酶標(biāo)儀的工作原理與基本結(jié)構(gòu)(存儲版)
【正文】 如碘鎢燈內(nèi)加入純碘，溴鎢燈中加入溴化氫）而制成的，有時也稱作鎢鹵素?zé)艉望u素?zé)簟｛u鎢燈的壽命通?？蛇_(dá)2000h以上，它的另一優(yōu)點是體積比同功率的鎢絲燈要小得多。二、濾光片濾光片又叫濾色片，其作用是控制波長或能量的分布，即它只讓一定波長范圍內(nèi)的光通過，而將其余不需要的波長的光濾去，相當(dāng)于電路中的帶通濾波器。半寬度越小，表示透過的單色光越純。（二）截止和復(fù)合濾光片截止濾光片的特性是其透光部分的透射比接近100，而其他部分的透射比則迅速下降為0，透光部分不存在兩端截止的通頻帶，因此，它沒有半寬度的概念，其透光特性如圖7所示。目前，國內(nèi)生產(chǎn)的光電比色計一般只附有常用的42號、50號和65號3塊波光片。此外，雖然一般不認(rèn)為透明玻璃是濾光片，但是普通玻璃確實不能透過波長小于300nm而大于2600nm的光波。另外還有一種濾光片叫中性濾光片，可以用它作吸光度的標(biāo)準(zhǔn)。氣體比色皿需加有蓋子。比色皿的內(nèi)壁和透光外壁都應(yīng)注意清潔，不能用硬質(zhì)纖維或用手去摸。若有液體溢出，一定要把其外表的水分擦干。然后，再在硒上濺鍍一層半透明的金屬薄膜（如銀或氧化鎘等），作為另一極。所產(chǎn)生的光電流與入射光強成正比。方法是先將表置于100μA或50μA檔，有正表棒接硒光電池的正極——背面鋁片，負(fù)表棒接負(fù)極——正面集電環(huán)。光電池的優(yōu)點是結(jié)實、便宜、使用方便，不需外接電源就可以直接送到微安表或檢流計上去顯示。除了光譜靈敏范圍之外，光電檢測元件的另一個重要指標(biāo)是積分靈敏度，簡稱靈敏度。當(dāng)加入底物后，能使底物顯色。具體操作步驟如下：圖10 雙抗體夾心法測抗原示意圖（1）將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。夾心式復(fù)合物中的酶催化底物變?yōu)橛猩a(chǎn)物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體。然后洗滌。參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原量最多，故顏色最深。光電檢測器將投射到其上面的光信號的強弱變成電信號的大小。酶標(biāo)儀既可以使用和分光光度計相同的單色器，也可以使用干涉濾光片來獲得單色光。手動型靠手移動微孔板來進(jìn)行測量。贈語； 如果我們做與不做都會有人笑，如果做不好與做得好還會有人笑，那么我們索性就做得更好，來給人笑吧！ 現(xiàn)在你不玩命的學(xué)，以后命玩你。壓力不是有人比你努力，而是那些比你牛幾倍的人依然比你努力。酶標(biāo)儀的其他部分的結(jié)構(gòu)，與光電比色計和小型生化分析儀基本相同。酶標(biāo)儀有單通道和多通道兩種類型，單通道又分為自動型和手動型兩種。每個小孔可以盛放零點幾毫升的溶液。圖13 酶標(biāo)檢測儀工作原理圖光源燈發(fā)出的光線經(jīng)過濾光片或單色器后，成為一束單色光束。然后洗滌。以測定抗原為例，受檢抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合，因此，結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量成正比，其示意圖如圖12所示。然后洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。此時，固相載體上帶有的酶量就代表標(biāo)本中受檢抗原的量?，F(xiàn)介紹3種最常用的方法。顏色的深淺與相應(yīng)的抗原或抗體的量成正比。如有的工作在300～1100nm，有的工作在500～1000nm，還有的工作在380～780nm。如果光電池已經(jīng)疲勞，最簡單的恢復(fù)辦法是把它置于暗處一段時間，使其慢慢恢復(fù)靈敏度。圖11 硒光電池和人眼對不同波長光的感應(yīng)曲線在普通室內(nèi)照明的條件下，硒光電池產(chǎn)生的光電流有幾十至幾百微安。這種現(xiàn)象由于是在物體內(nèi)部產(chǎn)生的，有時也把它叫做“內(nèi)光電效應(yīng)”。如硒光電池、硅光電池等，其中硒光電池應(yīng)用較廣，它的結(jié)果如圖10所示。使用時，溶液不要放得太滿，以防液體溢出。在其他條件不變的情況下，％。此外，還有流動比色皿、微量比色皿、可拆卸比色皿等，如圖9所示。干涉濾光片雖然性能優(yōu)越，但其價格昂貴。溫度變化還從其他途徑影響比色分析。陡度定義為：陡度＝半高波長/(λ1λ3)。帶通濾光片的透光特性如圖6所示。即：半寬度＝λ2λ1。在直流供電時，通常采用電子穩(wěn)壓電路供電。這一過程一般稱為鹵鎢循環(huán)或鎢的再生循環(huán)。嚴(yán)重的會使燈壁發(fā)黑，無法使用。實際上，這種理想的光源并不存在，所有光源的光強都隨波長而變。 第二節(jié) 光電比色計的基本結(jié)構(gòu)利用光電池或光電管等光電元件作檢測器，來測量通過有色溶液的透射比或吸光度，進(jìn)而求出物質(zhì)含量的方法叫光電比色法。這一關(guān)系式是設(shè)計光電比色計和分光光度計的基礎(chǔ)，也是比色分析的基本計算公式之一。LS在待測溶液中： Ax＝KxK值越大，說明比色分析時的靈敏度越高。C這樣，上式可簡化為：Io＝Ia +It當(dāng)入射光的強度一定時，被吸收的光的強度越大，透過光的強度就越小。至于不被有色溶液吸收的光線，則應(yīng)設(shè)定在未透過有色溶液之前或之后將其消除掉。對于任何一種有色溶液，都可以測繪出它的吸收曲線。如一束白光通過高錳酸鉀溶液時，綠光大部分被選擇吸收，其他的光透過溶液。如綠光和紫光為互補色，黃光和藍(lán)光為互補色等等。同樣，光被吸收時，其能量一份一份地被吸收的?？梢杂妹枋鲭姶挪ǖ男g(shù)語，如振動頻率（υ）、波長（λ）、速度（c ）、周期（T ）來描述它。如納氏管比色法，它是按濃度由高到低，配好一系列標(biāo)準(zhǔn)濃度管，然后拿待測樣品和標(biāo)準(zhǔn)管逐個比較，看和哪一個標(biāo)準(zhǔn)管的顏色最相近，便讀取該標(biāo)準(zhǔn)管的濃度值為待測樣品的濃度值，這就是（目視）比色法。因此，可以通過比較溶液顏色深淺的方法來確定有色溶液的濃度，對溶液中所含的物質(zhì)進(jìn)行定量分析。首先，光是一種電磁波。式中υ是光的頻率，h為普朗克常量。圖1中處于直線關(guān)系的兩種光為互補色。實踐證明，溶液所呈現(xiàn)的顏色是它的主要吸收光的互補色。從圖2中可以看出，在可見光范圍內(nèi)，高錳
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