【正文】 歡迎您的光臨，！希望您提出您寶貴的意見，你的意見是我進(jìn)步的動(dòng)力。根據(jù)儀器的不同，既可以一個(gè)孔一個(gè)孔地檢測(cè)，也可以一排孔一排孔地檢測(cè)。（3）加底物顯色。（2）加稀釋的受檢血清，使血清中的特異性抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。（一）抗體夾心法雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原最常用的方法，圖10為其示意圖。所以，使用硅光電池時(shí)，一定要事先弄清楚其工作波長(zhǎng)，即光譜靈敏第范圍。用三用表就可以測(cè)量出來。圖10 硒光電池結(jié)構(gòu)示意圖在作為電極之一的金屬板（如厚1～2mm）的鐵、銅、鋁板）上。否則說明誤差太大，不應(yīng)再使用。峰值波長(zhǎng)和最大透射比會(huì)隨著時(shí)間而發(fā)生改變，甚至失效。國(guó)產(chǎn)比色計(jì)中6667號(hào)3塊濾光片為截止濾光片。圖6中的半寬度＝530430＝100nm。這一循環(huán)大大減少了鎢在燈泡內(nèi)壁的沉積，它不但延長(zhǎng)了燈泡的壽命，還提高了燈泡的性能。在可見光范圍內(nèi)常用的光源有鎢絲燈和鹵鎢燈。式中標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度已知，AS 和Ax可以用光電比色計(jì)測(cè)量出來，這樣，待測(cè)溶液的濃度便可以由下式求出：Cx＝ CS吸光度A與透射比T的關(guān)系如下：A＝－lgT即吸光度A與透射比T的負(fù)對(duì)數(shù)成正比。這就是說，光強(qiáng)的減弱僅僅與有色溶液對(duì)光的吸收有關(guān)。光吸收最大處所對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)叫最大吸收波長(zhǎng)。圖1 互補(bǔ)色光示意圖 圖2 高錳酸鉀溶液的光吸收曲線物質(zhì)的顏色與光的吸收、透過、反射有關(guān)。我們?nèi)粘Ｋ姷降陌坠?，便是波長(zhǎng)在400～760nm之間的電磁波，它是由紅橙黃綠青藍(lán)紫等色，按照一定比例混合而成的復(fù)合光。濃度越大，顏色越深；濃度越小，顏色越淺。在輻射能量時(shí)，光是以單個(gè)的、一份一份的能量（E＝hυ）的形式輻射的。各種溶液之所以會(huì)呈現(xiàn)不同的顏色，其原因是因?yàn)槿芤褐械挠猩|(zhì)點(diǎn)（分子或離子）選擇性地吸收某種顏色的光所致。如可用綠色光來對(duì)高錳酸鉀溶液進(jìn)行比色測(cè)定。如果入射光的強(qiáng)度不同，則光的吸收只與液層厚度及溶液的濃度有關(guān)。在標(biāo)準(zhǔn)溶液中： AS＝KS在同樣工作條件下，用儀器測(cè)出Ax后，查標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可求得被測(cè)溶液的濃度值Cx 。燈絲的溫度越高，蒸發(fā)速度越快。這兩種鎢燈既可以用交流供電，也可以用直流供電。其優(yōu)點(diǎn)是熱穩(wěn)定性較好、價(jià)格便宜，是普通光電比色計(jì)最常用的濾光片。濾光片的透光特性與溫度有關(guān)。在可見光范圍內(nèi)，比色皿常用無(wú)色光學(xué)玻璃或塑料制成；在紫外區(qū)，常用石英玻璃來制作。因?yàn)橥腹夥较驌Q向后，其透光性可能會(huì)發(fā)生改變。因此，在金屬膜電極上便積累了較多的電子。因此，光電池不要連續(xù)使用過久。酶標(biāo)抗原或抗體與此結(jié)合形成酶標(biāo)記的免疫復(fù)合物。（3）加酶標(biāo)抗體，使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。（4）加底物顯色，顏色深度代表標(biāo)本中受檢抗體量。實(shí)際上，酶標(biāo)儀就是一臺(tái)變相的光電比色計(jì)或分光光度計(jì)，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)幾乎相同。圖14 一種酶標(biāo)儀光路系統(tǒng)一般酶標(biāo)儀的光束既可以設(shè)計(jì)成從上到下通過比色液，也可以設(shè)計(jì)成從下到上通過比色。最值得欣賞的風(fēng)景，是自己奮斗的足跡。多通道酶標(biāo)儀一般都是自動(dòng)型的，它設(shè)有多個(gè)光束和多個(gè)光電檢測(cè)器。最后由顯示器和打印機(jī)將測(cè)試結(jié)果顯示、打印出來。若受檢標(biāo)本中無(wú)抗原，則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。本法只適用于二價(jià)或二價(jià)以上大分子抗原的檢出和定量分析，而不能用于半抗原等小分子的測(cè)定。這樣，便可根據(jù)所生成的顏色的深淺，來分析抗原或抗體的含量。常用的光電池除了硒光電池外，還有硅光電池。應(yīng)用起來很方便。四、光電檢測(cè)器前面已經(jīng)述及，光電檢測(cè)器是用來將光能轉(zhuǎn)換成電能的器件。盡管可以做成各種形狀和尺寸，但國(guó)際上規(guī)定，液層厚度為10mm的比色皿為標(biāo)準(zhǔn)比色皿。（三）干涉濾光片由光的干涉原理可知，來自同一光源的兩束光線，在空間不同的路徑而相互疊加時(shí)，若光程差為波長(zhǎng)的整數(shù)倍，則互相加強(qiáng)；若光程差為半個(gè)波長(zhǎng)的奇數(shù)倍，則互相減弱。復(fù)合濾光片可以得到比玻璃濾光片窄得多的半寬度。濾光片通過單色光的純度，通常用其光譜特性曲線的半寬度表示。鹵鎢燈有比普通鎢燈高得多的發(fā)光效率和長(zhǎng)得多的壽命，這主要是因?yàn)樵邴u鎢燈中，鎢蒸氣在靠近燈壁的低溫區(qū)與鹵素相結(jié)合，生成了揮發(fā)性的鹵化鎢氣體。圖4 光電比色計(jì)方框圖光源發(fā)出的復(fù)合光經(jīng)濾光片濾除后，變?yōu)榻频膯紊?。LS/（Kx這一定律是比色分析和其他吸收光譜分析的理論基礎(chǔ)。它是由朗伯定律和比爾定律相結(jié)合而成的，所以又稱朗伯比爾定律。讓不同波長(zhǎng)的光通過一定濃度的有色溶液，分別測(cè)出它對(duì)各種波長(zhǎng)的光的吸收程度（用吸光度A來表示），以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖，所得到的曲線稱為溶液的吸收曲線或吸收光譜圖。反之亦然。光電比色計(jì)屬于吸收光譜儀器范圍。利用這種方法制成的儀器叫光電比色計(jì)。波長(zhǎng)越短，即頻率越高，能量越大。通常用吸收曲線來描述溶液對(duì)各種波長(zhǎng)的光的吸收情況。三、朗伯比爾（LamberBeer）定律溶液顏色的深淺與濃度之間的數(shù)量關(guān)系可以用吸收定律來描述。此式就是光的吸收定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式，又叫朗伯比爾定律。CS光電比色計(jì)的方框圖如圖4所示。其燈壁多采用石英或高硅氧玻璃。濾光片通過的波長(zhǎng)范圍越窄、透射比越大，說明其質(zhì)量越好。從圖7還可以看出，兩塊截止濾光片、兩塊帶通濾光片，或一塊截止與一塊帶通濾光片，可以組成一塊新的帶通濾光片，這樣的濾光片叫復(fù)合濾光片。故工作在紅外和紫外波段的光學(xué)儀器必須使用特殊的透光材料，如紫外區(qū)使用石英玻璃，紅外區(qū)使用巖鹽、氟化鈣等。圖9 比色皿的形狀示意圖由于經(jīng)常用來盛裝各種化學(xué)