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基因工程體外重組(帶動(dòng)畫)-在線瀏覽

2025-02-08 17:51本頁面
  

【正文】 NA的體外重組 HindIII EcoRI HindIII EcoRI 對(duì)載體酶切 HindIII EcoRI 對(duì)基因酶切 質(zhì)粒載體的定向重組 堿性磷酸酶? 避免了目的基因正反向插入 生命科學(xué)學(xué)院 2. 平頭末端連接 第一節(jié) DNA的體外重組 生命科學(xué)學(xué)院 平末端 平末端 SmaI限制酶 第一節(jié) DNA的體外重組 生命科學(xué)學(xué)院 T4 DNA連接酶雖然能連接平末端,但效率很低,只有粘性末端的 1%。第六章 DNA重組的操作 基因工程 生命科學(xué)學(xué)院 外源 DNA 載體 DNA 重組分子 擴(kuò)增或表達(dá) 表達(dá) 連接 轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo) 電穿孔或顯微注射 原核細(xì)胞 真核細(xì)胞 受體細(xì)胞 ? 生命科學(xué)學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 限制酶 — 分子剪刀 限制酶 — 分子剪刀 連接酶 — 分子膠水 重組 DNA分子 粘性末端連接效率最高! 生命科學(xué)學(xué)院 黏性末端 黏性末端 粘性末端的連接 生命科學(xué)學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 1. 粘性末端連接 創(chuàng)造互補(bǔ)粘性末端的方法有哪些? 同種酶 同尾酶 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 ( 1)兩端具有相同粘末端的 DNA分子之間的連接 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 堿性磷酸酶 :去掉其 5’末端的磷酸基,以防質(zhì)粒 DNA的自身環(huán)化 。 注意: 目的基因正反向插入; 載體與多個(gè)目的基因片段重組。 5’端與 3’端并列靠近的時(shí)間太短,不容易被連接酶連接。
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