分子發(fā)光分析法ppt課件-閱讀頁
2025-05-21 08:13本頁面
【正文】 析法 一、熒光分析法 光源 樣品池 激發(fā) 單色器 檢測器 數(shù)據(jù)處理 儀器控制 發(fā)射 單色器 儀器設備 由光源、單色器、液槽、檢測器和信號顯示記錄器五部分組成。 ?有 兩個單色器 ，一個置于液槽前，用于獲得單色性較好的激發(fā)光；一個置于液槽后，用于分出某一波長的熒光，消除其他雜散光干擾。 氙燈光源： 波長范圍： 250~800nm連續(xù)光譜。 常用熒光分析光源： 氙燈 ，高壓汞燈。 2）單色器： 平面衍射光柵。 第二節(jié) 熒光分析法與磷光分析法 一、熒光分析法 特點 優(yōu)點 ： 1）靈敏度高，比紫外 可見分光光度法高 2～ 4個數(shù) 量級。 缺點 ：應用范圍相對小。目前采用有機試劑進行熒光分析的元素已近 70種。熒光分析中常用的另一類絡合物是三元離子絡合物。 2） 有機化合物 的分析 ①脂肪族有機化合物的分子結(jié)構(gòu)較為簡單，本身能發(fā)生熒光的很少，一般需要與某些試劑反應后才能進行熒光分析。 3） 生命與生物物質(zhì) 的分析 第二節(jié) 熒光分析法與磷光分析法 一、磷光光分析法 儀器設備 與熒光分析儀器相似，也是由 光源、單色器、液槽、檢測器和信號顯示記錄器 五部分組成。 2）磷光鏡：一種機械切光裝置，利用熒光和磷光壽命的差異消除熒光干擾。這種 吸收化學能 使分子發(fā)光的過程稱為 化學發(fā)光 。 特點： 1）靈敏度很高： ppb級 2）測定的線性范圍寬： 56數(shù)量級 3）儀器設備簡單 4）分析速度快 第三節(jié) 化學發(fā)光分析法 二、基本原理 化學發(fā)光的條件 在化學反應過程中，某些化合物接受能量而被激發(fā)，從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時，發(fā)射出一定波長的光。化學發(fā)光分析中常用發(fā)光總強度進行定量分析，將上式積分： 即發(fā)光總強度 與被測物分析濃度成正比 — 定量分析依據(jù) 化學發(fā)光強度 Icl與反應速率有如下關系： ? ? tctI ddclcl ?? ? （ dc/dt ：分析物參加反應的速率） 第三節(jié) 化學發(fā)光分析法 化學發(fā)光反應的類型 按反應體系的狀態(tài)分類，如化學發(fā)光反應在氣相中進行稱為 氣相化學發(fā)光 ；在液相或固相中進行稱為 液相或固相化學發(fā)光 ；在兩個不同相中進行則稱為異相化學發(fā)光。 例如 ： NO 或乙烯等＋ O3＝ NO2*＋ O2 NO2* → NO2＋ hv（ 600 nm) CO (NO,SO2等 ） ＋ O → CO2* CO2* → CO2＋ hv（ 300500 nm，靈敏度可測至 1ppb) 二、基本原理 第三節(jié) 化學發(fā)光分析法 （ 2） 液相化學發(fā)光 用于此類化學發(fā)光分析的發(fā)光物質(zhì)有 魯米諾（ luminol)、 光澤精 、 沒食子酸 ， 洛粉堿等 。 （ 2）液相化學發(fā)光 二、基本原理 化學發(fā)光反應的類型 第三節(jié) 化學發(fā)光分析法 （ 2）液相化學發(fā)光 光澤精 (lucigenin) NC H 3NC H 3++ . 2 N O3O x i d a t i o nO H NOC H 3*N M A+L I G H TL u c i g e n i nN M E T H Y L A C R I D O N E ( N M A )lmax = 440 nm(綠色 ) 氧化劑 : H2O2 二、基本原理 化學發(fā)光反應的類型 第三節(jié) 化學發(fā)光分析法 三、化學發(fā)光分析的儀器 分立式化學發(fā)光分析儀： 靜態(tài)方式 具有簡單，靈敏度高的特點；但手工進樣重復性差，測量精密度不高 。 流動注射式儀器： 用蠕動泵分別將試劑連續(xù)送入混合器，用進樣閥注射樣品，定時通過測量室，連續(xù)發(fā)光，測定光強度；試樣量大。 魯米諾 H2O2化學發(fā)光反應 能被許多過渡金屬離子所催化，利用這一性質(zhì)，已建立許多金屬離子的化學發(fā)光分析法。 分子發(fā)光分析法思考題 解釋名詞：振動弛豫、內(nèi)轉(zhuǎn)換、外轉(zhuǎn)換、系間竄越、猝滅效應、重原子效應、熒光激發(fā)光譜、熒光發(fā)射光譜 熒光與磷光的比較。 采取哪些措施可使室溫下有較大的磷光效率？ 試從原理和儀器兩方面比較吸光光度法和熒光分析法的異同。 化學發(fā)光要滿足那些條件？
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