酶標(biāo)儀的工作原理與基本結(jié)構(gòu)(完整版)
【正文】 燈（包括鹵鎢燈）的發(fā)光穩(wěn)定度與所加的電壓有密切的關(guān)系。其燈壁多采用石英或高硅氧玻璃。鎢絲燈靠電能將鎢絲加熱至白熾而發(fā)光，它的光譜分布與燈絲的工作溫度有關(guān)。光電比色計(jì)的方框圖如圖4所示。再者，光電比色計(jì)在使用時(shí)，一般都或多或少會(huì)偏離朗伯比爾定律，故欲得到準(zhǔn)確的測量結(jié)果，常采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法。CS計(jì)算法必須嚴(yán)格遵守朗伯比爾定律的應(yīng)用條件，方能得到準(zhǔn)確的結(jié)果。此式就是光的吸收定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式，又叫朗伯比爾定律。T越大，表明有色溶液的透光程度越大。三、朗伯比爾（LamberBeer）定律溶液顏色的深淺與濃度之間的數(shù)量關(guān)系可以用吸收定律來描述。如同根據(jù)指紋可以辨認(rèn)眾人一樣，在光譜分析中，可以根據(jù)吸收光譜的不同來鑒別物質(zhì)。通常用吸收曲線來描述溶液對各種波長的光的吸收情況。透明物質(zhì)的顏色就是它透過光波的顏色。波長越短，即頻率越高，能量越大。在可見光之外是紅外線和紫外線。利用這種方法制成的儀器叫光電比色計(jì)。. . . .酶免測試的工作原理吸光度測試的準(zhǔn)確性對于酶免測試結(jié)果的重要性酶標(biāo)儀的組成部分和工作原理第一節(jié) 比色分析的基本理論許多化學(xué)物質(zhì)具有顏色，有些無色的化合物也可以和顯色劑作用而生成有色物質(zhì)。光電比色計(jì)屬于吸收光譜儀器范圍。各種色光及紅外線、紫外線的近似波長范圍如表1所示。反之亦然。不透明物質(zhì)的顏色是其反射光波的顏色。讓不同波長的光通過一定濃度的有色溶液，分別測出它對各種波長的光的吸收程度（用吸光度A來表示），以波長為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖，所得到的曲線稱為溶液的吸收曲線或吸收光譜圖。從圖2中還可以看出，溶液的濃度越大，對（綠）光的吸收程度越大。它是由朗伯定律和比爾定律相結(jié)合而成的，所以又稱朗伯比爾定律。當(dāng)一束平行單色光通過有色溶液時(shí)，由于溶液吸收了一部分光線，光線的強(qiáng)度就要減弱。這一定律是比色分析和其他吸收光譜分析的理論基礎(chǔ)。（一）計(jì)算法根據(jù)被測溶液濃度的大致范圍，先配制一已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。LS/（Kx（二）標(biāo)準(zhǔn)曲線法這種方法分以下幾步進(jìn)行：(1) 先配制5種以上標(biāo)準(zhǔn)濃度的溶液；(2) 測出每種溶液的吸光度A；(3) 做A、C標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，如圖3所示。圖4 光電比色計(jì)方框圖光源發(fā)出的復(fù)合光經(jīng)濾光片濾除后，變?yōu)榻频膯紊?。鎢絲燈的特點(diǎn)是結(jié)構(gòu)簡單、價(jià)格便宜、壽命較長，通?？梢怨ぷ?000h以上。鹵鎢燈有比普通鎢燈高得多的發(fā)光效率和長得多的壽命，這主要是因?yàn)樵邴u鎢燈中，鎢蒸氣在靠近燈壁的低溫區(qū)與鹵素相結(jié)合，生成了揮發(fā)性的鹵化鎢氣體。已知在可見光區(qū)，其能量輸出的波動(dòng)約為所加電壓波動(dòng)的4次方倍。濾光片通過單色光的純度，通常用其光譜特性曲線的半寬度表示。圖6 吸收濾光片的透光曲線（一）吸收濾光片吸收濾光片又叫玻璃濾光片，它是在熔化的玻璃中摻以不同的添加劑制成的。復(fù)合濾光片可以得到比玻璃濾光片窄得多的半寬度。如42號和50號的峰值波長分別為420nm和500nm，65號的半高波長為650nm。（三）干涉濾光片由光的干涉原理可知，來自同一光源的兩束光線，在空間不同的路徑而相互疊加時(shí)，若光程差為波長的整數(shù)倍，則互相加強(qiáng)；若光程差為半個(gè)波長的奇數(shù)倍，則互相減弱。需要說明的是，這種濾光片上的標(biāo)稱吸光度值，可能與實(shí)際值有偏差，使用時(shí)要以實(shí)際使用的波長下的測定值為準(zhǔn)。盡管可以做成各種形狀和尺寸，但國際上規(guī)定，液層厚度為10mm的比色皿為標(biāo)準(zhǔn)比色皿。不透光的兩壁被磨成毛沙面或其他不透光面，以示區(qū)別。四、光電檢測器前面已經(jīng)述及，光電檢測器是用來將光能轉(zhuǎn)換成電能的器件。這一阻擋層既能夠阻止硒半導(dǎo)體中的空穴向金屬膜中擴(kuò)散，也能夠阻止金屬膜中的電子向硒半導(dǎo)體中擴(kuò)散。應(yīng)用起來很方便。當(dāng)光電流非常微弱或沒有時(shí)，說明光電池已經(jīng)失效。常用的光電池除了硒光電池外，還有硅光電池。一般光電池的靈敏度為幾百微安/流明。這樣，便可根據(jù)所生成的顏色的深淺，來分析抗原或抗體的含量。（2）加受檢標(biāo)本使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時(shí)間，讓標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。本法只適用于二價(jià)或二價(jià)以上大分子抗原的檢出和定量分析，而不能用于半抗原等小分子的測定。（3）加酶標(biāo)抗免疫球蛋白（酶標(biāo)抗體），它與固相復(fù)合物中的抗體相結(jié)合，從而使該抗體間接地標(biāo)記上酶。若受檢標(biāo)本中無抗原，則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。待測管越淡，表示標(biāo)本中抗原量越多。最后由顯示器和打印機(jī)將測試結(jié)果顯示、打印出來。圖14是一種酶標(biāo)儀的光路系統(tǒng)。多通道酶標(biāo)儀一般都是自動(dòng)型的，它設(shè)有多個(gè)光束和多個(gè)光電檢測器。不要做金錢、權(quán)利的奴隸；應(yīng)學(xué)會(huì)做“金錢、權(quán)利”的主人。最值得欣賞的風(fēng)景，是自己奮斗的足跡。在機(jī)械驅(qū)動(dòng)裝置的作用下，樣品被8個(gè)一排、8個(gè)一排檢測。圖14 一種酶標(biāo)儀光路系統(tǒng)一般酶標(biāo)儀的光束既可以設(shè)計(jì)成從上到下通過比色液，也可以設(shè)計(jì)成從下到上通過比色。但對于非自動(dòng)型的酶標(biāo)儀，它是用手工來移動(dòng)微孔板的，可以省去X、Y方向的機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)及其電路，這樣的儀器體積更小，結(jié)構(gòu)也更簡單。實(shí)際上，酶標(biāo)儀就是一臺變相的光電比色計(jì)或分光光度計(jì)，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)幾乎相同。這樣，受檢標(biāo)本中抗原量越高，則由于這些抗原與固相抗體結(jié)合，競爭性地占去了酶標(biāo)抗原與固相抗體結(jié)合的機(jī)會(huì)，使酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合量越少。（4）加底物顯色，顏色深度代表標(biāo)本中受檢抗體量。其原理為利用酶標(biāo)記的抗體來
畢業(yè)設(shè)計(jì)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1