【正文】 D 很多倍。根據(jù)臨床藥理學、毒理學和臨床應用的觀察統(tǒng)計，極少或基本未見藥物個體差異達到1000 倍的報道，也就是說，對于非常敏感的病人，如果服用了MTDD 的l／1000，也不會由此產(chǎn)生藥理反應。因此高生物活性藥物宜 使用本法來確定殘留物限度。B 產(chǎn)品每天服用數(shù)多，安全性下降，因此，上述最低日治療劑量的l／1000，系指B 產(chǎn)品最多日使用制劑數(shù)中允許A產(chǎn)品殘存的量，不超過因服用B 產(chǎn)品而帶人體內(nèi)的A 產(chǎn)品的最低日治療劑量的l／1000。根據(jù)MTDD 計算單位面積殘留物限度的過程如下。(2) 計算設備內(nèi)表面積SA(cm2)。(4) 取最小批量B 為計算參數(shù)。(6) 計算該批產(chǎn)品理論成品數(shù)U U＝1000B／Uw 。(8) 計算特殊表面殘留物限度表面殘留物限度計算表見表3—45。也有文獻建議采用最低生物活性量為出發(fā)點計算殘留物限度，其原理與實際計算過程與上述MTDD 法基本相同。(三) 肉眼觀察限度——不得有可見的殘留物有文獻稱如果設備內(nèi)表面拋光良好，殘留物與設備表面有較大反差，目檢能發(fā)現(xiàn)低至1μｇ／cm2 的殘留物。因此清潔規(guī)程中都要求在清潔完成或某些步驟完成后檢查不得有可見的殘留物。從微觀上看清潔后的殘留物在設備表面形成一層薄膜，因此有非常大的比表面積。因為驗證的目的是證實有關物質(zhì)被“清洗掉”，而不是通過化學反應使目標物轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌镔|(zhì)而“消失了”o 另外，有些藥物的活性成分經(jīng)轉(zhuǎn)化后成為藥品中的雜質(zhì)，如該雜質(zhì)對人體有更大的毒性則須限制其在成品中的含量。如阿司匹林片，其活性成分乙酰水楊酸很容易水解為游離水楊酸，中國藥典規(guī)定后者相對于乙酰水楊酸的含量應低于0．3％。為簡化計算，假設生產(chǎn)設備為阿司匹林片專用，產(chǎn)品規(guī)格分別為0．1g／片、0．3g／ 0．5g／片。應當指出，游離水楊酸一方面來自殘留的乙酰水楊酸的水解，另一方面來自原料本身以及生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的水楊酸。具體計算過程如下：成品中游離水楊酸的限度 ％ 最小批量片數(shù) 1000000 片最小片質(zhì)量 多批產(chǎn)品平均游離水楊酸含量 ％最小批量 l00kg 總表面積 50000cm2允許由殘留乙酰水楊酸水解而產(chǎn)生的游離水楊酸的量為：(％－％)1 000 0001000=100 000(μｇ)假設所有殘留下的乙酰水楊酸全部水解為游離水楊酸，則允許由上批產(chǎn)品殘留的乙酰水楊酸總量為100000μｇ，乙酰水楊酸的表面殘留限度為100 000／50 000＝2(μｇ／cm2)該限度大大低于根據(jù)MTDD 計算得到的限度。四、殘留溶劑的限度標準藥品生產(chǎn)和清潔中可能用到除水外的有機溶劑。一級溶劑——由于毒性或危害環(huán)境等原因應避免在制藥生產(chǎn)中使用的溶劑。二級溶劑——為動物非誘變致癌溶劑、或可能有神經(jīng)毒性或致畸性等不可逆轉(zhuǎn)性毒性并 懷疑有 其他明顯但可逆轉(zhuǎn)毒性的溶劑。三 級 溶 劑——具有潛在低毒性的溶劑。ICH“殘留溶劑指南”規(guī)定，一級溶劑、二級溶劑僅在不可替代的情況下用于藥品生產(chǎn)，但不能用作清潔劑。五、微生物污染控制標準微生物污染水平的制定應滿足生產(chǎn)和質(zhì)量控制的要求。如果設備清潔后立即投入下批生產(chǎn)，則設備中的微生物污染水平必須足夠低，以免產(chǎn)品配制完成后微生物項目超標。而且空氣中存在的微生物能通過各種途徑污染已清潔的設備。因此企業(yè)應綜合考慮其生產(chǎn)實際情況和需求，自行制定微生物污染水平應控制的限度及清洗后到下次生產(chǎn)的最長貯存期限。因此其適用于擦拭取樣不易接觸到的表面，尤其適用于設備表面平坦、管道多且長的液體制劑的生產(chǎn)設備。取樣的方法為根據(jù)淋洗水流經(jīng)設備的線路，選擇淋洗線路相對最下游的一個或幾個排水口為取樣口。也可在淋洗完成后在設備中加入一定量的工藝用水，用量必須小于最小生產(chǎn)批量，使其在系統(tǒng)內(nèi)循環(huán)后在相應位置取樣。對淋洗水樣一般檢查殘留物濃度和微生物污染水平。(二) 擦拭取樣擦拭取樣優(yōu)點是能對最難清潔部位直接取樣，通過考察有代表性的最難清潔部位的殘留物水平評價整套生產(chǎn)設備的清潔狀況。檢驗的結(jié)果能直接反映出各取樣點的清潔狀況，為優(yōu)化清潔規(guī)程提供依據(jù)。(三) 擦拭工具和溶劑進行擦拭取樣時應注意擦拭工具和溶劑對檢驗的干擾。藥簽應耐一般有機溶劑的溶解。溶劑用于擦拭時溶解殘留物并將吸附在擦拭工具上的殘留物萃取出來以便檢測。一般為水、有機溶劑或兩者的混合物，也可含有表面活性劑等以幫助殘留物質(zhì)溶解。藥簽的選擇原則：① 能被擦拭溶劑良好地潤濕；② 有一定的機械強度和韌性，足以對設備表面施加一定的壓力和摩擦力，并不易脫落纖維；③ 能同擦拭和萃取溶劑相兼容，不對檢測產(chǎn)生干擾。每個擦拭部位擦拭的面積應以獲取的殘留物的量在檢測方法的線性范圍內(nèi)為原則。② 用適宜的溶劑潤濕藥簽，并將其靠在溶劑瓶上擠壓以除去多余的溶劑。在向前移動的同時將其從一邊移到另一邊。翻轉(zhuǎn)藥簽，讓藥簽的另一面也進行擦拭。⑤ 按照下述方法制備對照樣品：按步驟2 濕潤藥簽，將藥簽直接放人試管并旋緊密封。⑥ 取樣完成后應在試管上注明有關取樣信息。應使用無菌的擦拭棒，按取表面微生物樣的要求取樣。檢驗方法對被檢測物質(zhì)應有足夠的專屬性和靈敏度。對用于清潔驗證的檢驗方法的定量要求不必像成品質(zhì)量檢驗那樣嚴格。代表精密度的RSD 小于10％即可。(六) 取樣方法驗證取樣過程需經(jīng)過驗證。要求包括取樣回收率和檢驗方法回收率在內(nèi)的綜合回收率一般不低于50％，有的企業(yè)甚至要求不低于80％，多次取樣回收率的RSD 不大于20％。驗證方法如下。如平整光潔的不銹鋼板。③ ％的溶液，定量裝入噴霧器。原因⑤ 根據(jù)實際噴出的溶液量計算單位面積的物質(zhì)量(約1μｇ／cm2)。⑦ 用選定的擦拭溶劑潤濕擦拭工具，按前述擦拭取樣操作規(guī)程擦拭鋼板，每擦一個方塊(100cm2)換一根擦拭棒，共擦6～10 個方塊。⑨ 用經(jīng)驗證的檢驗方法檢驗，計算回收率和回收率的RSD。應盡可能采用固定的力度、擦拭速度和線路。七、驗證方案清潔驗證方案可有多種形式，其共性是必須體現(xiàn)方案韻科學性。(1) 目的 明確待驗證的設備和清潔方法。(3) 驗證人員 列出參加驗證人員的名單，說明參加者所屬的部門和各自的職責，對相關操作人員的培訓要求(4) 確定參照物和限度標準 在本部分應詳細闡述確定參照物的依據(jù)，確定限度標準的計算過程和結(jié)果。(5) 檢驗方法學 本部分應說明取樣方法、工具、溶劑，主要檢驗儀器，取樣方法和檢驗方法的驗證情況等。這部分的內(nèi)容對方案的實施和保證驗證結(jié)果的客觀性是至關重要的。一般起碼連續(xù)進行3 次試驗，所有數(shù)據(jù)都符合限度標準方可。驗證實施應嚴格按照批準的方案執(zhí)行。驗證實施后寫出驗證報告。執(zhí)行規(guī)程的人員應當是將來進行正式操作的那些人員，而不應由方案設計人員或其他技術(shù)人員代替。取樣應由經(jīng)過專門培訓并通過取樣驗證的人員進行，樣品標簽可在取樣前貼好，根據(jù)標簽的指示取樣，也可在取樣后立即貼上標簽，無論采取何種方式，應以方案規(guī)定為準。所用的試劑、對照品、儀器等都應符合預定要求。驗證過程中出現(xiàn)的偏差均應記錄在案，并由專門人員討論并判斷偏差的性質(zhì)，確定是否對驗證結(jié)果產(chǎn)生實質(zhì)影響。這時應進行原因調(diào)查，確定原因并采取必要措施后重新進行驗證試驗。其結(jié)果只有合格或不合格兩種，不可模棱兩可。(1) 清潔規(guī)程的執(zhí)行情況描述，附原始清潔作業(yè)記錄。(3) 偏差說明，附偏差記錄與調(diào)查。第五節(jié) 清潔方法的監(jiān)控與再驗證一、日常監(jiān)控清潔驗證報告一旦批準，清潔驗證即告完成，該清潔方法即可正式投入使用。在日常生產(chǎn)過程中對清潔方法進行監(jiān)控的目的是進一步考察清潔程序的可靠性。對手工清洗規(guī)程來說，這點尤其重要，因為其重現(xiàn)性很大程度上更取決于對人員的培訓和實施清潔人的工作態(tài)度。由于對指定殘留物的定量分析通常比較繁瑣，可開發(fā)某些有足夠靈敏度且快速的非專屬性檢驗方法，如測定總有機碳(TOC)。由于該方法的高靈敏性和自動化，且絕大多數(shù)殘留物是有機物，發(fā)達國家或技術(shù)水平較高的制藥企業(yè)越來越多地將其作為清潔作業(yè)的日常監(jiān)控方法。一旦出現(xiàn)異常，則提示可能出現(xiàn)了問題，此時再采用專門的分析方法對污染物定性定量。二、變吏管理對已驗證設備、清潔規(guī)程的任何變更以及諸如改變產(chǎn)品處方、增加新產(chǎn)品等可能導致清潔規(guī)程或設備變更的變更。企業(yè)應有變更管理SOP 統(tǒng)一規(guī)范所有變更行為。① 清潔劑改變或清潔程序作重要修改。③ 設備有重大變更。第六節(jié) 清潔方法的優(yōu)化在實際生產(chǎn)中，一臺(組)設備用于多種產(chǎn)品的生產(chǎn)是非常普遍的現(xiàn)象。這就給清潔規(guī)程的制定者提出這樣的問題：是否要為每個產(chǎn)品分別制定清潔規(guī)程呢?經(jīng)驗告訴我們，為一臺(組)設備制定多個清潔規(guī)程并不可取：這不但由于為每個規(guī)程進行驗證的工作量過于龐大，更主要的是對操作者來說要在多個規(guī)程中選擇適當?shù)那鍧嵎椒ê苋菀自斐刹铄e。驗證就以該程序為對象，只要證明其能達到預定的要求，則該程序能適用于所有產(chǎn)品的清潔。這時，在規(guī)程中必須非常明確地規(guī)定該方法適用于哪些產(chǎn)品，還須明確為防止選擇時發(fā)生錯誤需要采取的必要的措施。① 將所有產(chǎn)品列表(見表3—49)。③ 對每個產(chǎn)品的評價項目打分。④ 根據(jù)經(jīng)驗和產(chǎn)品性質(zhì)，擬定適當?shù)那鍧崉┓N類。計算方法參見第二節(jié)的有關內(nèi)容。⑦ 如果表格中使用的清潔劑可分為水／水溶性清潔劑(包括酸、堿溶液)和有機溶劑兩類，應分別選擇一種參照代表產(chǎn)品。⑨ 將 與參照產(chǎn)品對應的清潔劑確定為清潔方法使用的清潔劑。產(chǎn)品甲、己用乙醇為清潔劑，可另算一類，應選擇產(chǎn)品甲為代表產(chǎn)品，清潔劑為95％乙醇，允許殘留限度定為2．5μg/cm－2。在生產(chǎn)后依法清洗并驗證。每批生產(chǎn)后按清潔規(guī)程清潔，按驗證方案檢查清潔效果、取樣并化驗。3 次試驗的結(jié)果均應符合預定標準。如果有證據(jù)表明結(jié)果超標是因為取樣、化驗失誤等原因 造成，可將此數(shù)據(jù)從統(tǒng)計中刪除。不得采用重新取樣再化驗直至合格(Testing until clean)的做法。 －2第七節(jié) 驗證方案實例——大容量注射劑在線清洗驗證方案一、目的驗證本公司大容量注射劑配制和灌封生產(chǎn)線按清潔規(guī)程進行在線清洗后的清潔效果能達穩(wěn)定到預定要求。清潔劑為注射用水。四、參照產(chǎn)品與限度產(chǎn) 品與規(guī)格(表3－50)。(二) 限度標準1．最終淋洗水取樣最終淋洗水中總氨基酸濃度不大于1010，淋洗液澄明度與不溶性微粒符合中國藥典注射劑通則要求，微生物計數(shù)不大于10CFU／100ml。(2) 計算過程 實測設備總面積SA 為100 000cm2，特殊部位(灌封頭)面積SSA 為 100cm2，最小批量B 為1000L。F)(mg／cm2)＝101000／(100 00010)mg／cm2＝0．01mg／cm2＝10μg／cm2因該設備生產(chǎn)的產(chǎn)品均為臨床營養(yǎng)輸液，日用量都在幾十克或更多，故按此計算的特殊部位殘留物限度遠大于10μg／cm2，可統(tǒng)一采用10μg／cm2 的限度。五、取樣工具普通取樣瓶 500ml、無菌取樣瓶500ml、普通藥簽(15cm)、無菌藥簽(15cm)、帶螺旋蓋試管(15cm)、帶螺旋蓋無菌試管(1Scm)。七、檢驗儀器HP 公司HPLC 儀，檢測器為熒光檢測器。擦拭取樣方法和檢驗方法已驗證，見驗證報告R。十、取樣計劃在生產(chǎn) 12％氨基酸注射液后按清潔規(guī)程實施清潔。取微生物樣品時注意避免取樣造成的污染。樣品應及時貼上標簽，表明取樣日期、取樣位置號、產(chǎn)品名稱與批號及取樣目的。(略)驗證試驗應連續(xù)進行