熒光和化學(xué)發(fā)光分析法-文庫(kù)吧在線文庫(kù)
【正文】 和熒光量子產(chǎn)率 Φ ： faII??? ?00 1 1 0 bCatI I I I ??? ? ? ?由朗伯 比耳定律得： ? ? ? ?2 . 3 0 3001 1 0 1b C b CfI I I e????? ? ? ? ? ?熒光強(qiáng)度 If ： 定量分析方法 07:41:27 對(duì)于稀溶液，當(dāng) ?bC ： 02 . 3 0 3ffI I b C??? If 熒光強(qiáng)度 I0 入射光強(qiáng)度 Φf 熒光量子產(chǎn)率 b 吸收光程 ? 摩爾吸光系數(shù) C 物質(zhì)濃度 fI K C? 定量分析方法 07:41:27 定量方法 標(biāo)準(zhǔn)曲線法： F Cs Fx Cx 定量分析方法 07:41:27 A 無(wú)機(jī)化合物的熒光分析 如 Mg、 Al、 Ca等，本身不發(fā)射熒光，但與有機(jī)試劑可形成熒光配合物進(jìn)行定量測(cè)定； 直接法 ：如 8羥基喹啉與 Al離子反應(yīng)生成熒光配合物 安息香， 水楊醛縮鄰氨基苯酚，黃酮醇， 二苯乙醇酮 熒光分析測(cè)定方法、特點(diǎn)和應(yīng)用 07:41:27 熒光熄滅法 07:41:27 B 有機(jī)化合物的熒光分析 本身發(fā)射熒光的，如羅丹明 B、熒光素等可直接測(cè)定； 不發(fā)射熒光的物質(zhì)可經(jīng)過(guò)處理后成為發(fā)射熒光的物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定； 07:41:27 C：蛋白質(zhì)的熒光分析 1. 蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)，有的氨基酸自身可以發(fā)熒光，例如：酪氨酸，色氨酸，苯丙氨酸 07:41:27 具有熒光的產(chǎn)物 （ OPA）在一定 的條件下可與伯胺、多胺生成 具有熒光的產(chǎn)物 07:41:27 D 核酸檢測(cè)生命物質(zhì) 常選用一些熒光分子作為探針，通過(guò)探針標(biāo)記分子的熒光變化來(lái)研究脫氧核糖酸 (DNA)與小分子及藥物的作用機(jī)理，從而探討致病原因及篩選和設(shè)計(jì)新的高效低毒藥物。 檢測(cè)器的方向與激發(fā)光的方向成直角，以消除樣品池中 透射光和雜散光的干擾 。 07:41:27 溶液黏度和 溫度 黏度大，溫度低，可減小碰撞引起的熒光熄滅，熒光強(qiáng)度增大。 有機(jī)物的熒光與其結(jié)構(gòu)的關(guān)系 07:41:27 D 取代基效應(yīng) 有機(jī)物的熒光與其結(jié)構(gòu)的關(guān)系 A 躍遷的類型 B 共軛效應(yīng) C 分子共平面效應(yīng) 07:41:27 金屬離子螯合物的熒光 （ 2）螯合物中金屬離子的發(fā)光 （ 1）螯合物中配位體的發(fā)光 07:41:27 金屬離子螯合物的熒光 （ 1）螯合物中配位體的發(fā)光 不少有機(jī)化合物雖然具有共軛雙鍵，但由于不是剛性結(jié)構(gòu)，分子處于非同一平面，因而不發(fā)生熒光。 07:41:26 （ 5）、 自猝滅 熒光物質(zhì)的濃度較大時(shí)，激發(fā)態(tài)分子之間碰撞較多，在碰撞中引起能量損失，產(chǎn)生自熄，使熒光強(qiáng)度減小。 熒光效率 07:41:26 Φ = 發(fā)射 熒光的分子數(shù) 激發(fā)分子 總 數(shù) 熒光效率 熒光量子產(chǎn)率（ Φ）： 衡量熒光物質(zhì)發(fā)光能力。 e h v h v ′輻射躍遷 熒光及其產(chǎn)生 07:41:26 （ 2） . 磷光發(fā)射 ： 電子由 第一激發(fā)三重態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí) → 基態(tài)各振動(dòng)能級(jí) 。 非輻射躍遷 熒光及其產(chǎn)生 07:41:26 S2S0S1e h v（
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