【正文】 組 分 樣 品分離 為單 個 組 分。填充柱：內徑 2~6mm，柱 長 ~10m，相 對較 短，分離效率 較 低。4. 溫控系 統(tǒng) 譜儀 器 簡 介溫度是色 譜 分離條件的重要 選擇 參數(shù)；氣化室、分離室、 檢測 器三部分在色 譜儀 操作 時 均需控制溫度；氣化室：保 證 液體 試樣 瞬 間 氣化；檢測 器：保 證 被分離后的 組 分通 過時 不在此冷凝；分離室：準確控制分離需要的溫度。 氣相色 譜 與 質譜 、光 譜 等 聯(lián) 用，既充分利用色 譜 的高效分離能力，又利用了 質譜 、光 譜 的高 鑒別 能力，加上運用 計 算機 對 數(shù)據(jù)的快速 處 理和 檢 索， 為 未知物的定性分析開辟了一個廣 闊 的前景。定性分析（ 1）利用 保留 值 的定性分析① 利用已知 純 物 質對 照定性 。如果 樣 品 較 復 雜 ，可在未知混合物中加入已知 純 物質 ，通 過 未知物中峰的 變 化，來確定未知物中成分。 實驗證 明，在一定柱溫下，同系物的保留 值對 數(shù)與分子中的碳數(shù)成 線 性關系，即 為 碳數(shù) 規(guī) 律 ；在同一族的具有相同碳數(shù)的異構體的保留 值對 數(shù)與其沸點成 線 性關系，即 為 沸點規(guī) 律 。利用保留 值 定性， 樣 品和 純 物 質 的分析條件必 須 一致。因此，利用相 對 保留 值 定性比直接用保留 值 定性更 為 方便、可靠。⑤ 雙柱、多柱定性不同物 質 在同一色 譜 柱上可能具有相同的保留 值 ，用兩根或多根不同極性的色 譜 柱 進 行分析，考察 樣 品的 純 物 質 保留 值 的 變 化作 為 定性依據(jù)。 譜 定性與定量分析定量分析 在氣相色譜法中的定量分析就是根據(jù)色譜峰的 峰高或峰面積 來計算樣品中各組分的含量。 譜 定性與定量分析（ 1） 外 標 法 已知 濃 度的 標 準 樣 品與待 測樣 品在完全相同的條件下 進行色 譜 分析，以兩者的峰高或峰面 積 的比 較計 算 樣 品的含量，有直接 對 比法和 標 準曲 線 法。 外 標 法 較為簡 便，不需要校正因子，但 進樣 量要求十分準確，操作條件也需 嚴 格控制。 譜 定性與定量分析 譜 技 術高效液相色譜法原理及分析1.3.2.液相色 譜 法的基本原理液相色 譜 的分 類定量分析方法概述高效液相色譜是利用溶質在兩相間分配系數(shù)、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質得以分離。168。168。168。 譜 原理 當混合物 進 入色 譜 柱后，就在固定相、流 動 相之 間不斷地 進 行分配平衡。固定相中存在量多的化合物，沖洗出柱子的 時間 就 長，反之 則 短。 譜 原理 譜 分 類按流 動 相和固定相特征分 為 正相色 譜 、反相色 譜按分離目的分 為 分析型、制 備 型按分離機理分 為 吸附色 譜 、分配色 譜 、離子交 換 色 譜 、凝膠色 譜等。流 動 相： 各種極性的洗脫 劑 用途： 非極性溶 劑 中、具有中等相 對 分子 質 量且為 非離子型的 試樣 。在色譜柱中，隨著流動相的移動，這種分配平衡需進行多次，造成各待測物的遷移速率不同，從而實現(xiàn)分離的過程。因此，根據(jù)流動相與固定相極性的差別程度，可將液液色譜分為正相分配色譜（流動相極性小于固定相極性，極性小的先流出，適于極性組分分離）和反相分配色譜（流動相極性大于固定相極性，極性大的先流出，適于非極性組分分離） 。但高效液相色譜固定液易流失，因此常用的只有幾種，按極性由高到低為： 3,339。 譜 分 類 譜 法固定相： 極性的有機基 團 ， CN、 NH2。 譜 分 類 譜 法分離機理 —— 疏溶 劑 作用理 論 用途： 主要用于分離非極性至中等極性的各 類 有機化合物反相色 譜 最常用的流 動 相及其沖洗 強 度如下：H2O＜甲醇＜乙 腈 ＜乙醇＜丙醇＜異丙醇＜四 氫呋 喃 譜 分 類離子交 換 色 譜 法原理： 不同待 測 離子 對 固定相 親 和力的差 別固定相 ：基 質 ：合成 樹 脂（聚苯乙 烯 ）、 纖維 素和硅膠表面 鍵合離子：陽離子和陰離子交 換樹 脂流 動 相 ： 一定 pH和 鹽濃 度的 緩 沖溶液用途 ： 適用無機離子、有機離子混合物的分離例如氨基酸、核酸、蛋白 質 等生物大分子。固定相： 化學惰性的多孔性材料，如聚苯乙 烯 凝膠、親 水凝膠、無機多孔材料。 常用流 動 相—— 四 氫呋 喃、甲苯、 氯 仿、二甲基酸胺和水 譜 分 類凝膠色 譜 法（又稱尺寸排阻色 譜 法）凝膠 過濾 色 譜 ： 以水或 緩 沖液作流 動 相主要適合于水溶性高分子的分離凝膠滲透色 譜 ： 以有機溶 劑 作流 動 相主要適合于脂溶性高分子的分離用途：特點：216。 相 對 分子 質 量差 別 必 須 大于 10％ 才能分離 譜 分 類凝膠色 譜 法（又稱尺寸排阻色 譜 法）凝膠的種 類 很多，按其原料來源可分 為 有機膠和無機膠。根據(jù)凝膠的 強 度又可分 為軟 膠、半硬膠和硬膠三大類 。按分離機理分 為 吸附色 譜 法、分配色 譜 法、離子色 譜法和凝膠色 譜 法四大 類 。 譜 分 類類 型 分離機理 主要分析 對 象及 應用 領 域吸附色 譜 吸附能、 氫鍵 異構體分離、族分離、制 備分配色 譜 疏水分配作用 各種有機化合物的分離、分析和制 備凝膠色 譜 溶 質 分子大小 高分子分離、分子量及其分布的 測 定離子交 換 色 譜 庫侖 力 無機離子、有機離子分析手性色 譜 立體效 應 手性異構體分離、藥 物 純 化親 和色 譜 生化特異 親 和力 蛋白、 酶 、抗體分離、生物和醫(yī) 藥 分析 譜 分 類 譜儀簡介HPLC儀器包括：p 高壓輸液系統(tǒng)： 儲液罐、吸濾器、高壓 輸液泵、 脫氣裝置 及梯度洗脫裝置p 進樣系統(tǒng)： 進樣器，進樣閥p 分離系統(tǒng)： 色譜柱，恒溫箱p 檢測系統(tǒng)： 檢測器p 記錄系統(tǒng)： 記錄裝置、色譜工作站 譜儀簡介液相色譜儀 譜儀簡介n 高效液相色譜儀流程圖高效液相色譜儀流程圖 譜儀簡介 分析前，選擇適