酶標(biāo)儀的工作原理與基本結(jié)構(gòu)-閱讀頁(yè)
2025-07-03 01:31本頁(yè)面
【正文】 管等。（一）光電池某些半導(dǎo)體材料受光照射時(shí)，受光面和背光面之間會(huì)產(chǎn)生電位差，如果在這兩面之間連接上檢流計(jì)，會(huì)看到有電流通過(guò)，這種光電轉(zhuǎn)換器件稱(chēng)為光電池。圖10 硒光電池結(jié)構(gòu)示意圖在作為電極之一的金屬板（如厚1～2mm）的鐵、銅、鋁板）上。經(jīng)過(guò)熱處理后，在硒半導(dǎo)體和金屬薄膜的分界面上形成一層阻擋層——PN結(jié)，其附加電場(chǎng)的方向由金屬膜指向硒。當(dāng)光通過(guò)金屬膜照射到半導(dǎo)體上時(shí)，半導(dǎo)體中處于束縛狀態(tài)的電子吸收了光子的能量后，成為自由電子，這時(shí)可以順利地通過(guò)阻擋層到金屬膜上。另一極由于失去了電子，積累了較多的空穴，這樣就產(chǎn)生了“光生電動(dòng)勢(shì)”。如果有外電路將兩電極接通，便有（光）電流流經(jīng)外回路。從其工作原理我們可以看出，光電池不用外接電源，只要受光照射，便能產(chǎn)生電流。不同材料的光電池，其光譜靈敏范圍不一樣。圖11是硒光電池和人眼對(duì)不同波長(zhǎng)的光的感應(yīng)曲線(xiàn)。用三用表就可以測(cè)量出來(lái)。在一般的室內(nèi)照明條件下，測(cè)得的電流為幾十微安以上。硒光電池受光連續(xù)照射的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或受強(qiáng)光照射后，光電流會(huì)很快上升至一個(gè)較高的數(shù)值，然后逐漸下降，這一現(xiàn)象叫做光電池的疲勞現(xiàn)象，其表現(xiàn)為儀器上的指針或反射光點(diǎn)慢慢后退。在插入濾光片之前，不要開(kāi)亮燈泡，以免強(qiáng)光照射。另外，光電池很容易受潮而致使其產(chǎn)生的電流大小不穩(wěn)定，平時(shí)保存要防潮、防光，最好用深色紙包起來(lái)放入干燥器皿中。其缺點(diǎn)是對(duì)光的響應(yīng)速度慢，不能檢測(cè)脈沖光束；內(nèi)阻小，不便進(jìn)行信號(hào)放大等。和硒光電池相比，硅光電池最大的優(yōu)點(diǎn)是使用壽命長(zhǎng)——可使用10年以上。不同廠家生產(chǎn)的硅光電池，其光譜靈敏范圍不一樣。所以，使用硅光電池時(shí)，一定要事先弄清楚其工作波長(zhǎng)，即光譜靈敏第范圍。靈敏度是指在單位光通量照射下，光電轉(zhuǎn)換元件所產(chǎn)生的光電流的大小。酶標(biāo)儀的工作原理及基本結(jié)構(gòu)一、酶標(biāo)聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法酶標(biāo)聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法采用酶標(biāo)記技術(shù)，使待測(cè)標(biāo)本與事先包被在塑料凹孔板內(nèi)的相應(yīng)抗原或抗體相結(jié)合，形成免疫復(fù)合物。當(dāng)加入酶的相應(yīng)底物時(shí)，由于酶的催化作用，呈現(xiàn)顏色反應(yīng)。這樣，原來(lái)人體中無(wú)色的抗原或抗體，與酶聯(lián)接后仍保持免疫和酶的活性。抗原或抗體的含量越高，顏色就越深。酶標(biāo)法（并稱(chēng)固相酶免疫測(cè)定）可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以檢測(cè)的具體條件，可設(shè)計(jì)出各種不同的檢測(cè)方法。（一）抗體夾心法雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原最常用的方法，圖10為其示意圖。然后洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。然后洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。然后徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。（4）加底物顯色。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。（二）間接法間接法是檢測(cè)抗體最常用的方法，圖11為其示意圖。操作步驟如下：圖11 間接法測(cè)抗體示意圖（1）將特異體抗原與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗原。（2）加稀釋的受檢血清，使血清中的特異性抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合，在洗滌過(guò)程中被洗去。清洗后，固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。（三）競(jìng)爭(zhēng)法競(jìng)爭(zhēng)法可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。具體操作步驟為：圖12 競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原示意圖（1）將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。（2）在待測(cè)管中加入受檢標(biāo)本與一定量的酶標(biāo)抗原的混合溶液，使之與固相抗體反應(yīng)。若受檢標(biāo)本中含有抗原，則與酶標(biāo)抗原以同樣的機(jī)會(huì)與固相抗體結(jié)合?！皡⒖脊堋敝兄患用笜?biāo)抗原，保溫后，酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達(dá)最充分的量。（3）加底物顯色。參考管中顏色深度與待測(cè)管顏色深度之差，代表受檢標(biāo)本中抗原的量。二、酶標(biāo)儀的工作原理及結(jié)構(gòu)由酶標(biāo)聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法可知，酶標(biāo)義應(yīng)該用比色法來(lái)分析抗原或抗體的含量，即它應(yīng)依照比色原理進(jìn)行工作。圖13是一種單通道、自動(dòng)進(jìn)樣的酶標(biāo)儀的工作原理圖。該單色光束經(jīng)過(guò)塑料微孔板中的待測(cè)標(biāo)本，被標(biāo)本吸收掉一部分后，到達(dá)光電檢測(cè)器。此電信號(hào)經(jīng)前置放大、對(duì)數(shù)放大、模數(shù)轉(zhuǎn)換等模擬信號(hào)處理后，送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算。微處理機(jī)還通過(guò)控制電路來(lái)控制X、Y方向的機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)的運(yùn)動(dòng)。微孔板是一種用來(lái)盛裝待測(cè)樣本的透明塑料板，板上有多排小孔，如有40孔板、55孔板和96孔板等多種規(guī)格。根據(jù)儀器的不同，既可以一個(gè)孔一個(gè)孔地檢測(cè)，也可以一排孔一排孔地檢測(cè)。和光電比色計(jì)一樣，使用濾光片作過(guò)濾裝置時(shí)，將濾光片設(shè)計(jì)到微孔板的前面和后面效果是一樣的。光源燈發(fā)出的光，經(jīng)過(guò)聚光鏡、光闌后，到達(dá)反射鏡，經(jīng)反射鏡作90o反射后，垂直通過(guò)比色液，然后再經(jīng)濾光片到達(dá)光電管。由酶標(biāo)儀的工作原理方框圖和光路圖可以看出，它和普通光電比色計(jì)的不同之處在于：一是盛裝比色液的容器不是使用比色皿，而是使用了塑料微孔板，塑料微孔板常用透明的聚乙烯材料制作，之所以采用塑料微孔板來(lái)作固相載體，是利用它對(duì)抗原或抗體有較強(qiáng)的吸附這一特點(diǎn)；二是酶標(biāo)儀的光束是垂直通過(guò)待測(cè)液的；三是酶標(biāo)儀通常不使用A而是使用光密度OD來(lái)表示吸光度。其中，自動(dòng)型的儀器設(shè)有X和Y兩個(gè)方向的驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)，在機(jī)械裝置的驅(qū)動(dòng)下，微孔板上的小孔一個(gè)個(gè)依次進(jìn)入光束下面測(cè)試。在單通道酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上，又發(fā)展了多通道、全自動(dòng)型酶標(biāo)儀。如8通道的儀器，設(shè)有8條光束（或8個(gè)光源）、8個(gè)檢測(cè)器和8個(gè)放大器。多通道酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度快，但其結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，價(jià)格也較貴，多用于大中型醫(yī)院。歡迎您的光臨，！希望您提出您寶貴的意見(jiàn)，你的意見(jiàn)是我進(jìn)步的動(dòng)力。我不知道年少輕狂，我只知道勝者為王。什么時(shí)候離光明最近？那就是你覺(jué)得黑暗太黑的時(shí)候。
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