氨基酸工業(yè)代謝控制發(fā)酵(已改無(wú)錯(cuò)字)
2022-11-16 12:36:24 本頁(yè)面
【正文】 響磷脂的合成。當(dāng)磷脂合成減少到正常量的一半左右時(shí)，細(xì)胞變形，谷氨酸向膜外漏出，積累于發(fā)酵液中 ?控制生物素添加量使菌種生產(chǎn) Glu 高濃度 bio增強(qiáng)羧化酶活性，促進(jìn)羧化反應(yīng)利于 Glu合成。低濃度 bio降低裂解酶活性，使菌體生長(zhǎng)后關(guān)閉乙醛酸循環(huán)，使底物流向 Glu合成，低濃度 bio使膜磷脂合成缺陷，增加膜通透性，利于Glu胞外分泌，解除反饋調(diào)節(jié)，利于 Glu合成并大量積累。 添加亞適量， 510μg/L 培養(yǎng)基，生產(chǎn) Glu 培養(yǎng)前期， bio充足，存在乙醛酸循環(huán)，中間物質(zhì)和能量充足，長(zhǎng)細(xì)胞，膜磷脂合成正常，正常反饋調(diào)節(jié)，不積累 Glu，細(xì)胞形態(tài)正常。 8hr Glu非積累型細(xì)胞 Glu積累型細(xì)胞 培養(yǎng)中后期， bio濃度漸低，乙醛酸途徑減弱直至關(guān)閉，膜磷脂合成缺陷，膜透性增強(qiáng)，分泌 Glu，解除反饋調(diào)節(jié)，大量積累Glu，細(xì)胞形態(tài)異常，未溶解。 第五節(jié) Lys代謝控制發(fā)酵 1. 生產(chǎn)菌種 谷氨酸棒桿菌（ ） 黃色短桿菌 (B. flavum) 乳糖發(fā)酵短桿菌 () 谷氨酸棒桿菌、黃色短桿菌 Lys合成途徑及正常調(diào)控機(jī)制 Asp 天冬氨酸 Asp 激酶 天冬氨酸 P 天冬氨酸 β –半醛 高絲氨酸 二氫吡啶 2,6二羧酸 O琥珀酰 高絲氨酸 蛋氨酸(Met) 高絲氨酸 P 蘇氨酸（ Thr） 異亮氨酸（ Ile） Thr脫氫酶 賴氨酸 (Lys) Hse脫氫酶 DDP合成酶 合成酶 (1) Asp三分支途徑優(yōu)先合成 Met，后合成 Thr、Ile，最后合成 Lys (2) Thr和 Lys對(duì) Asp激酶有協(xié)同反饋抑制 (3) Thr對(duì) Hse脫氫酶有反饋抑制 (4) Ile對(duì) Thr脫氫酶有反饋抑制 (5) Met對(duì) O琥珀酰高絲氨酸合成酶有反饋?zhàn)瓒? 3. Lys 代謝控制發(fā)酵 菌種的遺傳改造 (1)切斷支路代謝 ——Hse營(yíng)養(yǎng)缺陷型 (Hse)菌株篩選 選育 Hse脫氫酶缺失的 Hse菌株，使代謝流向Lys合成，控制 Hse添加量，既滿足菌體對(duì) Met、Thr和 Ile生長(zhǎng)需要又不形 Thr和 Lys對(duì) Asp激酶的協(xié)同反饋抑制，積累 Lys (2)用 Hse菌株選育解除 Lys反饋抑制突變株 Hse 誘變 HseLys反饋抑制 Hse抗 Lys反饋抑制 長(zhǎng)出菌落 (Hse, AECr) 基本培養(yǎng)基＋ Hse(高濃度 )＋AEC(Lys結(jié)構(gòu)類似物 ) Hse, AECr：解除 Lys對(duì) Asp激酶反饋抑制的 Hse營(yíng)養(yǎng)缺陷型雙突變株，不論添加 Hse濃度高低，皆不會(huì)出現(xiàn) Thr+Lys協(xié)同反饋抑制，大量積累 Lys (3) Hse脫氫酶滲漏缺陷型突變株 日本椎尾等人 黃色短桿菌 突變株 亞硝基胍 ? Hse脫氫酶活性僅為 野生型菌株的 1/30 ? Met， Thr合成量很少，僅滿足菌體生長(zhǎng) ? 代謝流轉(zhuǎn)向 Lys大量合成 ? Thr合成量少，和 Lys形不成協(xié)同反饋抑制，大量積累 Lys，產(chǎn)量達(dá) 25g/L (4) Lys 生產(chǎn)菌種遺傳標(biāo)記及 Lys產(chǎn)量 谷氨酸棒桿菌 Hse－ 13g/L Hse－ AECR
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1