基因工程第二章工具酶-在線瀏覽
2025-03-20 07:36本頁面
【正文】 、甲基化酶 三、分子克隆過程中所需要的另一些酶 Lurva和 Human（ 1952）以及 Bertani和 Weigle（ 1953）發(fā)現(xiàn)了噬菌體 λ的限制作用 各種細菌都能合成一種或幾種順序?qū)Ｒ坏暮怂醿?nèi)切酶。這些酶切割 DNA的雙鏈，因為它們的功能就是切割 DNA， 限制外源性DNA存在于自身細胞內(nèi) ，所以稱這種核酸內(nèi)切酶為限制酶。 目前，從各種生物中分離出的限制性內(nèi)切酶已接近 200種，其中80多種是切割 DNA雙鏈?，F(xiàn)在通用的命名原則是： 屬名 種名 株名 如果同一菌株中有幾種不同的內(nèi)切酶時，則分別用羅馬數(shù)字Ⅰ 、 Ⅱ 、 Ⅲ …… 來代表。甲基化酶同限制性內(nèi)切酶具有完全相同的識別順序。 DNA 甲基化酶普遍存在于原核和真核生物中，能將 S腺苷甲硫氨酸上的甲基轉(zhuǎn)移到腺嘌呤或者是胞嘧啶上。大多數(shù)實驗室使用的大腸桿菌包括三種位點特異性的 DNA 甲基化酶。 由 dcm 基因編碼的 Dcm 甲基化酶，能在 CCAGG 和 CCTGG 序列內(nèi)部的胞嘧啶 C5 位置上甲基化。 (1) 原核生物ＤＮＡ甲基化 如果限制性內(nèi)切酶的識別位點是從表達 Dam或 Dcm 甲基化酶的菌株中分離而得，并且其甲基化識別位點與內(nèi)切酶識別位點有重疊，那么該限制性內(nèi)切酶的部分或全部酶切位點有可能不被切割。 菌株中的 DNA 甲基化
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