酶標儀的工作原理與基本結(jié)構(gòu)-免費閱讀
【正文】 什么時候離光明最近？那就是你覺得黑暗太黑的時候。如8通道的儀器，設(shè)有8條光束（或8個光源）、8個檢測器和8個放大器。光源燈發(fā)出的光，經(jīng)過聚光鏡、光闌后，到達反射鏡，經(jīng)反射鏡作90o反射后，垂直通過比色液，然后再經(jīng)濾光片到達光電管。微處理機還通過控制電路來控制X、Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)的運動。二、酶標儀的工作原理及結(jié)構(gòu)由酶標聯(lián)免疫吸附實驗法可知，酶標義應(yīng)該用比色法來分析抗原或抗體的含量，即它應(yīng)依照比色原理進行工作。若受檢標本中含有抗原，則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結(jié)合。清洗后，固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。（二）間接法間接法是檢測抗體最常用的方法，圖11為其示意圖。然后洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。酶標法（并稱固相酶免疫測定）可用于測定抗原，也可用于測定抗體。酶標儀的工作原理及基本結(jié)構(gòu)一、酶標聯(lián)免疫吸附實驗法酶標聯(lián)免疫吸附實驗法采用酶標記技術(shù)，使待測標本與事先包被在塑料凹孔板內(nèi)的相應(yīng)抗原或抗體相結(jié)合，形成免疫復(fù)合物。和硒光電池相比，硅光電池最大的優(yōu)點是使用壽命長——可使用10年以上。硒光電池受光連續(xù)照射的時間過長或受強光照射后，光電流會很快上升至一個較高的數(shù)值，然后逐漸下降，這一現(xiàn)象叫做光電池的疲勞現(xiàn)象，其表現(xiàn)為儀器上的指針或反射光點慢慢后退。不同材料的光電池，其光譜靈敏范圍不一樣。當(dāng)光通過金屬膜照射到半導(dǎo)體上時，半導(dǎo)體中處于束縛狀態(tài)的電子吸收了光子的能量后，成為自由電子，這時可以順利地通過阻擋層到金屬膜上。在檢驗儀器中常用的光電檢測器有光電池、光電管和光電倍增管等。使用比色皿時，其放置方向也應(yīng)注意。在使用中應(yīng)該注意的是，每臺儀器所配的比色皿都是成套的，所以臺與臺之間所帶的比色皿不能混用，否則會帶來較大的測量誤差。三、比色皿比色皿又叫比色環(huán)、比色池、比色槽、吸收池等，它主要用來盛裝比色分析時的樣品液。干涉濾光片就是利用光的干涉原理來產(chǎn)生窄譜帶光束的元件。如需要其他波長的濾光片，可以自行購買。 圖7 截止濾光片的透光特性 圖8 截止濾光片的名義值截止濾光片的名義值用半高波長和陡度表示，如圖8。這種濾光片所呈現(xiàn)的顏色就是其透過光的顏色。圖6是一塊藍色濾光片的透射比曲線。為了獲得穩(wěn)定的測量結(jié)果，保持光源燈發(fā)光的穩(wěn)定性是非常重要的，這就要求給光源燈提供穩(wěn)定的供電電壓。由于燈泡內(nèi)的熱對流，使鹵化鎢氣體產(chǎn)生流動。圖5 鎢絲燈的能量曲線其不足之處是，在點燃時鎢絲會不斷向外蒸發(fā)出鎢分子。此單色光通過比色皿時，被比色皿中盛放的樣品液吸收掉一部分，然后照在光電檢測器上。圖3 標準曲線 有了標準曲線圖，便可以對溶液進行測量。Cx用同樣的方法處理標準與被測溶液，使其成色后，在同樣的實驗條件下，用同一臺儀器分別測出它們的吸光度。吸光系數(shù)K＝A/（C溶液的濃度越大、透過的液層越厚、入射的光線越強，則對光線的吸收就越多。當(dāng)一束平行單色光照射到均勻、非散射的溶液時，光的一部分被吸收，一部分透過溶液，一部分被比色皿的表面所反射。因此，可以利用這部分光線通過溶液后被吸收的程度來確定溶液的濃度。例如，高錳酸鉀吸收曲線如圖所示。有色溶液對光的吸收是有選擇性的。光子的存在可以從光電效應(yīng)中得到充分的證明。表1 各種色光及紅外線、紫外線的近似近波范圍 單位：nm顏色波長范圍顏色波長范圍遠紅外線10001～1000000綠501～560中紅外線2501～10001青481～500近紅外線761～2500藍431～480紅621～760紫401～430橙591～620普通紫外線191～400黃561～590真空紫外線1190除了波動性外，光還具有微粒性。一、光的性質(zhì)從物理學(xué)中我們知道，光具有波動和微粒兩種性質(zhì)，通稱光的波粒兩象性。事實證明，當(dāng)有色溶液的濃度改變時，顏色的深淺也隨著改變。后來改用光電檢測元件代替目視來測量被測溶液中物質(zhì)的含量，這種方法叫光電比色法。不同波長的光被人眼所感受到的顏色是不同的。由式中可知，不同波長的光子具有不同的能量。由于物質(zhì)的性質(zhì)和形態(tài)不同，所以呈現(xiàn)出不同的顏色。透過光中只剩下紫色光，所以高錳酸鉀呈紫色。濃度不同的同一種溶液，其吸收光譜的形狀和最大吸收波長是一樣的，也就是說，不同的物質(zhì)都具有其特定的吸收光譜。根據(jù)前面所敘述的理由可知，選擇濾光片的原則應(yīng)是：濾光片的顏色應(yīng)與待測溶液的顏色為互補色。在比色分析中，常把透過光的強度占入射光的強度的百分比[(It / Io)％]稱為透過率或透射比，用T表示，即T＝（It / Io）％。此公式說明：在入射光一定時，溶液的吸光度與溶液的濃度及液層厚度成正比。四、定量方法用光電比色計和分光光度計測定有色溶液的濃度有計算法和標準曲線法兩種。Lx將兩式相除可得： AS /Ax ＝KS Ax/ AS由于儀器的性能和工作環(huán)境都是在不斷變化的，因此，在采用計算機時，必須每次都要對標準液和被測液進行測量，然后利用上式進行計算，否則，會帶來較大的測量誤差。一般的光電比色計由光源、濾光片、比色皿、光電檢測器、放大和顯示等6部分組成。（一）鎢絲燈鎢絲燈是可見光區(qū)和近紅外區(qū)最常用的光源，它適應(yīng)的波長范圍在320～2500nm之間，如圖5所示。（二）鹵鎢燈鹵鎢燈是在鎢燈中加入適量的鹵素或鹵化物（
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