第十章基因工程技術(shù)育種-在線瀏覽
2025-02-27 22:28本頁面
【正文】 A連接酶以 NAD+作為能量來源，動(dòng)物細(xì)胞和噬菌體的連接酶則以 ATP作為能量來源。 ● 轉(zhuǎn)染 (transfection):指病毒及其重組子導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程 . ● 轉(zhuǎn)導(dǎo) (transduction):指噬菌體及其重組子導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程 轉(zhuǎn)化 (1)氯化鈣法 ● 1970年 ,大腸桿菌經(jīng)過氯化鈣適當(dāng)處理及短暫熱休克之后 ,便能吸收 λ 噬菌體 DNA。 (2)電穿孔法 電穿孔法 (electroporation):是指在一個(gè)較大的電脈沖短暫破壞細(xì)胞膜的脂質(zhì)雙層，從而允許 DNA等分子通過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞，而后細(xì)胞膜快速?gòu)?fù)原，保持細(xì)胞的完整。 ? 轉(zhuǎn)化子的鑒定 ? 轉(zhuǎn)化子的外源基因表達(dá) ★ 4. 基因工程的應(yīng)用 (一 ) 基因工程工業(yè) (二 ) 植物基因工程 (三 ) 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 (四 ) 基因治療 ◆ 胰島素的人工生產(chǎn) ◆ 植物基因工程 根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物轉(zhuǎn)化 ◆ 植物基因轉(zhuǎn)化：是指將外源基因轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞內(nèi)、并整合到植物基因組中穩(wěn)定遺傳和表達(dá)的過程。 ◆ 例如，利用轉(zhuǎn)基因羊大量表達(dá)人類的抗胰蛋白酶。 ◆ 基因治療 ◆ 利用基因工程技術(shù)，將特異基因?qū)氩⒄系骄哂羞z傳缺陷的患者的基因組中，以治療遺傳疾病的方法，通常叫做基因治療 (gene therapy)。 第二節(jié) 魚類基因工程 以魚類為研究對(duì)象，應(yīng)用基因工程技術(shù)于魚類遺傳育種和海水魚類資源開發(fā)研究的一門應(yīng)用性，技術(shù)強(qiáng)的分支學(xué)科。 進(jìn)入上世紀(jì) 90年代，我國(guó)水產(chǎn)品總量已躍居世界首位，水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量超過捕撈產(chǎn)量，水產(chǎn)業(yè)的發(fā)展由捕撈型轉(zhuǎn)向增養(yǎng)型。相比貝類和蝦類養(yǎng)殖，海水魚類的養(yǎng)殖發(fā)展較慢。其次海水魚的遺傳育種和全人工繁殖育苗問題尚未徹底解決，育苗成活率較低。 ? 篩選適用海水魚類基因克隆和表達(dá)的載體及表達(dá)體系。 1. 海水魚類基因的分離和克隆 基因的分離包括構(gòu)建基因文庫(kù)和從基因文庫(kù)中篩選分離目的基因兩大步驟。 早在 1957年， Scholander等人首次觀察和研究了這些魚類的抗凍特性。 此后， DeVries等人從南極魚血清中分離和分析了這種生物大分子，發(fā)現(xiàn)它們是一類有特殊化學(xué)結(jié)構(gòu)的糖蛋白，稱為抗凍糖蛋白（ AFGP）。 他們從產(chǎn)自北大西洋沿岸海域的美洲大綿鳚 、 冬鰈和杜父魚中分離出 3種類型的抗凍蛋白 （ AFP） 。 用這幾種抗凍蛋白基因構(gòu)建的各種表達(dá)重組體已經(jīng)成功地應(yīng)用于轉(zhuǎn)抗凍蛋白基因魚類的研究和基因工程菌表達(dá)生產(chǎn)抗凍蛋白的應(yīng)用研究。 魚類轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究始于淡水魚。他們將 小鼠金屬硫蛋白啟動(dòng)子 人生長(zhǎng)激素基因組體（ mMThGH） 導(dǎo)入金魚受精卵中，獲得
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