分子發(fā)光分析法ppt課件(參考版)
2025-05-09 08:13本頁(yè)面
【正文】 試從原理和儀器兩方面比較熒光、磷光和化學(xué)發(fā)光分析法。 簡(jiǎn)述影響熒光效率的因素。 魯米諾 H2O2體系也用于化學(xué)發(fā)光法測(cè)定許多生化物質(zhì)。 裝置流程： 發(fā)光反應(yīng)室 光檢測(cè)器 信號(hào)放大器 顯示與記錄 第三節(jié) 化學(xué)發(fā)光分析法 四、化學(xué)發(fā)光分析的應(yīng)用 氣相化學(xué)發(fā)光 已廣泛的應(yīng)用于大氣中 O NO、 NOH2S、 SO CO等組分的監(jiān)測(cè)，目前已有各種專用的監(jiān)測(cè)儀器。難于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，分離效率也低；試樣量小。 OXIDANT BASE luminol * 3Aminophthalate + 3APA 二、基本原理 化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的類型 第三節(jié) 化學(xué)發(fā)光分析法 lmax = 425 nm 氧化劑 : H2O2 O2 KMnO4 NaClO I2 [Fe(CN)6]3. 與過(guò)氧化氫的反應(yīng)可被催化 : 過(guò)氧化酶 氧化血紅素 過(guò)渡金屬離子 (Co2+、 Cu2+、 Fe3+、 Ni、 Cr、 Ag、 Mn、Hg、 Os、 Ru、 Ir、 Rh、 V etc.) 利用 luminol與過(guò)氧化氫的反應(yīng)可測(cè)酶促反應(yīng)的底物 ， 如葡萄糖等 。 （ 1）氣相化學(xué)發(fā)光 主要有 O NO、 S的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，可用于監(jiān)測(cè)空氣中的 O NO、 SO H2S、 CO、 NO2等。 A + B → C + D* D* → D + h? 化學(xué)發(fā)光必須具備以下條件 ： 1）能快速的釋放出足夠的能量 2）反應(yīng)途徑有利于激發(fā)態(tài)產(chǎn)物的形成 3）激發(fā)態(tài)分子能夠以輻射躍遷的形式返回基態(tài)，或能夠?qū)⑵淠芰哭D(zhuǎn)移給可以產(chǎn)生輻射躍遷的其他分子 第三節(jié) 化學(xué)發(fā)光分析法 二、基本原理 化學(xué)發(fā)光效率和發(fā)光強(qiáng)度 化學(xué)效率： frcl ??? ??? 參加反應(yīng)的分子數(shù)發(fā)射光子的分子數(shù)參加反應(yīng)分子數(shù)激發(fā)態(tài)分子數(shù)?r?發(fā)光效率： 激發(fā)態(tài)分子數(shù)產(chǎn)生光子數(shù)?f?化學(xué)發(fā)光效率： 第三節(jié) 化學(xué)發(fā)光分析法 二、基本原理 ? ? cttcttI tt ???? ?? cl0cl0 cl dddd ??由于化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度隨著時(shí)間和反應(yīng)物消耗的變化逐漸減小，對(duì)于一級(jí)動(dòng)力學(xué)反應(yīng)： Icl(t)與該時(shí)刻分析濃度 c成正比 。利用化學(xué)發(fā)光反應(yīng)而建立起來(lái)的分析方法稱為 化學(xué)發(fā)光分析法 。 磷光分析法應(yīng)用 主要用于測(cè)定有機(jī)化合物： 1）稠（雜）環(huán)芳烴分析 2）農(nóng)藥、生物堿、植物生長(zhǎng)激素的分析 3）藥物分析和臨床分析 第三節(jié) 化學(xué)發(fā)光分析法 一、概述 某些物質(zhì)在進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)時(shí)，由于吸收了反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生的化學(xué)能，而使反應(yīng)產(chǎn)物分子激發(fā)至激發(fā)態(tài)，受激分子由激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時(shí)，便發(fā)出一定波長(zhǎng)的光。 磷光特殊配件 ： 1）試樣室： 如將樣品放在盛有液氮的石英杜瓦瓶?jī)?nèi)，即可用于低溫磷光測(cè)定。 ②芳香族化合物因具有共軛的不飽和體系，多數(shù)能發(fā)生熒光，可直接用熒光法測(cè)定。 ②熒光猝滅法也是熒光分析中經(jīng)常采用的方法。能夠同金屬離子形成熒光絡(luò)合物的有機(jī)試劑絕大多數(shù)是芳香族化合物。 第二節(jié) 熒光分析法與磷光分析法 一、熒光分析法 應(yīng)用 1） 無(wú)機(jī)化合物 的分析 ①利用無(wú)機(jī)離子與一些有機(jī)化合物形成有熒光的絡(luò)合物，對(duì)其進(jìn)行熒光檢測(cè)。 2）選擇性強(qiáng)，既可依據(jù)特征發(fā)射光譜，又可根據(jù) 特征吸收光譜； 3）試樣用量少。 3）檢測(cè)器： 光電倍增管。 高壓汞燈光源：光譜略呈帶狀，熒光分析中常用 ， 405， 436nm三條譜線。是應(yīng) 用最廣泛的光源。 第二節(jié) 熒光分析法與磷光分析法 一、熒光分析法 1）光源 光源的要求：比吸收測(cè)量中的光源有更大的發(fā)射強(qiáng)度。 與分光光度計(jì)的主要差別 ： ?采用 垂直測(cè)量 方式，即在激發(fā)光相垂直的方向測(cè)量熒光，以消去透射光影響。 如果 固定激發(fā)光波長(zhǎng)為其最大激發(fā)波長(zhǎng)，然后測(cè)定所發(fā)射的不同的波長(zhǎng)的熒光或磷光強(qiáng)度，即可繪制 熒光或磷光光譜曲線 。 第一節(jié) 熒光與磷光的基本原理 四、激發(fā)光譜與熒光（磷光）光譜 熒光和磷光均為光致發(fā)光，因此必須選擇合適的激發(fā)光波長(zhǎng)，可根據(jù)它們的激發(fā)光譜曲線來(lái)確定。 熒光自猝滅效應(yīng) ： 由熒光物質(zhì)自身引發(fā)的 熒光強(qiáng)度
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