氨基酸紙層析ppt課件-閱讀頁
2025-05-16 04:16本頁面
【正文】 （ 3） pH值： 溶劑、濾紙和樣品的 pH值都會影響物質(zhì)的解離，從而影響物質(zhì)的 極性和溶解度 ，使 Rf改變； 2022/5/29 13 （ 4）濾紙： 層析濾紙由高純度棉花制成， 要求濾紙要清潔 ，質(zhì)地均一，厚薄一致，纖維松緊度適中，具有一定的機械強度，要被溶劑所飽和。 層 析必須在恒溫條件下進行。 （ 7）樣品溶液中雜質(zhì)： 如氯化鈉的存在會影響氨基酸的 Rf值。 試劑： (1)氨基酸標準溶液：亮氨酸 、 脯氨酸 、 谷氨酸 、 組氨酸標準品 。 三、實驗材料、儀器和試劑： 2022/5/29 17 樣品的準備： 稱取谷氨酸、組氨酸、脯氨酸、亮氨酸標準品各1mg混合溶于 10%異丙醇中， 。 四、實驗步驟： 2022/5/29 18 2022/5/29 19 點樣： 用毛細管點樣 ， 中間點混合氨基酸 ， 兩側(cè)點四種標準氨基酸；每個 ， 每點一次用晾干后再點下次 ， 點樣點的直徑應控制在 2mm左點樣點重復點 5次 右 ， 點樣完畢用大頭針將濾紙做成 筒形 ， 點樣面向外 。 顯色 ： 用噴霧器將 ％ 茚三酮顯色劑 均勻噴在濾紙上 ，熱風 （ 加快反應 ） 反應吹干顯色 。 分析混合樣品中未知氨基酸的組分 。 當萃取劑濃度、組成、水相成分以及溫度等改變時，分離系數(shù)就要發(fā)生變化。被分離物質(zhì)在兩相中都能溶解，但分配比率不同，展層時就會形成以不同速度向前移動的區(qū)帶。 2022/5/29 27 七、 思考題答案 2022/5/29 28 ? 3 、 α氨基酸與茚三酮在弱酸性溶液中共熱，反應后經(jīng)失水脫羧生成氨基茚三酮，再與水合茚三酮反應生成紫紅色，最終為藍色物質(zhì)。
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