氨基酸工業(yè)代謝控制發(fā)酵(參考版)
2024-10-19 12:36本頁面
【正文】 上層培養(yǎng)基 有指示菌 影印接種 有抑制劑 L丙氨酸產(chǎn)生菌 枯草桿菌生長區(qū) 豐富細(xì)菌 培養(yǎng)基平板分離 產(chǎn)氨基酸培養(yǎng)基 枯草桿菌生長區(qū)對(duì)應(yīng)菌落目的菌 可逆抑制測定方法： 根據(jù)特異性解除抑制劑對(duì)指示菌生長抑制，讓指示菌生長而檢測氨基酸的方法 適用于檢測氨基酸的可逆性抑制劑測定法 被檢測氨基酸 抑制劑 指示菌 Ala L氨基乙基磺酸 普通變形桿菌 Arg 高絲氨酸 B Asp β－羥基天冬氨酸 胚芽乳桿菌 ATCC 8014 Leu 2氨基 4甲基乙酸 ATCC 9723 Ser α－氨基絲氨酸 啤酒足球菌 ATCC 8042 總 結(jié) 氨基酸高產(chǎn)菌株代謝控制發(fā)酵基本規(guī)律 以合成途徑與代謝調(diào)控為理論依據(jù) 三類常用突變株 營養(yǎng)缺陷型突變株 解除反饋調(diào)節(jié)突變株 膜透性突變株 生物素缺陷型、甘油缺陷型、油酸缺陷型、青霉素或 表面活性劑處理 思考題 ?控制代謝發(fā)酵的基本方法 。 特殊調(diào)控：代謝互鎖調(diào)控機(jī)制 互鎖調(diào)節(jié)： Lys合成受其它氨基酸合成途徑產(chǎn)物反饋調(diào)節(jié) Lys生產(chǎn)菌種遺傳標(biāo)記和產(chǎn)量： Hse－ AECRLeu－ 110g/L （加 Hse，限量加 Leu，免除 Leu對(duì) DDP合成酶反饋?zhàn)瓒艋ユi調(diào)節(jié)） Hse－ AECRLeu－ αTARAla－ 110g/L （加 Hse、 Leu，限量加 Ala， αTA是 Leu結(jié)構(gòu)類似物） Asp Asp激酶 AspP Aspβ –半醛 Hse Met Thr Lys Ile DDP 協(xié)同反饋抑制 DDP還原酶 DDP合成酶 反饋抑制 Ala Leu 反饋?zhàn)瓒? 第六節(jié) 產(chǎn)氨基酸菌種的分離、檢測原理與方法 營養(yǎng)缺陷型補(bǔ)充營養(yǎng)檢測法 影印接種 His產(chǎn)生菌 大量 UV照射 細(xì)胞死亡 鑒定生長區(qū) 豐富細(xì)菌 培養(yǎng)基平板分離 產(chǎn)氨基酸培養(yǎng)基 基本培養(yǎng)基 E. coli His－ 混合上層培養(yǎng)基 鑒定菌： 可逆抑制測定法 β2噻吩丙氨酸（ 抑制劑 ） L苯丙氨酸（解除抑制劑） ＋ 培養(yǎng)基 枯草桿菌（指示菌） 生長 不生長 原理：指示菌在抑制劑存在條件下生長，證明存在解除抑制劑；指示菌不生長，證明不存在解除抑制劑。 8hr Glu非積累型細(xì)胞 Glu積累型細(xì)胞 培養(yǎng)中后期， bio濃度漸低，乙醛酸途徑減弱直至關(guān)閉，膜磷脂合成缺陷，膜透性增強(qiáng)，分泌 Glu，解除反饋調(diào)節(jié)，大量積累Glu，細(xì)胞形態(tài)異常，未溶解。低濃度 bio降低裂解酶活性，使菌體生長后關(guān)閉乙醛酸循環(huán)，使底物流向 Glu合成，低濃度 bio使膜磷脂合成缺陷，增加膜通透性，利于Glu胞外分泌，解除反饋調(diào)節(jié)，利于 Glu合成并大量積累。 ? 生物素控制磷脂的合成 ? 使用生物素缺陷型菌株進(jìn)行谷氨酸發(fā)酵，通過限制發(fā)酵培養(yǎng)基中生物素的濃度控制脂肪酸生物合成，從而控制磷脂的合成 ? 作用機(jī)制：生物素作為催化脂肪酸生物合成最初反應(yīng)的關(guān)鍵酶乙酰 CoA羧化酶的輔酶，參與了脂肪酸的合成，進(jìn)而影響磷脂的合成。 ? 生物素對(duì)糖代謝速率的影響
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1