農(nóng)產(chǎn)品分析3-2-在線瀏覽
2025-04-02 13:53本頁(yè)面
【正文】 定量。 ? 內(nèi)標(biāo)物要滿足以下要求：；；；，且無(wú)組分峰影響。 ，適用于大批量試樣的快速分析。 若測(cè)定蛋白質(zhì)樣品的氨基酸組成，必須經(jīng)酸水解把蛋白質(zhì)完全變成游離氨基酸后才能上柱分析 。樣品分析? 把經(jīng)處理后的樣品上柱分析，上柱的樣品量視自動(dòng)分析儀的靈敏度而定。? 根據(jù)峰出現(xiàn)的時(shí)間來(lái)確定氨基酸的種類， 從峰的高度和寬度可算出各種氨基酸的精確含量 。 柱溫 :53℃。? 測(cè)定條件：必須在 pH5～ ， 100℃ 下進(jìn)行反應(yīng)時(shí)間為 10～15min，生成的紫色物質(zhì)在 570nm下進(jìn)行比色測(cè)定。? 樣品中氨基酸的濃度 83550型號(hào)氨基酸分析儀器的氨基酸適宜濃度為 110nmol/50ml，脯氨酸 6nmol／ 50ml。? 柱溫氨基酸的分離與柱溫有關(guān) 835型氨基酸分析儀柱溫規(guī)定 53℃.? 樹(shù)脂的污染 污染的樹(shù)脂也會(huì)使分辨率降低。? 除氨 在色譜柱前附加一 除氨柱 ，除去緩沖液、試樣或流路系統(tǒng)中混入的氨，防止氨在分離過(guò)程中被洗脫下來(lái)。? 茚三酮的氧化 茚三酮很易氧化，氧化后顯色效率降低，甚至變質(zhì)失效。 ? 柱層析的陽(yáng)離子交換樹(shù)脂 是磺酸型強(qiáng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂（苯乙烯 二乙烯基苯）。而 脯氨酸和羥脯氨酸則生成黃棕色化合物。出峰的時(shí)間順序：? 天冬氨酸（ Asp）、蘇氨酸 **（ Thr）、絲氨酸（ Ser）、谷氨酸（ Glu） ? 甘氨酸（ Gly）、丙氨酸（ Ala）、半胱氨酸（ Cys）、色氨酸 **（ Trp）、纈氨酸 **(Val)? 蛋氨酸 **（ Met）、異亮氨酸 **（ Ile）、亮氨酸 **（ Leu）、酪氨酸（ Tyr）、苯丙氨酸 **（ Phe） ? 賴氨酸 **（ Lys）、 NH組氨酸（ His）、精氨酸（ Arg） **為必需氨基酸 ? ? 方法原理： 氨基酸具有酸、堿兩重性質(zhì)，因?yàn)榘被岷?COOH基顯示酸性，又含有 NH2基顯示堿性。當(dāng)加入甲醛溶液時(shí)， NH2與甲醛結(jié)合，其堿性消失，破壞內(nèi)鹽的存在，就可用堿來(lái)滴定 COOH基，以間接方法測(cè)定氨基酸的量，反應(yīng)式可能以下面三種形式存在。 ％ 麝香草酚酞乙醇溶液。操作步驟 ： 稱取一定量樣品 (約含 20毫克左右的氨基酸 )于燒杯中 (如為固體加水 50毫升 )，加 23滴指示劑，用 NaOH溶液滴定至淡藍(lán)色。再用 NaOH溶液滴定至淡藍(lán)色。氨基酸態(tài)氮 (％ ) = ( N) / W式中： N： NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液當(dāng)量濃度。 ：氮的毫克當(dāng)量。? 方法原理：從分析結(jié)果看，雙指示劑甲醛滴定法與亞硝酸氮?dú)馊萘糠?(此法操作復(fù)雜，不作介紹 )相近，單色滴定法稍偏低，主要因?yàn)閱沃甘緞┘兹┑味ǚㄊ且园被崛芤?PH值作為 麝香草酚酞的終點(diǎn)。 按下述公式計(jì)算。 N：標(biāo)準(zhǔn)堿液當(dāng)量濃度。． ：氮的毫克當(dāng)量。測(cè)定時(shí)樣品的顏色較深，應(yīng)加活性炭脫色之后再滴定216。 賴氨酸是各種谷物，食品中重要營(yíng)養(yǎng)成分之一 , 是人體需要的八種基本氨基酸中最重要的一種營(yíng)養(yǎng)成分（賴氨酸是一種必須的氨基酸），所以 ,也是 衡量食品質(zhì)量及改良谷物品種的主要指標(biāo)之一 。在絕大多數(shù)谷物中，賴氨酸是最缺乏的氨基酸，被稱為 “ 第一限制氨基酸 ” 。178。 前兩種方法共同缺點(diǎn)是操作手續(xù)繁長(zhǎng)費(fèi)時(shí)，還需要某些特殊的試劑。 DBL法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確 ,適用范圍廣 ,適用于各種谷物及食品的分析 ,被定為國(guó)標(biāo)方法 。 取相同的另一份樣品 ,先用丙酸酐作為掩蔽劑將賴氨酸的ε 氨基掩蔽 ,然后再與 AO12染料反應(yīng) ,所得染料的結(jié)合量只是組氨酸和精氨酸二者之和， 根據(jù)兩次染料結(jié)合量 （ DBC） 的差值 ,即可算出該樣品中蛋白質(zhì)的賴氨酸 。O234。234。e—NH2+ O234。丙酰 采用 過(guò) 60目的樣品216。216。216。 丙?；磻?yīng)和染料結(jié)合反應(yīng)，一般在 1830℃ 。 ?；磻?yīng)時(shí)間與溫度有關(guān)，室溫 25℃ 以上，?；磻?yīng)很迅速； 2025℃ 之間，一般 10min為宜； 15℃ 以下，一般30min。 對(duì)于 賴氨酸含量較高的豆粕、油料種子、水稻來(lái)說(shuō)，染 料結(jié)合時(shí)間應(yīng)為 2h，其它 1h，以
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