熒光顯微鏡及激光掃描共聚焦顯微鏡使用-閱讀頁
2025-05-08 20:46本頁面
【正文】 1. 熒光顯微鏡要在光線盡量暗的環(huán)境下觀察。 3. 暗視野顯微鏡要在光線盡量暗的環(huán)境下觀察。 肪肝組織細(xì)胞。 Laser Scanning Confocal Microscope 1. 普通熒光顯微鏡的不足 使用熒光物質(zhì)標(biāo)記細(xì)胞中的特定成分或結(jié)構(gòu)，不僅圖像與對(duì)比度增強(qiáng)，而且由于許多熒光顯微鏡的光源使用短波長(zhǎng)的紫外光，大大提高了分辯率（ δ= λ/ NA ）。 一、激光掃描共聚焦顯微鏡的成像基本原理 2. 共聚焦掃描顯微鏡的成像原理 采用點(diǎn)光源照射標(biāo)本，在焦平面上形成一個(gè)輪廓分明的小的光點(diǎn)，該點(diǎn)被照射后發(fā)出的熒光被物鏡收集，并沿原照射光路回送到由雙向色鏡構(gòu)成的分光器。光源和探測(cè)器前方都各有一個(gè)針孔，分別稱為照明針孔和探測(cè)針孔。 這樣，來自焦平面的光，可以會(huì)聚在探測(cè)孔范圍之內(nèi)，而來自焦平面上方或下方的散射光都被擋在探測(cè)孔之外而不能成像。 Confocal Principle 每一幅焦平面圖像實(shí)際上是標(biāo)本的光學(xué)橫切面，這個(gè)光學(xué)橫短面總是有一定厚度的，又稱為光學(xué)薄片。把 XY平面（焦平面）掃描與 Z軸（光軸）掃描相結(jié)合，通過累加連續(xù)層次的二維圖像，經(jīng)過專門的計(jì)算機(jī)軟件處理，可以獲得樣品的三維圖像。 2. PBS漂洗 2次，每次 3 min。 4. PBS漂洗 3次，每次 5min。 6. 激光掃描共聚焦顯微鏡觀察
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