【正文】 (略)驗證試驗應(yīng)連續(xù)進(jìn)行3 次。取微生物樣品時注意避免取樣造成的污染。擦拭取樣方法和檢驗方法已驗證，見驗證報告R。五、取樣工具普通取樣瓶 500ml、無菌取樣瓶500ml、普通藥簽(15cm)、無菌藥簽(15cm)、帶螺旋蓋試管(15cm)、帶螺旋蓋無菌試管(1Scm)。(2) 計算過程 實測設(shè)備總面積SA 為100 000cm2，特殊部位(灌封頭)面積SSA 為 100cm2，最小批量B 為1000L。四、參照產(chǎn)品與限度產(chǎn) 品與規(guī)格(表3－50)。 －2第七節(jié) 驗證方案實例——大容量注射劑在線清洗驗證方案一、目的驗證本公司大容量注射劑配制和灌封生產(chǎn)線按清潔規(guī)程進(jìn)行在線清洗后的清潔效果能達(dá)穩(wěn)定到預(yù)定要求。如果有證據(jù)表明結(jié)果超標(biāo)是因為取樣、化驗失誤等原因 造成，可將此數(shù)據(jù)從統(tǒng)計中刪除。每批生產(chǎn)后按清潔規(guī)程清潔，按驗證方案檢查清潔效果、取樣并化驗。產(chǎn)品甲、己用乙醇為清潔劑，可另算一類，應(yīng)選擇產(chǎn)品甲為代表產(chǎn)品，清潔劑為95％乙醇，允許殘留限度定為2．5μg/cm－2。⑦ 如果表格中使用的清潔劑可分為水／水溶性清潔劑(包括酸、堿溶液)和有機溶劑兩類，應(yīng)分別選擇一種參照代表產(chǎn)品。④ 根據(jù)經(jīng)驗和產(chǎn)品性質(zhì)，擬定適當(dāng)?shù)那鍧崉┓N類。① 將所有產(chǎn)品列表(見表3—49)。驗證就以該程序為對象，只要證明其能達(dá)到預(yù)定的要求，則該程序能適用于所有產(chǎn)品的清潔。第六節(jié) 清潔方法的優(yōu)化在實際生產(chǎn)中，一臺(組)設(shè)備用于多種產(chǎn)品的生產(chǎn)是非常普遍的現(xiàn)象。① 清潔劑改變或清潔程序作重要修改。二、變吏管理對已驗證設(shè)備、清潔規(guī)程的任何變更以及諸如改變產(chǎn)品處方、增加新產(chǎn)品等可能導(dǎo)致清潔規(guī)程或設(shè)備變更的變更。由于該方法的高靈敏性和自動化，且絕大多數(shù)殘留物是有機物，發(fā)達(dá)國家或技術(shù)水平較高的制藥企業(yè)越來越多地將其作為清潔作業(yè)的日常監(jiān)控方法。對手工清洗規(guī)程來說，這點尤其重要，因為其重現(xiàn)性很大程度上更取決于對人員的培訓(xùn)和實施清潔人的工作態(tài)度。第五節(jié) 清潔方法的監(jiān)控與再驗證一、日常監(jiān)控清潔驗證報告一旦批準(zhǔn)，清潔驗證即告完成，該清潔方法即可正式投入使用。(1) 清潔規(guī)程的執(zhí)行情況描述，附原始清潔作業(yè)記錄。這時應(yīng)進(jìn)行原因調(diào)查，確定原因并采取必要措施后重新進(jìn)行驗證試驗。所用的試劑、對照品、儀器等都應(yīng)符合預(yù)定要求。執(zhí)行規(guī)程的人員應(yīng)當(dāng)是將來進(jìn)行正式操作的那些人員，而不應(yīng)由方案設(shè)計人員或其他技術(shù)人員代替。驗證實施應(yīng)嚴(yán)格按照批準(zhǔn)的方案執(zhí)行。這部分的內(nèi)容對方案的實施和保證驗證結(jié)果的客觀性是至關(guān)重要的。(3) 驗證人員 列出參加驗證人員的名單，說明參加者所屬的部門和各自的職責(zé)，對相關(guān)操作人員的培訓(xùn)要求(4) 確定參照物和限度標(biāo)準(zhǔn) 在本部分應(yīng)詳細(xì)闡述確定參照物的依據(jù)，確定限度標(biāo)準(zhǔn)的計算過程和結(jié)果。七、驗證方案清潔驗證方案可有多種形式，其共性是必須體現(xiàn)方案韻科學(xué)性。⑨ 用經(jīng)驗證的檢驗方法檢驗，計算回收率和回收率的RSD。原因⑤ 根據(jù)實際噴出的溶液量計算單位面積的物質(zhì)量(約1μｇ／cm2)。如平整光潔的不銹鋼板。要求包括取樣回收率和檢驗方法回收率在內(nèi)的綜合回收率一般不低于50％，有的企業(yè)甚至要求不低于80％，多次取樣回收率的RSD 不大于20％。代表精密度的RSD 小于10％即可。檢驗方法對被檢測物質(zhì)應(yīng)有足夠的專屬性和靈敏度。⑥ 取樣完成后應(yīng)在試管上注明有關(guān)取樣信息。翻轉(zhuǎn)藥簽，讓藥簽的另一面也進(jìn)行擦拭。② 用適宜的溶劑潤濕藥簽，并將其靠在溶劑瓶上擠壓以除去多余的溶劑。藥簽的選擇原則：① 能被擦拭溶劑良好地潤濕；② 有一定的機械強度和韌性，足以對設(shè)備表面施加一定的壓力和摩擦力，并不易脫落纖維；③ 能同擦拭和萃取溶劑相兼容，不對檢測產(chǎn)生干擾。溶劑用于擦拭時溶解殘留物并將吸附在擦拭工具上的殘留物萃取出來以便檢測。(三) 擦拭工具和溶劑進(jìn)行擦拭取樣時應(yīng)注意擦拭工具和溶劑對檢驗的干擾。(二) 擦拭取樣擦拭取樣優(yōu)點是能對最難清潔部位直接取樣，通過考察有代表性的最難清潔部位的殘留物水平評價整套生產(chǎn)設(shè)備的清潔狀況。也可在淋洗完成后在設(shè)備中加入一定量的工藝用水，用量必須小于最小生產(chǎn)批量，使其在系統(tǒng)內(nèi)循環(huán)后在相應(yīng)位置取樣。因此其適用于擦拭取樣不易接觸到的表面，尤其適用于設(shè)備表面平坦、管道多且長的液體制劑的生產(chǎn)設(shè)備。而且空氣中存在的微生物能通過各種途徑污染已清潔的設(shè)備。五、微生物污染控制標(biāo)準(zhǔn)微生物污染水平的制定應(yīng)滿足生產(chǎn)和質(zhì)量控制的要求。三 級 溶 劑——具有潛在低毒性的溶劑。一級溶劑——由于毒性或危害環(huán)境等原因應(yīng)避免在制藥生產(chǎn)中使用的溶劑。具體計算過程如下：成品中游離水楊酸的限度 ％ 最小批量片數(shù) 1000000 片最小片質(zhì)量 多批產(chǎn)品平均游離水楊酸含量 ％最小批量 l00kg 總表面積 50000cm2允許由殘留乙酰水楊酸水解而產(chǎn)生的游離水楊酸的量為：(％－％)1 000 0001000=100 000(μｇ)假設(shè)所有殘留下的乙酰水楊酸全部水解為游離水楊酸，則允許由上批產(chǎn)品殘留的乙酰水楊酸總量為100000μｇ，乙酰水楊酸的表面殘留限度為100 000／50 000＝2(μｇ／cm2)該限度大大低于根據(jù)MTDD 計算得到的限度。為簡化計算，假設(shè)生產(chǎn)設(shè)備為阿司匹林片專用，產(chǎn)品規(guī)格分別為0．1g／片、0．3g／ 0．5g／片。因為驗證的目的是證實有關(guān)物質(zhì)被“清洗掉”，而不是通過化學(xué)反應(yīng)使目標(biāo)物轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌镔|(zhì)而“消失了”o 另外，有些藥物的活性成分經(jīng)轉(zhuǎn)化后成為藥品中的雜質(zhì)，如該雜質(zhì)對人體有更大的毒性則須限制其在成品中的含量。因此清潔規(guī)程中都要求在清潔完成或某些步驟完成后檢查不得有可見的殘留物。也有文獻(xiàn)建議采用最低生物活性量為出發(fā)點計算殘留物限度，其原理與實際計算過程與上述MTDD 法基本相同。(6) 計算該批產(chǎn)品理論成品數(shù)U U＝1000B／Uw 。(2) 計算設(shè)備內(nèi)表面積SA(cm2)。B 產(chǎn)品每天服用數(shù)多，安全性下降，因此，上述最低日治療劑量的l／1000，系指B 產(chǎn)品最多日使用制劑數(shù)中允許A產(chǎn)品殘存的量，不超過因服用B 產(chǎn)品而帶人體內(nèi)的A 產(chǎn)品的最低日治療劑量的l／1000。根據(jù)臨床藥理學(xué)、毒理學(xué)和臨床應(yīng)用的觀察統(tǒng)計，極少或基本未見藥物個體差異達(dá)到1000 倍的報道，也就是說，對于非常敏感的病人，如果服用了MTDD 的l／1000，也不會由此產(chǎn)生藥理反應(yīng)。其依據(jù)是任何藥物上市前都必須通過臨床試驗取得使用劑量的數(shù)據(jù)，上市后也必須不斷跟蹤其使用效果和臨床副作用，從而確定對大多數(shù)人適用的發(fā)揮預(yù)期治療作用的劑量范圍。在這種情況下，上述限度就不適用了，必須為這些特殊部位制定特殊的限度。F) (mg／cm2)；如取安全因子F＝10，則L＝B／SA(mg／cm2)＝103B／SA(μg／cm2)。實驗室通常配備的儀器如HPLC，紫外—可見分光光度計、薄層色譜等的靈敏度一般都能達(dá)到1010－6 －6以上，因此該限度標(biāo)準(zhǔn)不難被檢驗。其要求是規(guī)定由上一批產(chǎn)品殘留在設(shè)備中的物質(zhì)全部溶解到下一批產(chǎn)品中所致的濃度不得高于1010。企業(yè)應(yīng)當(dāng)根據(jù)其生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)品的實際情況，制定科學(xué)合理的，能實現(xiàn)并能通過適當(dāng)?shù)姆椒z驗的限度標(biāo)準(zhǔn)。三、殘留物限度的確定如何確定殘留物限度是個相當(dāng)復(fù)雜的問題，但卻是驗證方案無法回避，必須解決的問題。有時這種污染很輕微，但如果清潔程序未能考慮這些管路，日積月累就可能產(chǎn)生嚴(yán)重的后果。因V＝wS＝wπR2＝π/4wd2，其中 為管道截面積，則 ＝4/πV/ d2；則Re∝V/ d，如V 為定值，則R e∝ l/ d由此可知，在系統(tǒng)中，管徑較大的部位或管徑由小變大的部位R e值較小，相對容易發(fā)生層流，較難被清潔。Re 越大，表面湍流越劇烈，即質(zhì)點運動方向和速率的變化越大，殘留物溶解的速度越快。因此，在清洗過程中，必須保證清潔液以湍流形式流動。因此在清潔中應(yīng)避免層流的產(chǎn)生。相對垂直的運動可將已溶解的物質(zhì)迅速帶離溶質(zhì)表面，而水平方向的相對運動根據(jù)流體力學(xué)的基本原理，可分為層流和湍流兩類情況(圖3－2)。因此可以觀察到即使是溶解度很大的物質(zhì)，如蔗糖的塊狀結(jié)晶(俗稱冰糖)在無攪拌的靜止?fàn)顟B(tài)下的溶解速度是非常緩慢的。微觀上看溶解的速度取決于單位時間內(nèi)由溶質(zhì)表面進(jìn)入溶液的溶質(zhì)分子數(shù)與從溶液中回到溶質(zhì)表面的分子之差。除手工擦洗主要依靠機械摩擦力將附著在設(shè)備表面的殘留物除去外，常規(guī)的清洗過程可從清洗液對殘留物的作用角度大致分為溶解、乳化和化學(xué)反應(yīng)等不同的機制。以復(fù)方18 氨基酸注射液為例，它有18 種氨基酸，均為活性成分。在一定的意義上，清潔的過程是個溶解的過程，因此，通常的做法是從各組分中確定最難清潔(溶解)的物質(zhì)，以此作為參照物質(zhì)。一、參照物質(zhì)與最難清潔物質(zhì)一般藥品都由活性成分和輔料組成。根據(jù)殘留物和設(shè)備的性質(zhì)，企業(yè)還可自行配制成分簡單效果確切的清潔劑，如一定濃度的酸、堿溶液等。根據(jù)這些標(biāo)準(zhǔn)，對于水溶性殘留物，水是首選的清潔劑。三、清潔劑的選擇清潔劑應(yīng)能有效溶解殘留物，不腐蝕設(shè)備，且本身易被清除。如發(fā)現(xiàn)殘余物，向工段長匯報以采取糾偏措施。但對于經(jīng)過驗證的清潔程序，如果設(shè)備淋洗后要進(jìn)行滅菌處理，或是采用高溫、無菌的注射用水淋洗后并保持密閉的設(shè)備則不一定要進(jìn)行干燥處理。當(dāng)然，較高的溫度有助于殘留水的揮發(fā)，并兼有一定的消毒作用。當(dāng)然淋洗最初階段，可以使用質(zhì)量較低的水如飲用水。本步驟用水對其進(jìn)行充分的淋洗使殘留物的濃度降至預(yù)定限度以下，以不造成新的潛在的污染。在這種情形下兩步清洗之間可加入淋洗操作。為獲得穩(wěn)定的結(jié)果，減小偏差的發(fā)生，必須明確規(guī)定清潔劑的名稱、規(guī)格和使用的濃度以及配制該清潔溶液的方法。3．清洗此步的目的用清潔劑以一定的程序(如固定的方法、清洗時間等)除去設(shè)備上看不到的產(chǎn)品。比較簡單而切合實際的方法是讓操作者檢查是否還有可見的殘留物，讓他們持續(xù)噴淋設(shè)備直至可見殘留物消失，以此作為預(yù)洗的終點。使用水管或手持高壓噴槍以新鮮的流水沖洗設(shè)備以除去殘留物。2．預(yù)洗/檢查預(yù)洗的目的是除去大量的(可見的)殘余產(chǎn)品或原料，為此后的清潔創(chuàng)造一個基本一致的起始條件。⑨ 已清潔設(shè)備用于下次生產(chǎn)前的最長存放時間。⑤ 清潔溶液接觸設(shè)備表面的時間、溫度、流速等關(guān)鍵參數(shù)。 ① 清潔開始前對設(shè)備必要的拆卸要求和清潔完成后的裝配要求。大容量注射劑的灌裝機、小容量注射劑的灌裝機、膠囊填充機及制粒機、壓片機等一般都可采用采用人工清洗方式。這兩種主要的清潔方式在實際生產(chǎn)中應(yīng)用很廣，清潔方式的選擇應(yīng)當(dāng)全面考慮設(shè)備的材料、結(jié)構(gòu)、產(chǎn)品的性質(zhì)、設(shè)備的用途及清潔方法能達(dá)到的效果等各個方面。常用的清潔工具一般有能噴灑清潔劑和淋洗水的噴槍，刷子、尼龍清潔塊等。如驗證的結(jié)果表明清潔程序無法確保設(shè)備清潔達(dá)到預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，則需查找原因、修改程序并重新驗證，直至結(jié)果合格。1．開發(fā)階段根據(jù)產(chǎn)品性質(zhì)、設(shè)備特點、生產(chǎn)工藝等因素擬定清潔方法并制定清潔規(guī)程，對清潔人員進(jìn)行操作培訓(xùn)。清潔驗證就是通過科學(xué)的方法采集足夠的數(shù)據(jù)，以證明按規(guī)定方法清潔后的設(shè)備，能始終如一地達(dá)到預(yù)定的清潔標(biāo)準(zhǔn)。對于確定的設(shè)備和產(chǎn)品，清潔效果取決于清洗的方法。在制藥工業(yè)中，清潔的概念就是指設(shè)備中各種殘留物（包括微生物及其代謝產(chǎn)物）的總量低至不影響下批產(chǎn)品的規(guī)定的療效、質(zhì)量和安全性的狀態(tài)。微生物在適當(dāng)?shù)臏貪穸认乱詺埩粑镏械挠袡C物為營養(yǎng)可大量繁殖，產(chǎn)生各種代謝物，從而大大增加殘留物的復(fù)雜性和危害程度。若提交的驗證報告符合規(guī)定的要求，則應(yīng)簽署驗證合格報告以正式批準(zhǔn)該清潔