【正文】 溶液，比色皿除了要求具有良好的透光特性之外，還應有較強的耐腐蝕性。否則，會產(chǎn)生光的反射和折射，嚴重影響測量結果。從其工作原理我們可以看出，光電池不用外接電源，只要受光照射，便能產(chǎn)生電流。其缺點是對光的響應速度慢，不能檢測脈沖光束；內(nèi)阻小，不便進行信號放大等?？乖蚩贵w的含量越高，顏色就越深。根據(jù)顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。（2）在待測管中加入受檢標本與一定量的酶標抗原的混合溶液，使之與固相抗體反應。此電信號經(jīng)前置放大、對數(shù)放大、模數(shù)轉換等模擬信號處理后，送入微處理器進行數(shù)據(jù)處理和計算。在單通道酶標儀的基礎上，又發(fā)展了多通道、全自動型酶標儀。由酶標儀的工作原理方框圖和光路圖可以看出，它和普通光電比色計的不同之處在于：一是盛裝比色液的容器不是使用比色皿，而是使用了塑料微孔板，塑料微孔板常用透明的聚乙烯材料制作，之所以采用塑料微孔板來作固相載體，是利用它對抗原或抗體有較強的吸附這一特點；二是酶標儀的光束是垂直通過待測液的；三是酶標儀通常不使用A而是使用光密度OD來表示吸光度。圖13是一種單通道、自動進樣的酶標儀的工作原理圖。（三）競爭法競爭法可用于測定抗原，也可用于測定抗體。然后徹底洗滌未結合的酶標抗體。當加入酶的相應底物時，由于酶的催化作用，呈現(xiàn)顏色反應。在插入濾光片之前，不要開亮燈泡，以免強光照射。另一極由于失去了電子，積累了較多的空穴，這樣就產(chǎn)生了“光生電動勢”。有的比色皿上標有箭頭，用來指示光的方向。比色皿的形狀一般為方形，圓形的比較少。溫度升高時，不但它的半寬度會加寬，峰值波長也會起變化。根據(jù)其性能的不同，吸收濾光片又可分為帶通濾光片和截止濾光片兩類。在交流供電時，通常采用磁飽和穩(wěn)壓器供電。鎢絲的蒸發(fā)會使燈絲變細，縮短壽命，更重要的影響是蒸發(fā)出的鎢分子到達燈泡的內(nèi)壁時，會沉積在內(nèi)壁上，隨著工作時間的延長，內(nèi)壁沉積的鎢會越來越厚，使燈泡透出來的光越來越弱。為了方便工作，現(xiàn)代光電比色計大都加有對數(shù)運算放大器，使用時只要選用一種合適的標準溶液進行定標，然后便可以直接讀取溶液的濃度值，使工作效率大大提高。CS它們之間的關系可以用下式表示：A＝K由于有色物質(zhì)對光的吸收具有選擇性，因此，在進行比色測定時，只能用光波中能被有色溶液吸收的那部分光線，即應該有單色光進行比色測定。實踐證明，溶液所呈現(xiàn)的顏色是它的主要吸收光的互補色。式中υ是光的頻率，h為普朗克常量。因此，可以通過比較溶液顏色深淺的方法來確定有色溶液的濃度，對溶液中所含的物質(zhì)進行定量分析?？梢杂妹枋鲭姶挪ǖ男g語，如振動頻率（υ）、波長（λ）、速度（c ）、周期（T ）來描述它。如綠光和紫光為互補色，黃光和藍光為互補色等等。對于任何一種有色溶液，都可以測繪出它的吸收曲線。這樣，上式可簡化為：Io＝Ia +It當入射光的強度一定時，被吸收的光的強度越大，透過光的強度就越小。K值越大，說明比色分析時的靈敏度越高。這一關系式是設計光電比色計和分光光度計的基礎，也是比色分析的基本計算公式之一。實際上，這種理想的光源并不存在，所有光源的光強都隨波長而變。這一過程一般稱為鹵鎢循環(huán)或鎢的再生循環(huán)。即：半寬度＝λ2λ1。陡度定義為：陡度＝半高波長/(λ1λ3)。干涉濾光片雖然性能優(yōu)越，但其價格昂貴。在其他條件不變的情況下，％。如硒光電池、硅光電池等，其中硒光電池應用較廣，它的結果如圖10所示。圖11 硒光電池和人眼對不同波長光的感應曲線在普通室內(nèi)照明的條件下，硒光電池產(chǎn)生的光電流有幾十至幾百微安。如有的工作在300～1100nm，有的工作在500～1000nm，還有的工作在380～780nm?，F(xiàn)介紹3種最常用的方法。然后洗滌除去未結合的抗原及雜質(zhì)。然后洗滌。每個小孔可以盛放零點幾毫升的溶液。酶標儀的其他部分的結構，與光電比色計和小型生化分析儀基本相同。贈語； 如果我們做與不做都會有人笑，如果做不好與做得好還會有人笑，那么我們索性就做得更好，來給人笑吧！ 現(xiàn)在你不玩命的學，以后命玩你。酶標儀既可以使用和分光光度計相同的單色器，也可以使用干涉濾光片來獲得單色光。參考管中由于結合的酶標抗原量最多，故顏色最深。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體。具體操作步驟如下：圖10 雙抗體夾心法測抗原示意圖（1）將特異性抗體與固相載體聯(lián)結，形成固相抗體。除了光譜靈敏范圍之外，光電檢測元件的另一個重要指標是積分靈敏度，簡稱靈敏度。方法是先將表置于100μA或50μA檔，有正表棒接硒光電池的正極——背面鋁片，負表棒接負極——正面集電環(huán)。然后，再在硒上濺鍍一層半透明的金屬薄膜（如銀或氧化鎘等），作為另一極。比色皿的內(nèi)壁和透光外壁都應注意清潔，不能用硬質(zhì)纖維或用手去摸。另外還有一種濾光片叫中性濾光片，可以用它作吸光度的標準。目前，國內(nèi)生產(chǎn)的光電比色計一般只附有常用的42號、50號和65號3塊波光片。半寬度越小，表示透過的單色光越純。鹵鎢燈的壽命通?？蛇_2000h以上，它的另一優(yōu)點是體積比同功率的鎢絲燈要小得多。（一）鎢絲燈鎢絲燈是可見光區(qū)和近紅外區(qū)最常用的光源，它適應的波長范圍在320～2500nm之間，如圖5所示。 Ax/ AS由于儀器的性能和工作環(huán)境都是在不斷變化的，因此，在采用計算機時，必須每次都要對標準液和被測液進行測量，然后利用上式進行計算，否則，會帶來較大的測量誤差。四、定量方法用光電比色計和分光光度計測定有色溶液的濃度有計算法和標準曲線法兩種。在比色分析中，常把透過光的強度占入射光的強度的百分比[(It / Io)％]