氨基酸工業(yè)代謝控制發(fā)酵-閱讀頁
2024-10-31 12:36本頁面
【正文】 bio充足，存在乙醛酸循環(huán)，中間物質(zhì)和能量充足，長細(xì)胞，膜磷脂合成正常，正常反饋調(diào)節(jié)，不積累 Glu，細(xì)胞形態(tài)正常。 第五節(jié) Lys代謝控制發(fā)酵 1. 生產(chǎn)菌種 谷氨酸棒桿菌（ ） 黃色短桿菌 (B. flavum) 乳糖發(fā)酵短桿菌 () 谷氨酸棒桿菌、黃色短桿菌 Lys合成途徑及正常調(diào)控機(jī)制 Asp 天冬氨酸 Asp 激酶 天冬氨酸 P 天冬氨酸 β –半醛 高絲氨酸 二氫吡啶 2,6二羧酸 O琥珀酰 高絲氨酸 蛋氨酸(Met) 高絲氨酸 P 蘇氨酸（ Thr） 異亮氨酸（ Ile） Thr脫氫酶 賴氨酸 (Lys) Hse脫氫酶 DDP合成酶 合成酶 (1) Asp三分支途徑優(yōu)先合成 Met，后合成 Thr、Ile，最后合成 Lys (2) Thr和 Lys對 Asp激酶有協(xié)同反饋抑制 (3) Thr對 Hse脫氫酶有反饋抑制 (4) Ile對 Thr脫氫酶有反饋抑制 (5) Met對 O琥珀酰高絲氨酸合成酶有反饋?zhàn)瓒? 3. Lys 代謝控制發(fā)酵 菌種的遺傳改造 (1)切斷支路代謝 ——Hse營養(yǎng)缺陷型 (Hse)菌株篩選 選育 Hse脫氫酶缺失的 Hse菌株，使代謝流向Lys合成，控制 Hse添加量，既滿足菌體對 Met、Thr和 Ile生長需要又不形 Thr和 Lys對 Asp激酶的協(xié)同反饋抑制，積累 Lys (2)用 Hse菌株選育解除 Lys反饋抑制突變株 Hse 誘變 HseLys反饋抑制 Hse抗 Lys反饋抑制 長出菌落 (Hse, AECr) 基本培養(yǎng)基＋ Hse(高濃度 )＋AEC(Lys結(jié)構(gòu)類似物 ) Hse, AECr：解除 Lys對 Asp激酶反饋抑制的 Hse營養(yǎng)缺陷型雙突變株，不論添加 Hse濃度高低，皆不會出現(xiàn) Thr+Lys協(xié)同反饋抑制，大量積累 Lys (3) Hse脫氫酶滲漏缺陷型突變株 日本椎尾等人 黃色短桿菌 突變株 亞硝基胍 ? Hse脫氫酶活性僅為 野生型菌株的 1/30 ? Met， Thr合成量很少，僅滿足菌體生長 ? 代謝流轉(zhuǎn)向 Lys大量合成 ? Thr合成量少，和 Lys形不成協(xié)同反饋抑制，大量積累 Lys，產(chǎn)量達(dá) 25g/L (4) Lys 生產(chǎn)菌種遺傳標(biāo)記及 Lys產(chǎn)量 谷氨酸棒桿菌 Hse－ 13g/L Hse－ AECR 中山清（日本） 42g/L 黃色短桿菌 Hse－ AECRCSIFps 51g/L (CSI:檸檬酸合成酶抑制； Fps：氟代丙酮酸敏感 ) 黃色短桿菌 AIII HseAECr 徐所維 5055g/L 鈍齒棒桿菌 pI32 HseAECr 陳琦 50g/L (5) 乳糖發(fā)酵短桿菌 Lys代謝控制發(fā)酵 Lys合成與調(diào)控機(jī)制基本同于谷氨酸棒桿菌、黃色短桿菌。用氨基酸的結(jié)構(gòu)類似物作指示菌生長抑制劑，通過指示菌是否生長而判斷是否存在解除抑制劑氨
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