熒光和化學(xué)發(fā)光分析法-閱讀頁
2025-01-22 07:42本頁面
【正文】 （ 1）螯合物中配位體的發(fā)光 07:41:27 金屬離子螯合物的熒光 （ 1）螯合物中配位體的發(fā)光 不少有機(jī)化合物雖然具有共軛雙鍵，但由于不是剛性結(jié)構(gòu)，分子處于非同一平面，因而不發(fā)生熒光。 如 8羥基喹啉本身有很弱的熒光，但其金屬螯合物具有很強(qiáng)的熒光。 （ 2）螯合物中金屬離子的發(fā)光 07:41:27 溶劑 溶液黏度和 溫度 溶液的 PH值 實驗條件對熒光強(qiáng)度的影響 激發(fā)光源 07:41:27 實驗條件對熒光強(qiáng)度的影響 激發(fā)光源 激發(fā)光強(qiáng)度 I0大，熒光強(qiáng)度增大，靈敏度增高。 ?*→ ?躍遷類型： 溶劑極性增大 ， 躍遷能量降低， 發(fā)生紅移 ， 熒光增強(qiáng) 。 07:41:27 溶液黏度和 溫度 黏度大，溫度低，可減小碰撞引起的熒光熄滅，熒光強(qiáng)度增大。 溶液的 PH值 不同 PH值下，熒光分子存在形式不同。 特殊點(diǎn)： 兩個單色器 ， 光源與檢測器通常成 直角 。 樣品池 I0 It If 樣品池四面透光。 檢測器的方向與激發(fā)光的方向成直角，以消除樣品池中 透射光和雜散光的干擾 。 發(fā)射單色器： 選擇熒光發(fā)射波長， 用以濾去雜散光、瑞利光、拉曼光和雜質(zhì)所發(fā)射的熒光。 07:41:27 定量方法 定量依據(jù) 定量分析方法 07:41:27 定量依據(jù) 熒光強(qiáng)度 If 正比于 吸收的光強(qiáng)度 Ia 和熒光量子產(chǎn)率 Φ ： faII??? ?00 1 1 0 bCatI I I I ??? ? ? ?由朗伯 比耳定律得： ? ? ? ?2 . 3 0 3001 1 0 1b C b CfI I I e????? ? ? ? ? ?熒光強(qiáng)度 If ： 定量分析方法 07:41:27 對于稀溶液，當(dāng) ?bC ： 02 . 3 0 3ffI I b C??? If 熒光強(qiáng)度 I0 入射光強(qiáng)度 Φf 熒光量子產(chǎn)率 b 吸收光程 ? 摩爾吸光系數(shù) C 物質(zhì)濃度 fI K C? 定量分析方法 07:41:27 定量方法 標(biāo)準(zhǔn)曲線法： F Cs Fx Cx 定量分析方法 07:41:27 A 無機(jī)化合物的熒光分析 如 Mg、 Al、 Ca等，本身不發(fā)射熒光，但與有機(jī)試劑可形成熒光配合物進(jìn)行定量測定； 直接法 ：如 8羥基喹啉與 Al離子反應(yīng)生成熒光配合物 安息香， 水楊醛縮鄰氨基苯酚，黃酮醇， 二苯乙醇酮 熒光分析測定方法、特點(diǎn)和應(yīng)用 07:41:27 熒光熄滅法 07:41:27 B 有機(jī)化合物的熒光分析 本身發(fā)射熒光的，如羅丹明 B、熒光素等可直接測定； 不發(fā)射熒光的物質(zhì)可經(jīng)過處理后成為發(fā)射熒光的物質(zhì)進(jìn)行測定； 07:41:27 C：蛋白質(zhì)的熒光分析 1. 蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)，有的氨基酸自身可以發(fā)熒光，例如：酪氨酸，色氨酸，苯丙氨酸 07:41:27 具有熒光的產(chǎn)物 （ OPA）在一定 的條件下可與伯胺、多胺生成 具有熒光的產(chǎn)物 07:41:27 D 核酸檢測生命物質(zhì) 常選用一些熒光分子作為探針，通過探針標(biāo)記分子的熒光變化來研究脫氧核糖酸 (DNA)與小分子及藥物的作用機(jī)理，從而探討致病原因及篩選和設(shè)計新的高效低毒藥物
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