糖苷鍵與主鏈糖基相連。配對堿基總是A與T和G與C。DNA結(jié)構(gòu)中的堿基對與Chatgaff的發(fā)現(xiàn)正好相符。每對堿基處于各自自身的平面上,但螺旋周期內(nèi)的各堿基對平面的取向均不同。并不影響雙螺旋的對稱性。這一特征能很好的闡明DNA作為遺傳信息載體在生物界的普遍意義。小溝位于雙螺旋的互補鏈之間,而大溝位于相毗鄰的雙股之間。 在大溝和小溝內(nèi)的堿基對中的N 和O 原子朝向分子表面。固定化酶的概念制備方法及優(yōu)點 固定化酶:水溶性酶經(jīng)物理或化學(xué)方法處理后,成為不溶于水的但仍具有酶活性的一種酶的衍生物。優(yōu)點:固定化酶(immobilized enzyme)不溶于水的酶。酶固定化后一般穩(wěn)定性增加,易從反應(yīng)系統(tǒng)中分離,且易于控制,能反復(fù)多次使用。制備方法:固定化酶的制備方法有物理法和化學(xué)法兩大類。物理法固定酶的優(yōu)點在于酶不參加化學(xué)反應(yīng),整體結(jié)構(gòu)保持不變,酶的催化活性得到很好保留?;瘜W(xué)法是將酶通過化學(xué)鍵連接到天然的或合成的高分子載體上,使用偶聯(lián)劑通過酶表面的基團將酶交聯(lián)起來,而形成相對分子量更大、不溶性的固定化酶的方法.β氧化與脂肪酸合成的比較 合成分解反應(yīng)最活躍時期高糖膳食后饑餓刺激激素胰島素/胰高血糖素高比值胰島素/胰高血糖素低比值主要組織定位肝臟為主肌肉、肝臟亞細胞定位胞漿線粒體為主?;d體檸檬酸(線粒體到胞漿)肉毒堿(胞漿到線粒體)含磷酸酰疏基乙胺的活性載體酰基載體蛋白區(qū),CoACoA氧化還原輔因子NADPHNAD+,F(xiàn)AD二碳供體/產(chǎn)物丙二酰CoA;?;w乙酰CoA:產(chǎn)物激活劑 抑制劑檸檬酸脂輔酶CoA(抑制乙酰CoA羧化酶)丙二酰CoA(抑制肉毒堿?;D(zhuǎn)移酶)反應(yīng)產(chǎn)物軟脂酸乙酰輔酶A乙酰CoA的來源去路及在細胞內(nèi)的定位  乙酰CoA(乙酰輔酶A)乙酰CoA(乙酰輔酶A)可以通過脂肪酸的β氧化、丙酮酸氧化脫羧和氨基酸的降解生成,其實是活化了的乙酸。是三羧酸循環(huán)的起始底物,不僅是糖代謝的中間產(chǎn)物,也是脂肪和某些氨基酸的代謝產(chǎn)物。   在肝臟中,多余的乙酰輔酶A可以轉(zhuǎn)化成酮體。肝是最主要的合成場所,其次為小腸、腎上腺皮質(zhì)等等。   酮體是肝分解氧化脂酸時候特有的中間代謝物,只有肝能利用乙酰CoA生成酮體。青霉素的結(jié)構(gòu)與細胞壁的成分粘肽結(jié)構(gòu)中的D丙氨酰D丙氨酸近似,可與后者競爭轉(zhuǎn)肽酶,阻礙粘肽的形成,造成細胞壁的缺損,使細菌失去細胞壁的滲透屏障,對細菌起到殺滅作用。細菌不能利用周圍環(huán)境中的葉酸,只能利用結(jié)構(gòu)較葉酸簡單的對氨苯甲酸,在細菌二氫葉酸合成酶和還原酶的參與下,合成四氫葉酸,以供細菌生長繁殖的需要?,F(xiàn)代生物技術(shù)的定義主要內(nèi)容及在新藥研究開發(fā)中的應(yīng)用生物技術(shù)(biotechnology)也譯成生物工程,生物學(xué)研究與應(yīng)用的技術(shù)方面,包括,基因工程、細胞工程、發(fā)酵工程和酶工程,現(xiàn)代生物技術(shù)發(fā)展到高通量組學(xué)(omics)芯片技術(shù)、基因與基因組人工設(shè)計與合成生物學(xué)等系統(tǒng)生物技術(shù)。   疾病預(yù)防   利用疫苗對人體進行主動免疫是預(yù)防傳染性疾病的最有效手段之一。   20世紀70年代以后,人們開始利用基因工程技術(shù)來生產(chǎn)疫苗。例如用基因工程制造乙肝疫苗用于乙型肝炎的預(yù)防。   疾病診斷   生物技術(shù)的開發(fā)應(yīng)用,提供了新的診斷技術(shù),特別是單克隆抗體診斷試劑和DNA診斷技術(shù)的應(yīng)用,使許多疾病特別是腫瘤、傳染病在早期就能得到
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