分子發(fā)光分析法ppt課件-資料下載頁
2025-05-06 08:13本頁面
【正文】 參加反應(yīng)分子數(shù)激發(fā)態(tài)分子數(shù)?r?發(fā)光效率： 激發(fā)態(tài)分子數(shù)產(chǎn)生光子數(shù)?f?化學發(fā)光效率： 第三節(jié) 化學發(fā)光分析法 二、基本原理 ? ? cttcttI tt ???? ?? cl0cl0 cl dddd ??由于化學發(fā)光強度隨著時間和反應(yīng)物消耗的變化逐漸減小，對于一級動力學反應(yīng)： Icl(t)與該時刻分析濃度 c成正比 ?；瘜W發(fā)光分析中常用發(fā)光總強度進行定量分析，將上式積分： 即發(fā)光總強度 與被測物分析濃度成正比 — 定量分析依據(jù) 化學發(fā)光強度 Icl與反應(yīng)速率有如下關(guān)系： ? ? tctI ddclcl ?? ? （ dc/dt ：分析物參加反應(yīng)的速率） 第三節(jié) 化學發(fā)光分析法 化學發(fā)光反應(yīng)的類型 按反應(yīng)體系的狀態(tài)分類，如化學發(fā)光反應(yīng)在氣相中進行稱為 氣相化學發(fā)光 ；在液相或固相中進行稱為 液相或固相化學發(fā)光 ；在兩個不同相中進行則稱為異相化學發(fā)光。 （ 1）氣相化學發(fā)光 主要有 O NO、 S的化學發(fā)光反應(yīng)，可用于監(jiān)測空氣中的 O NO、 SO H2S、 CO、 NO2等。 例如 ： NO 或乙烯等＋ O3＝ NO2*＋ O2 NO2* → NO2＋ hv（ 600 nm) CO (NO,SO2等 ） ＋ O → CO2* CO2* → CO2＋ hv（ 300500 nm，靈敏度可測至 1ppb) 二、基本原理 第三節(jié) 化學發(fā)光分析法 （ 2） 液相化學發(fā)光 用于此類化學發(fā)光分析的發(fā)光物質(zhì)有 魯米諾（ luminol)、 光澤精 、 沒食子酸 ， 洛粉堿等 。 OXIDANT BASE luminol * 3Aminophthalate + 3APA 二、基本原理 化學發(fā)光反應(yīng)的類型 第三節(jié) 化學發(fā)光分析法 lmax = 425 nm 氧化劑 : H2O2 O2 KMnO4 NaClO I2 [Fe(CN)6]3. 與過氧化氫的反應(yīng)可被催化 : 過氧化酶 氧化血紅素 過渡金屬離子 (Co2+、 Cu2+、 Fe3+、 Ni、 Cr、 Ag、 Mn、Hg、 Os、 Ru、 Ir、 Rh、 V etc.) 利用 luminol與過氧化氫的反應(yīng)可測酶促反應(yīng)的底物 ， 如葡萄糖等 。 （ 2）液相化學發(fā)光 二、基本原理 化學發(fā)光反應(yīng)的類型 第三節(jié) 化學發(fā)光分析法 （ 2）液相化學發(fā)光 光澤精 (lucigenin) NC H 3NC H 3++ . 2 N O3O x i d a t i o nO H NOC H 3*N M A+L I G H TL u c i g e n i nN M E T H Y L A C R I D O N E ( N M A )lmax = 440 nm(綠色 ) 氧化劑 : H2O2 二、基本原理 化學發(fā)光反應(yīng)的類型 第三節(jié) 化學發(fā)光分析法 三、化學發(fā)光分析的儀器 分立式化學發(fā)光分析儀： 靜態(tài)方式 具有簡單，靈敏度高的特點；但手工進樣重復性差，測量精密度不高 。難于實現(xiàn)自動化，分離效率也低；試樣量小。 流動注射式儀器： 用蠕動泵分別將試劑連續(xù)送入混合器，用進樣閥注射樣品，定時通過測量室，連續(xù)發(fā)光，測定光強度；試樣量大。 裝置流程： 發(fā)光反應(yīng)室 光檢測器 信號放大器 顯示與記錄 第三節(jié) 化學發(fā)光分析法 四、化學發(fā)光分析的應(yīng)用 氣相化學發(fā)光 已廣泛的應(yīng)用于大氣中 O NO、 NOH2S、 SO CO等組分的監(jiān)測，目前已有各種專用的監(jiān)測儀器。 魯米諾 H2O2化學發(fā)光反應(yīng) 能被許多過渡金屬離子所催化，利用這一性質(zhì)，已建立許多金屬離子的化學發(fā)光分析法。 魯米諾 H2O2體系也用于化學發(fā)光法測定許多生化物質(zhì)。 分子發(fā)光分析法思考題 解釋名詞：振動弛豫、內(nèi)轉(zhuǎn)換、外轉(zhuǎn)換、系間竄越、猝滅效應(yīng)、重原子效應(yīng)、熒光激發(fā)光譜、熒光發(fā)射光譜 熒光與磷光的比較。 簡述影響熒光效率的因素。 采取哪些措施可使室溫下有較大的磷光效率？ 試從原理和儀器兩方面比較吸光光度法和熒光分析法的異同。 試從原理和儀器兩方面比較熒光、磷光和化學發(fā)光分析法。 化學發(fā)光要滿足那些條件？
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