【正文】 檢測已與固相抗原結(jié)合的受檢抗體。（3）加酶標(biāo)抗體，使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。在這種測定方法中有3個必要的試劑：固相的抗原或抗體、酶標(biāo)記的抗原或抗體和酶反應(yīng)的底物。酶標(biāo)抗原或抗體與此結(jié)合形成酶標(biāo)記的免疫復(fù)合物。它幾乎無疲勞現(xiàn)象，是很受歡迎的一種新型光電池。因此，光電池不要連續(xù)使用過久。硒光電池的工作范圍在380～750nm，包含了整個可見光范圍。因此，在金屬膜電極上便積累了較多的電子。光電檢測器必須滿足以下3個條件：（1）光電轉(zhuǎn)換須滿足恒定的函數(shù)關(guān)系；（2）波長響應(yīng)范圍寬；（3）靈敏度高，響應(yīng)速度快，產(chǎn)生的電信號易于檢測和放大，噪聲低。因為透光方向換向后，其透光性可能會發(fā)生改變。在同一測定中所使用的所有比色皿的光徑（內(nèi)徑）必須一致。在可見光范圍內(nèi)，比色皿常用無色光學(xué)玻璃或塑料制成；在紫外區(qū)，常用石英玻璃來制作。它大多采用多層鍍膜等復(fù)雜的工藝制成。濾光片的透光特性與溫度有關(guān)。半高波長是指曲線前沿TM /2處所對應(yīng)的波長，圖中用λ1表示。其優(yōu)點是熱穩(wěn)定性較好、價格便宜，是普通光電比色計最常用的濾光片。曲線上與最大透射比TM對應(yīng)的波長（480nm），叫峰值波長。這兩種鎢燈既可以用交流供電，也可以用直流供電。當(dāng)鹵化鎢碰上高溫?zé)艚z時，又分解成鹵素和鎢。燈絲的溫度越高，蒸發(fā)速度越快。光電檢測器將照在它上面的光信號的強(qiáng)弱轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柕拇笮?，最后由顯示部分將測量結(jié)果顯示出來。在同樣工作條件下，用儀器測出Ax后，查標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可求得被測溶液的濃度值Cx 。Lx）如果測定時選用相同厚度的比色皿使L相等，并使用同一波長的單色光，再保持溫度相同，則K也相等。在標(biāo)準(zhǔn)溶液中： AS＝KSL），它表示有色溶液在單位濃度和單位厚度時的吸光度。如果入射光的強(qiáng)度不同，則光的吸收只與液層厚度及溶液的濃度有關(guān)。設(shè)入射光的強(qiáng)度為IO ，吸光度的強(qiáng)度為Ia ，反射光的強(qiáng)度為Ir，透過光的強(qiáng)度為It。如可用綠色光來對高錳酸鉀溶液進(jìn)行比色測定。圖2中CCC3分別代表不同的濃度，C1 C2 C3。各種溶液之所以會呈現(xiàn)不同的顏色，其原因是因為溶液中的有色質(zhì)點（分子或離子）選擇性地吸收某種顏色的光所致。二、光的互補(bǔ)及有色物質(zhì)的顯色原理若把某兩種顏色的光按照一定的比例混合，能夠得到白色光的話，則這兩種顏色的光就叫做互補(bǔ)色。在輻射能量時，光是以單個的、一份一份的能量（E＝hυ）的形式輻射的。在一些場合，光的波動性比較明顯；在另一些場合，光則主要表現(xiàn)為微粒性。濃度越大，顏色越深；濃度越小，顏色越淺。這種方法雖然比較簡便，但是系列標(biāo)準(zhǔn)管不易保存，誤差較大。我們?nèi)粘Ｋ姷降陌坠猓闶遣ㄩL在400～760nm之間的電磁波，它是由紅橙黃綠青藍(lán)紫等色，按照一定比例混合而成的復(fù)合光。因此，我們可以說，光是由具有能量（hυ）的微粒所組成的，這種微粒被稱為光子。圖1 互補(bǔ)色光示意圖 圖2 高錳酸鉀溶液的光吸收曲線物質(zhì)的顏色與光的吸收、透過、反射有關(guān)。從互補(bǔ)色示意圖可以看出，透過光中除紫色外，其他顏色的光兩兩互補(bǔ)。光吸收最大處所對應(yīng)的波長叫最大吸收波長。濾光片就起這個作用。這就是說，光強(qiáng)的減弱僅僅與有色溶液對光的吸收有關(guān)。L式中，A為吸光度；K為吸（消）光系數(shù)；C為溶液的濃度；L為液層厚度。吸光度A與透射比T的關(guān)系如下：A＝－lgT即吸光度A與透射比T的負(fù)對數(shù)成正比。Cx式中標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度已知，AS 和Ax可以用光電比色計測量出來，這樣，待測溶液的濃度便可以由下式求出：Cx＝ CS基于這種方法而設(shè)計成的儀器叫光電比色計。在可見光范圍內(nèi)常用的光源有鎢絲燈和鹵鎢燈。使用鹵鎢燈可以解決這一問題。這一循環(huán)大大減少了鎢在燈泡內(nèi)壁的沉積，它不但延長了燈泡的壽命，還提高了燈泡的性能。目前，絕大部分采用直流供電。圖6中的半寬度＝530430＝100nm。這類濾光片的半寬度較寬，通常在100nm左右；最大透射比較小，通常在20左右。國產(chǎn)比色計中6667號3塊濾光片為截止濾光片。因此，在光源燈和濾光片之間常加上一塊隔熱玻璃，以減少溫度的影響。峰值波長和最大透射比會隨著時間而發(fā)生改變，甚至失效。除了盛放液體的比色皿之外，還有用來盛裝氣體的比色皿。否則說明誤差太大，不應(yīng)再使用。一般加液量只要稍多于1/2即可。圖10 硒光電池結(jié)構(gòu)示意圖在作為電極之一的金屬板（如厚1～2mm）的鐵、銅、鋁板）上。如果有外電路將兩電極接通，便有（光）電流流經(jīng)外回路。用三用表就可以測量出來。另外，光電池很容易受潮而致使其產(chǎn)生的電流大小不穩(wěn)定，平時保存要防潮、防光，最好用深色紙包起來放入干燥器皿中。所以，使用硅光電池時，一定要事先弄清楚其工作波長，即光譜靈敏第范圍。這樣，原來人體中無色的抗原或抗體，與酶聯(lián)接后仍保持免疫和酶的活性。（一）抗體夾心法雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法，圖10為其示意圖。（4）加底物顯色。（2）加稀釋的受檢血清，使血清中的特異性抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。具體操作步驟為：圖12 競爭法測抗原示意圖（1）將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。（3）加底物顯色。該單色光束經(jīng)過塑料微孔板中的待測標(biāo)本，被標(biāo)本吸收掉一部分后，到達(dá)光電檢測器。根據(jù)儀器的不同，既可以一個孔一個孔地檢測，也可以一排孔一排孔地檢測。其中，自動型的儀器設(shè)有X和Y兩個方向的驅(qū)動機(jī)構(gòu)，在機(jī)械裝置的驅(qū)動下，微孔板上的小孔一個個依次進(jìn)入光束下面測試。歡迎您的光臨，！希望您提出您寶貴的意見，你的意見是我進(jìn)步的動力。