第十六章基因工程和蛋白質(zhì)工程簡介-在線瀏覽
2024-09-11 13:26本頁面
【正文】 合成 cDNA探針 制備專一的抗體 沉淀核糖體分離 mRNA 用 Southern印跡法篩選 DNA文庫 基因或cDNA 第三節(jié) 核酸研究技術(shù)簡介 一、 DNA序列測定 二 、 基因文庫與 cDNA文庫 三 、 聚合酶鏈式反應(yīng) （ polymerase chain reaction, PCR） DNA測序的基本戰(zhàn)略 設(shè)法產(chǎn)生帶標記的不同長度的成套 DNA片段 ， 各帶有標記的片段起點相同 、 終點不同 ， 使待測的 DNA鏈中的相應(yīng)每個核苷酸處都有斷裂或終止 。 ?酶法 ?化學法 ?測序技術(shù)進展 酶法序列分析的原理 酶反應(yīng) 電泳方向 模板 CCGGTAGCAACT 3180。 GG 5180。 引物 dATPdCTPdGTPdTTP +ddATP dATPdCTPdGTPdTTP +ddTTP dATPdCTPdGTPdTTP +ddGTP dATPdCTPdGTPdTTP +ddCTP GGCCA GGCCATCGTTGA GGC GGCC GGCCATC GGCCATCGTTG GGCCATCG GGCCAT GGCCATCGT GGCCATCGTT A C G T AGTTGCTACC 3180。 TCAACGATGG 5180。 讀出模板互補序列 讀出模板序列 GGCCATCGTTGA GGCCATCGT GGCCATCGTTG GGCCATCGTT GGCCATCG GGCCATC GGCCA GGCCAT GGCC GGC DNA的Sanger測序法 (酶法 ) 讀出模板互補序列 dNTP 凝膠電泳 較大片段 較小片段 ddGTP ddATP ddCTP ddTTP 反應(yīng)混合物 Klenow酶 未知序列的單鏈 DNA 讀出待測序列 CTGACTTCGACAAAGAA 5180。 放射性標記的引物 TGTT A C T G ddG ddG ddG ddG GACTGAAGCTGTT 3180。 CTGACTTCGACAA 5180。 DNA的測序儀示意圖 puter analysis 凝膠中 DNA移動方向 樣品槽 激光器 輸入光學系統(tǒng) 成象透鏡 聚焦透鏡 高靈敏度相機 旋光鏡 /棱鏡組件 DNA的化學測序示意圖 反應(yīng)試劑 G反應(yīng)：硫酸二甲酯 G+A反應(yīng)：甲酸 T+C反應(yīng)：肼 C反應(yīng)： NaCl+肼 測序技術(shù)進展 同位素標記到熒光標記 ,平板電泳到毛細管電泳 多色熒光標記 毛細管電泳 單色熒光標記 平板電泳 同位素標記 平板電泳 A C G T A C G T 測序圖譜 T A TTG CAT TG TC
教學教案相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1