熒光分析法ppt課件(2)-閱讀頁
2025-05-18 05:22本頁面
【正文】 長總是比其相應 的吸收 (或激發(fā) )光譜的波長長。 原因： 處于激發(fā)態(tài)的分子一方面由于振動弛豫 等損失了部分能量，另一方面溶劑分子的弛豫作用 使其能量進一步損失，因而產(chǎn)生了發(fā)射光譜波長的 位移。（見 P220圖 113） ⒉ 鏡像對稱規(guī)則 一般而言，分子的熒光發(fā)射光譜與其吸收光譜之間存在著鏡像關(guān)系。一般情況下，分子的基態(tài)和第一激發(fā)單重態(tài) 的振動能級結(jié)構(gòu)類似，因此吸收光譜的形狀與熒 光發(fā)射光譜的形狀呈鏡像對稱關(guān)系。 這是由于熒光分子無論被激發(fā)到哪一個激發(fā) 態(tài)，處于激發(fā)態(tài)的分子經(jīng)振動弛豫及內(nèi)轉(zhuǎn)換等過 程后最終回到第一激發(fā)態(tài)的最低振動能級。 五、影響熒光強度的因素 熒光是由具有熒光結(jié)構(gòu)的物質(zhì)吸收光后產(chǎn)生的，其發(fā) 光強度與該物質(zhì)分子的吸光作用及熒光效率有關(guān)，影響物 質(zhì)熒光強度的因素主要有兩個： ㈠分子結(jié)構(gòu) 一般具有強熒光的分子都具有大的共軛 π 鍵結(jié)構(gòu)、供 電子取代基、剛性的平面結(jié)構(gòu)等。 ㈡發(fā)光分子所處的環(huán)境 熒光分子所處的溶液環(huán)境對其熒光發(fā)射有直接的影 響。 ㈠ 分子結(jié)構(gòu) ⑴ 躍遷類型： 大多數(shù)熒光化合物多是由 π → π ＊ 或 n→ π ＊ 躍 遷所致的激發(fā)態(tài)去活后，發(fā)生 π ＊ → π 或 π ＊ → n 躍遷產(chǎn)生的。 ⑵ 共軛效應 ① 含有 π → π ＊ 躍遷能級的芳香族化合物的熒光最 強，最有用。 ③稠環(huán)化合物一般會產(chǎn)生熒光。 ⑤當苯環(huán)被稠化至雜環(huán)核上時，吸收峰的摩爾吸光 系數(shù)增加，因此喹啉、吲哚等會產(chǎn)生熒光。 ①給電子基團，使熒光增強。 ⑷ 分子的剛性效應 ① 在同樣長共軛分子中，分子的剛性越強，熒光效率 越大。 如： 8羥基喹啉本身是弱熒光物質(zhì)，與 Mg2+、 Al3+形成 配位化合物后，熒光增強。適當?shù)倪x取實驗條件有利于提高熒光分析的靈敏度和選擇性。 ②溶劑的粘度 溶劑的粘度降低，分子間碰撞機會增加，無輻射躍遷幾率增加，熒光減弱。 一般地，隨溫度降低，溶液中熒光效率和熒 光強度將增大，并伴隨光譜的藍移。 ⑶ pH的影響 ①對于含有酸性或堿性基團的熒光物質(zhì)而言， 溶液的 pH將對這類物質(zhì)的熒光強度產(chǎn)生較大的 影響。 ②溶液的 pH也影響金屬配合物的熒光性質(zhì)。 熒光猝滅劑： 能引起熒光強度降低的物質(zhì)。 ②靜態(tài)猝滅：熒光分子與猝滅劑形成不發(fā)光的基態(tài)配合物 從而使熒光猝滅。 利用熒光的這兩種猝滅作用可以檢測猝滅劑的濃度。 因此在熒光測量中，熒光物質(zhì)的濃度不應太 大。 ⑸ 內(nèi)濾作用 內(nèi)濾作用： 當溶液中存在能吸收熒光物質(zhì)的 激發(fā)光或發(fā)射光的物質(zhì)時，會使體系熒光減弱 的現(xiàn)象。選擇適當?shù)募ぐl(fā)波長 可消除此干擾。 二、定量分析法 ⒈ 校正曲線法 ⒉比例法 ⒊聯(lián)立方程式法 0SSX O XF F CF F C? ?? 00XXSSFFCCFF????第三節(jié) 熒光分光光度計 第四節(jié) 熒光分析新技術(shù)簡介 ? 掌握內(nèi)容： ⒈ 分子熒光的發(fā)生過程； ⒉ 激發(fā)光譜和發(fā)射光譜； ⒊ 激發(fā)光譜的特征； ⒋ 影響熒光強度的內(nèi) 、 外部因素 。 ? 了解內(nèi)容： ⒈ 熒光分光光度計與熒光分析新技術(shù) 。
教學課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1