【正文】 pH 7 溶出度 pH 1 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 . . 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 Time (min) 0 2 4 6 0 5 10 15 20 25 Time (h) 0 2 4 6 0 5 10 15 20 25 胃酸正?；颊? 預(yù)測(cè)體內(nèi)血藥濃度 實(shí)測(cè)體內(nèi)血藥濃度 胃酸缺乏患者 不同廠家生產(chǎn)的 甲硝唑片 體外溶出度與體內(nèi)學(xué)藥濃度的相關(guān)性 A藥廠產(chǎn)品 B藥廠產(chǎn)品 0 1 2 3 4 5 6 7 0 10 20 30 40 Time (h) 0 1 2 3 4 5 6 7 0 10 20 30 40 Time (h) 年 輕 人 老 年 人 pH 兩不同藥廠生產(chǎn)的 地西泮片 體外溶出度試驗(yàn)與體內(nèi)血藥濃度的相關(guān)性 0 20 40 60 80 0 10 % dissolved pH 0 20 40 60 Time (min) A B 胃酸缺乏者 胃酸正常者 0 50 100 150 200 250 300 350 0 2 4 6 Time (min) Concentration (ng/ml) 0 2 4 6 Time (min) Time (min) A B ? 日本規(guī)定： 如不一致、 BE試驗(yàn)受試者必須酌情進(jìn)行針對(duì)性選??！ 故日本 《 橙皮書 》 中，在已結(jié)束的 586個(gè)品種中、約有 10個(gè)品種為兩套溶出曲線。 因 BE試驗(yàn)是采用年輕男性、是人體的最佳狀態(tài)、這也是 BE試驗(yàn)的局限性所在！ 而原研制劑在臨床階段經(jīng)過(guò)大量病例驗(yàn)證。 (1)已幫助眾多企業(yè)尋找到這種差異； (2)越來(lái)越多的企業(yè)開(kāi)始進(jìn)行二次開(kāi)發(fā)； (3) 介紹今年“國(guó)家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)工作”結(jié)果； (4) USP七種溶出度試驗(yàn)法的由來(lái)。 也許在低轉(zhuǎn)速、或是在其他介質(zhì)中，差異就會(huì)顯示出來(lái)了！ 兩個(gè)不同藥廠生產(chǎn)的 氟芬那酸膠囊 pH 介質(zhì)中，槳板法、 100轉(zhuǎn) 血 藥 濃 度 不相關(guān) 造成以上不相關(guān)的原因： 也許是生物等效性試驗(yàn)的受試者體內(nèi)環(huán)境正常；對(duì)于體內(nèi)環(huán)境非正常者，尤其是胃酸缺乏者，差異就會(huì)顯示出來(lái)了！ 0 20 40 60 80 100 0 60 120 180 Time (h) % dissolved C D 0 2 4 6 8 10 0 2 4 6 8 Time (h) Concentration (ug/ml) Capsule C Capsule D 對(duì)原研品 /參比制劑 樣品批號(hào)的遴選 ? 原則上從市場(chǎng)上購(gòu)買來(lái)不同時(shí)間點(diǎn)的不同批號(hào)，分別測(cè)定，觀測(cè)溶出曲線波動(dòng)情況。 對(duì)仿制制劑樣品的要求 ? 生產(chǎn)規(guī)模 10萬(wàn)單位或今后最大生產(chǎn)規(guī)模的 1/10。 ? 選用的樣品應(yīng)在重量 /裝量差異所規(guī)定范圍的 1/2內(nèi) 。 ＃與美國(guó)作法有所不同：美國(guó)統(tǒng)一采用 、 、 。 (2) “溶解度 pH值曲線”繪制 （極其簡(jiǎn)單、又極為重要） 。 (3)如該藥物 pKa177。 。 (4) 無(wú)論何種制劑都不建議采用 ；如確有必要，應(yīng)提供充足理由。 如何運(yùn)用溶出曲線剖析原研品的實(shí)施步驟 ? 講述如何測(cè)定（日本橙皮書中收載）。 ? 絕非用該數(shù)據(jù)，根據(jù)漏槽條件來(lái)推算溶出介質(zhì)中添加表面活性劑的濃度！ “溶解度 pH值曲線”測(cè)定意義 漏漕條件的定義：溶出介質(zhì)體積要大于溶解藥物主成分（該量為制劑最大規(guī)格量）所需體積的至少3倍量，以保證藥物溶出不受其溶解性的顯著影響。 漏槽條件對(duì)溶出度試驗(yàn)的意義 現(xiàn)今，溶出介質(zhì)體積已固定、通常選用900~1000ml。 漏槽條件對(duì)溶出度試驗(yàn)的意義 ? 溶出介質(zhì)配制方法： (1) 各國(guó)不盡相同、建議根據(jù)原研制劑生產(chǎn)廠商的國(guó)別而定。 (2) 表面活性劑加入時(shí)，一定采用煮沸法配制，絕對(duì)不要采用超聲法（鹽的溶解方式亦如此）。 在日本橙皮書中，就羅列了該藥物在各種溶出介質(zhì)中的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。 當(dāng)連續(xù)兩點(diǎn)溶出率均達(dá) 90%（緩控釋制劑為85%）以上、且差值在 5%以內(nèi)時(shí)，試驗(yàn)則可提前結(jié)束。 如何運(yùn)用溶出曲線剖析原研品的實(shí)施步驟 ? 對(duì)原研制劑的剖析： 裝置與轉(zhuǎn)速 闡述故有錯(cuò)誤理念 片劑：槳板法 /50轉(zhuǎn)起始。 溶出介質(zhì) 不建議采用小杯法， 一律采用 900ml或 1000ml。 如何運(yùn)用溶出曲線剖析原研品的實(shí)施步驟 ? 對(duì)原研制劑的剖析： 試驗(yàn)參數(shù)的放寬 ? 在某溶出介質(zhì)中最終溶出量未達(dá)要求、無(wú)法進(jìn)行比較時(shí)，首選加表面活性劑方式：濃度以 ％ (w/v)為起點(diǎn)、按照 5級(jí)別逐步增加，不建議采用 %以上濃度。 有機(jī)溶劑：對(duì)比剖析時(shí)可加入，但最終擬定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)決不允許添加。 ? 仿制制劑在 15分鐘內(nèi)平均溶出率也達(dá) 85%以上。 體外溶出曲線比較的具體操作 ? 原研制劑曲線類型 參比制劑在 15~30分鐘內(nèi)溶出量達(dá) 85%以上時(shí) ? 采用 f2因子比較時(shí)，比較 5或 1 30分鐘三個(gè)時(shí)間點(diǎn)。 15%范圍內(nèi)； 參比制劑在 30分鐘后達(dá) 85%以上時(shí) 采用 f1和 f2因子比較法。 1 0 01???????n1n1tttttRTRfF2 因 子 計(jì) 算 公 式 Rt和 Tt分別表示兩制劑在第 n個(gè)取樣點(diǎn)的平均累積溶出率。 (2) 普通速釋制劑選取 3~5個(gè)、緩控釋制劑選取 4~6個(gè)時(shí)間點(diǎn)。 (3) 以上各時(shí)間點(diǎn)溶出量間隔盡可能相近，這也是之前取樣時(shí)間點(diǎn)較為密集的原因所在。 若不符合，應(yīng)從儀器適用性予以考慮解決，如 增加轉(zhuǎn)速 。 對(duì)于仿制制劑 如 各時(shí)間點(diǎn) 變異系數(shù)超出規(guī)定，說(shuō)明 制劑工藝 /處方篩選尚待優(yōu)化、工藝尚未穩(wěn)定。 f2因子 數(shù)值與溶出量差值的關(guān)系 體外溶出曲線比較的具體操作 比較時(shí)間點(diǎn)溶出量平均差異 2% 5% 10% 15% 20% ?2因子臨界值 83 65 50 41 36 若直接觀察，各時(shí)間點(diǎn)差異均在 10%以內(nèi)，則可斷定 ?2因子大于 50。 ? 當(dāng)原研制劑具有延遲釋放現(xiàn)象時(shí) （現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)至少 10%原研品有該現(xiàn)象） ，仿制制劑亦應(yīng)具有該現(xiàn)象；兩者平均延遲時(shí)間差不應(yīng)超出 3~5分鐘，各自減去延遲時(shí)間后再行溶出曲線比較。 體外溶出曲線比對(duì)的附加要求 ? 為防止劑量?jī)A瀉（ dosedumping）現(xiàn)象發(fā)生 日本 在最具區(qū)分力的溶出介質(zhì)中，還要增加 100或 200 轉(zhuǎn)比較研究；腸溶制劑還要增加 5倍后的比對(duì)研究。 → 觀測(cè)仿制制劑能否像原研制劑那樣收放自如！ 某一原研制劑 添加不同有機(jī)溶劑時(shí)的溶出曲線 某一仿制制劑 添加不同有機(jī)溶劑時(shí)的溶出曲線 紅色為原研制劑；藍(lán)色為仿制制劑 (11) 投樣方式（槳板法） 采用每間隔固定時(shí)間（如 30秒）投樣。第 1份樣品抽取 10~20ml后，過(guò)濾使濾膜吸附飽和，并將濾液沿溶出杯壁緩慢注回，再抽取所需體積（如 HPLC法、1~2ml即可）即可，其后所有樣品無(wú)需再棄去初濾液，直接收集。一者可排除輔料 /薄膜衣 /腸溶衣 /膠囊殼等易對(duì)紫外測(cè)定產(chǎn)生干擾的情況；二者，由于線性范圍寬，樣品均可直接進(jìn)樣測(cè)定，省略了紫外測(cè)定要求吸收度值在 ~、樣品需稀釋的繁瑣步驟，大大提高了工作效率。如此，雖然有雜質(zhì)與主成分未能分離的擔(dān)憂，但考慮到樣品已被稀釋 1000倍（溶出介質(zhì)體積通常為 900~1000ml），在此條件下，存在的微量雜質(zhì)響應(yīng)值已微乎其微，即便有所表現(xiàn)，其影響對(duì)于結(jié)果而言亦是完全在誤差范圍之內(nèi)，可忽略不計(jì)。色譜柱最高承受溫度為 80℃ ，在60℃ 以下操作沒(méi)有問(wèn)題。 (6) 進(jìn)樣量可依據(jù)對(duì)照品溶液的精密度予以靈活調(diào)節(jié)。且對(duì)于小規(guī)格制劑，為提高精密度，縮短保留時(shí)間，使色譜峰 “變細(xì)變尖（銳） ”更為重要。 如何準(zhǔn)確、快捷、高效地測(cè)定大批量溶出度樣品 (7) HPLC法測(cè)定時(shí)取樣量 1~2ml即可。 因?yàn)樵谌狱c(diǎn)位置處，吸取這么小體積攜帶出輔料的可能性極小，即便有少量存在，靜置后使其沉淀，就不會(huì)影響到測(cè)定，更不會(huì)堵塞色譜柱。 (9) 如采用超高速液相測(cè)定，效果自然更好！但由于色譜柱粒徑較小，樣品液若不過(guò)濾，恐堵塞色譜柱，建議試驗(yàn)時(shí)驗(yàn)證后予以酌情考慮。 本人曾在 20分鐘內(nèi)完成 200個(gè)樣品的數(shù)據(jù)處理（得到溶出量），每一溶出量數(shù)據(jù)直接從軟件中拷貝出、粘貼至 Excel軟件中、畫出溶出曲線圖的全部過(guò)程。 如何準(zhǔn)確、快捷、高效地測(cè)定大批量溶出度樣品 “ 日本 薬品品質(zhì)再評(píng)価工程” 針對(duì)的藥物類型 該理論主要應(yīng)用于生物藥劑學(xué)分類系統(tǒng)里的 Ⅱ 和Ⅳ 類藥物。 截止目前、該項(xiàng)工程基本技術(shù)，共進(jìn)行了 857個(gè)品種的溶出度校準(zhǔn)曲線繪制工作。 ? 原創(chuàng)廠先行測(cè)定本廠產(chǎn)品多條溶出曲線，報(bào)送給國(guó)家；經(jīng)專家與該企業(yè)協(xié)商溝通后確定并予以公布“標(biāo)準(zhǔn)四條溶出曲線” 。 ? 仍未果、文號(hào)撤銷！ 卡馬西平片的四條溶出曲線 槳板法、 75轉(zhuǎn)、在四種介質(zhì)中 ， 5分鐘和30分鐘時(shí)分別取樣測(cè)定，限度分別為不得過(guò) 60%和不得少于 70%。 2022年國(guó)家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)結(jié)果啟示 (一 ) 原研品 3個(gè)批號(hào) —— 完美制劑的完美表達(dá)！ 2022年國(guó)家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)結(jié)果啟示 (一 ) 國(guó)內(nèi)五家企業(yè)產(chǎn)品 4條溶出曲線！ 2022年國(guó)家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)結(jié)果啟示 (一 ) 國(guó)內(nèi)另六家企業(yè)產(chǎn)品 4條溶出曲線！ 法莫替丁片的四條溶出曲線 “錯(cuò)落有致”與“溶解度”相一致 闡述仿制藥意義！ 奧美拉唑腸溶片四條溶出曲線 pH＝ ～ 研究國(guó)內(nèi)幾乎無(wú)人去做！國(guó)產(chǎn)腸溶衣缺陷所在。 第二步： 四條溶出曲線與原研制劑（或公布出來(lái)）一致。（故 《 日本橙皮書 》 中極個(gè)別品種有兩套“標(biāo)準(zhǔn)四條溶出曲線”） 第三步：上市后的產(chǎn)品抽查采用多條溶出曲線評(píng)價(jià)。 ? 批間差異評(píng)價(jià)：均以繪制得到的原研制劑標(biāo)準(zhǔn)曲線為藍(lán)本，最終導(dǎo)致“質(zhì)量源于設(shè)計(jì)（簡(jiǎn)稱 QbD ）” 理念的形成！ 該規(guī)定如同“緊箍咒”，對(duì)企業(yè)生產(chǎn)提出了更高、更嚴(yán)謹(jǐn)?shù)囊螅?因溶出曲線自該樣品合法誕生之日起，便開(kāi)始伴隨，其必須保持恒定性與穩(wěn)定性！ （講述案例） ? “撬動(dòng)”了整個(gè)日本制藥行業(yè)和相關(guān)產(chǎn)業(yè)的全面發(fā)展 ! 對(duì)固體制劑溶出度的深入研究和嚴(yán)格要求 猶如“四兩撥千斤” 美國(guó) FDA/CDER屬下的仿制藥辦公室里的生物等效部，為提高仿制藥的內(nèi)在品質(zhì)、強(qiáng)化檢測(cè)的各項(xiàng)規(guī)范，也采取額同樣的做法，規(guī)定了一個(gè)最能反映內(nèi)在品質(zhì)的溶出介質(zhì)。（ by the Division of Bioequivalence, Office of Generic Drugs. ） 網(wǎng)址： Drug Name Dosage Form USP Apparatus Speed (RPMs) Medium Volume (mL) Remended Sampling Times (minutes) Date Updated Acarbose Tablet II (Paddle