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分子熒光分析法ppt課件(參考版)

2025-05-09 08:16本頁(yè)面
  

【正文】 。 。 d. 磷光波長(zhǎng)短于熒光波長(zhǎng)。 b. 受激分子從激發(fā)態(tài)的各個(gè)振動(dòng)能級(jí)返回至基態(tài)時(shí)所發(fā)出的光稱為熒光。 70 課堂復(fù)習(xí) (1) 下列敘述中正確的是 ( )。 ? 熒光熄滅法測(cè)定猝滅劑 Ni2+對(duì) AlPAN絡(luò)合物有熒光猝滅作用,可測(cè) Ni2+( 6 105 ~ 6 103 ?g ? ?? ?? ?KcclIKFcleIKFeIIKIIKFclcl???????????????????00001B e e r時(shí),上式簡(jiǎn)化為當(dāng)定律率為常數(shù),取決于熒光效0I IF熒光分析定量依據(jù): 熒光強(qiáng)度 F與濃度 c 成線性關(guān)系。 55 H3CONNC HHC H 2H OHHH2S O4 H 2 O1 / 2?例如:硫酸奎寧在不同波長(zhǎng)激發(fā)下的熒光光譜和散射光譜 56 320 448 448 360 320 350 400 350 激發(fā) 350nm 硫酸奎寧 激發(fā) 320nm 硫酸奎寧 激發(fā) 350nm 激發(fā) 320nm 強(qiáng) 度 (a) 強(qiáng) 度 (b) λ/nm λ/nm λ/nm λ/nm 圖 116 硫酸奎寧在不同波長(zhǎng)激發(fā)下的熒光光譜和散射光譜 57 ?熒光是物質(zhì)吸收光子之后發(fā)出的光 , 熒光強(qiáng)度 (F)與熒光物質(zhì)吸收光的程度以及發(fā)射熒光的能力有關(guān) 。 ?特點(diǎn) : 當(dāng)光子失去部分能量時(shí),波長(zhǎng)比入射光長(zhǎng),干擾最大; 當(dāng)光子多得到部分能量時(shí),波長(zhǎng)比入射光短。 ? 特點(diǎn) :波長(zhǎng)與入射光相同。 溶劑 相對(duì)介電常數(shù) 熒光峰 l/nm 熒光效率 乙腈 410 丙酮 405 氯仿 398 四氯化碳 390 巰基喹啉在不同溶劑中的熒光峰和熒光效率 52 pH值影響熒光強(qiáng)度示例 N H 3 N H 2 N HO HHO HH pH值 : 2 7~ 12 13 存在形式:離子 分子 離子 有無(wú)熒光:無(wú) 藍(lán)色熒光 無(wú) 0 20 10 18NHHC NHHC OHC OHHC 3562565656 光強(qiáng)度 相對(duì)熒:- ?53 ?熄滅劑 : 鹵素離子、重金屬離子、溶解氧分子、硝基化合物、重氮化合物、羰基和羧基化合物。 50 溫度 : T 低, φf(shuō)增加。 ⑷ 熒光熄滅 的影響:熒光物質(zhì)與熒光熄滅劑相互作用 ,引起熒光強(qiáng)度降低 。 ⑵ 溶劑 的影響:溶劑極性增加有時(shí)會(huì)使熒光強(qiáng)度增加 ,熒光波長(zhǎng)長(zhǎng)移;溶劑的黏度減小 , 熒光強(qiáng)度減弱 。如:- R、- SO3H、- NH3+ 等。如:- COOH、-NO- CO、- NO、- SH、- NHCOCH- X(鹵素原子序數(shù) ↑,熒光效率 ↓)等。如:-NH- OH、- OCH3 、- NHR、- CN等。例如: 1, 2-二苯乙烯反式有強(qiáng)烈熒光,而順式無(wú)熒光。 聯(lián)苯 ?f= 芴 ?f= NO H NOM g8羥基喹啉 8羥基喹啉鎂 46 ?空間位阻使分子共平面性下降,熒光減弱。 ⑶ 取代基的影響 :給電子取代基使熒光強(qiáng)度增大;而吸電子取代基則使熒光強(qiáng)度降低。共軛度越大,發(fā)射波長(zhǎng)長(zhǎng)移,發(fā)光強(qiáng)度增加。分子結(jié)構(gòu)中有 π→π﹡ 躍遷( K帶強(qiáng)吸收)或 n→π﹡ 躍遷( R帶弱吸收)。 COOH NO2 I 無(wú)熒光 NH2 OH 比 熒光強(qiáng) 50倍 38 取代基之間若發(fā)生氫鍵,增強(qiáng)分子平面性和剛性會(huì)加強(qiáng)熒光 : 堿性 有熒光 COOH OH 無(wú)熒光 OH COOH 水楊酸 中性、堿性 均有熒光 OH O H C O 39 (三)熒光試劑 熒光胺 鄰苯二
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