【正文】 加蓋密封，蒸氣消毒備用。在治療期間，除口服維生素C及維生素B2外，局部及全身均不再加用抗生素或其他特殊治療。療程最短5天，最長31天[7]。⑦麻疹并發(fā)肺炎： 大青葉、地錦草（或金銀花）、野菊花、海金沙各15g。⑧流行性腮腺炎 用大青膏即大青葉100g,黃連，大黃，黃柏各50g，水煎3次，取濾液；冷沉24小時，取上清液，相對密度。用香油350g，加熱，加白凡士林400g，熔化，油溫66~70℃，家上述稠膏，攪拌30min。結(jié)果：用大青膏之戀流行性腮腺炎100例，治愈93例[7]。制法與用量:取鮮大青木葉500g，冷水洗凈、放石臼內(nèi)用木棍搗爛，紗布過濾，絞汁內(nèi)服(不得煎煮)，上為一次量。 黃酮類化合物（flavonoids）是在植物中分布最廣的一類物質(zhì)，幾乎每種植物體內(nèi)都有，它們常以游離態(tài)或與糖結(jié)合成苷的形式存在，它們對植物的生長發(fā)育，開花，結(jié)果以及抵御異物的侵入起著重要的作用。許多植物的葉、皮、根和果實中都含有一定量的黃酮類化合物，它們是一類以 2苯基色原酮為母核的多酚化合物，結(jié)構(gòu)中含有酮基，天然黃酮類化合物母核上常有OH，OCH3等取代基，由于這些助色集團(tuán)的存在使該類化合物多顯黃色，故稱之。基本碳架為： 　 　 圖15⑴一般性質(zhì)黃酮類化合物大多為結(jié)晶固體，少數(shù)（如黃酮苷，花色苷及苷元）為無定形粉末，且熔點高。苷類結(jié)構(gòu)中因含有糖分子，故均有旋光性，且多為左旋。①可見光下具有交叉共軛系統(tǒng)的黃酮，黃酮醇及其苷顯灰黃～黃色，查耳酮顯黃～橙色，而二氫黃酮（醇）不具交叉共軛系統(tǒng)一般不顯色而顯色，共軛鏈短的異黃酮顯微黃色。②在紫外光下：黃酮，黃酮醇及其苷的3位無取代時顯綠色熒光；若3位有OH取代，顯亮黃或黃綠熒光；若3位OH甲基化或糖苷化，則顯暗綠棕色熒光。⑵溶解度溶解度因結(jié)構(gòu)和存在狀態(tài)（苷元，單糖苷，二糖苷或三糖苷等）不同而有很大差異，一般有如下規(guī)律。其中，黃酮、黃酮醇、查耳酮等平面型分子，因堆砌較緊密，分子間引力較大，故更難溶于水。黃酮類化合物的輕基糖苷化后，水溶解度即相應(yīng)加大，而在有機(jī)溶劑中的溶解度則相應(yīng)減小。但難溶于或不溶于苯、氯仿等有機(jī)溶劑中。⑶酸性與堿性①酸性大多數(shù)黃酮類化合物因分子中多具有一個或幾個酚羥基，故顯酸性，可溶于堿性水溶液、毗陡、甲酞胺及二甲基甲酸胺中。②堿性Y毗喃環(huán)上的1氧原子，因有未共用電子對，故表現(xiàn)微弱的堿性，可與強(qiáng)無機(jī)酸、鹽酸等生成鹽，但生成的鹽極不穩(wěn)定，加水后即可分解。某些甲氧基黃酮溶于濃鹽酸中顯深黃色，且可與生物堿沉淀試劑生成沉淀。各類黃酮化合物的顯色反應(yīng)主要有：還原試驗（HClMg,HClZn，NBH4）；金屬鹽類試劑的配位反應(yīng)，如與鋁鹽，鉛鹽和鍶鹽試劑反應(yīng)；硼酸顯色反應(yīng)；堿性顯色反應(yīng)。迄今為止，在植物中已發(fā)現(xiàn)近10000種結(jié)構(gòu)獨特的黃酮類化合物。此外，在臨床應(yīng)用上，許多含有黃酮類化合物的植物作為中藥已有上千年的應(yīng)用歷史。⑴抗氧化活性人類心腦血管疾病，腫瘤，老年癡呆，震顫麻痹癥等疾病幾乎都與氧自由基有關(guān)。而多數(shù)酚類物質(zhì)中的黃酮類化合物因其在自然界分布廣泛，抗氧化活性強(qiáng)，毒副作用低而備受關(guān)注。水飛薊素通過阻止或抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，從而有效的降低由Fe2+/Vc引起的小鼠肝微粒體內(nèi)之至過氧化產(chǎn)物丙二醛（MDA）的濃度，或減少急性乙醇中毒內(nèi)MDA含量及光化學(xué)反應(yīng)。合成抗氧化劑如沒食子酸丙醋(PG)、丁基輕基茵香醚(BHA)、二丁基輕基甲苯(BHT)、叔丁基對苯二酚(TBHQ)等。由于食品類抗氧化成分的種類和應(yīng)用都有限，而合成抗氧化劑已被證實有致癌作用，其安全性備受質(zhì)疑，與此同時，從天然產(chǎn)物中尋找更加安全有效的抗氧化劑，成為國內(nèi)外越來越多學(xué)者的共同目標(biāo)。自由基由于結(jié)構(gòu)中苯環(huán)的共扼、位阻和硝基吸電子作用，是一種很穩(wěn)定的以氮為中心的自由基，其孤對電子在517nm附近有強(qiáng)吸收(其甲醇水溶液顯深紫色)，當(dāng)有供氫能力的抗氧化劑存在時，孤對電子被配對，吸收消失或減弱，且吸光度變小的程度與自由基被清除的程度呈線性關(guān)系，因而可進(jìn)行定量分析。自由基，則提示它具有清楚體內(nèi)其它穩(wěn)定性不如DPPH所以，可以通過檢測DPPH⑵抗腫瘤活性 抗腫瘤作用為黃酮類化合物的另一主要作用，目前認(rèn)為黃酮類化合物抗腫瘤主要表現(xiàn)為對腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用并可促使腫瘤細(xì)胞凋亡，還可抑制細(xì)胞信號傳導(dǎo)過程中的酪氨酸蛋白激酶、蛋白激酶等相關(guān)酶的活性，并具有抗炎、抗氧化作用和促進(jìn)抑癌基因表達(dá)而抑制癌基因表達(dá)的作用[16] 。孫穎楨等[18]從細(xì)葉卷柏中發(fā)現(xiàn)5種雙黃酮類化合物對人肝癌細(xì)胞Bel一7402具有顯著抑制作用，抑制強(qiáng)度與時間、濃度呈正相關(guān)。逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞多藥耐藥(MDR)在臨床上已成為醫(yī)務(wù)工作者醫(yī)療工作中的一個難題。其主要原因為Pgp、BCRP，MRP等多藥耐藥介導(dǎo)蛋白，它們的共同點都是依賴ATP供能產(chǎn)生了“藥泵”作用，而黃酮類化合物能夠與這些介導(dǎo)蛋白的連接位點結(jié)合，競爭性抑制ATP的供能作用，從而抑制“藥泵”作用，增加腫瘤細(xì)胞的受藥水平[19] 。目前有研究表明，黃酮類化合物對參與炎癥過程的某些酶具有特異選擇性，特別是對蘇安氨酸氨酸蛋白激酶的選擇性更為明顯。⑷肝臟保護(hù)作用活性盧新華等[20] 經(jīng)實驗表明苦菜總黃酮對四氯化碳、乙醇所致肝損傷有明顯保護(hù)作用，提示可能與苦菜總黃酮減少肝臟GSH 耗竭，抑制肝脂質(zhì)過氧化作用有關(guān)。在體外實驗中，燈盞細(xì)辛黃酮Z1(50ugml1)能劑量依賴性地抑制細(xì)胞內(nèi)膠原合成，說明黃酮類化合物對肝纖維化的治療具有廣闊的研究前景[22]。孫豐雷等[23] 報道黃酮類化合物保護(hù)β細(xì)胞的主要作用機(jī)制為抗氧化、抗炎等，并通過刺激胰島素釋放、增加胰島素敏感性、抑制a糖苷酶、增加外周糖的利用等機(jī)制而起到降低血糖的作用。賈洪娟等[24]也報道蕎麥花總黃酮對STZ所致的II型糖尿病大鼠心肌的損傷具有抑制作用。甲氧基異黃酮)、大豆素(daidzein)等異黃酮類化合物均有雌性激素樣作用[25] 。于學(xué)慧等[26]對黃酮類化合物對絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥運用大豆異黃酮治療對子宮及卵巢副作用的研究中發(fā)現(xiàn)，大豆異黃酮在適當(dāng)劑量下對使實驗大鼠及犬的子宮及卵巢不顯示雌激素樣副作用。⑹對心腦血管系統(tǒng)的作用活性隨著社會生活水平的改善，動脈粥樣硬化的發(fā)病率也開始逐漸升高。冠心病發(fā)病的主要機(jī)制為心肌氧供求失衡。趙宏等[29] 在觀察龍眼參黃酮對開胸結(jié)扎左冠狀動脈前降支(LAD)犬心外膜電圖(EECG)和心肌酶的影響的實驗中發(fā)現(xiàn)龍眼參黃酮可減少缺血程度(ΣST)，降低缺血范圍( NST)，降低血清中磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脫氫酶(LDH)的活性，降低血清中游離脂肪酸(FFA)、過氧化脂質(zhì)(LPO)含量，提高超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物(GSHPx)、一氧化氮(N0)、一氧化氮合酶(NOS)的活性。 報道銀杏總黃酮與銀杏總內(nèi)酯配伍可改善貓心肌缺血的癥狀，保護(hù)缺血心肌細(xì)胞，抑制心外膜心電圖ST段抬高。此外，TFS對AMI犬亦有相似作用。在對梗死后心肌再灌注損傷的研究中，李紅月等[33]發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物可對抗梗死后再灌注性心律失常、改善梗死心肌舒縮功能、調(diào)整梗死心肌能量代謝、減少梗死心肌細(xì)胞凋亡、減少梗死心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變等功能；并且可適當(dāng)擴(kuò)張冠狀動脈，改善受損心肌的血流供應(yīng)；另外還能抗血小板的積聚，減少再灌注時對心肌細(xì)胞的損害。目前發(fā)現(xiàn)一些黃酮類化合物有明顯的降血壓作用，如淫羊藿總黃酮(TFC)對大鼠血清中內(nèi)皮素有抑制作用，一氧化碳含量明顯降低，提示TFC擴(kuò)張血管，降低血壓作用與阻斷β1受體及降低血漿內(nèi)皮素含量有關(guān)[34]。胡國燦等[36]報道清清尤清牌紅曲黃酮片可有效降低血壓，并對頭痛、眩暈、心悸、失眠等癥狀有明顯改善作用。佟繼銘等[38] 也報道黃芩莖葉總黃酮對實驗性心率失常有顯著拮抗作用。黃酮類化合物可降低血脂，有益于腦血管疾病的預(yù)防。楊娟等[41] 予線栓法復(fù)制大鼠大腦中動脈栓塞模型(MCAO)，予淫羊藿總黃酮給藥后與對照組對比后發(fā)現(xiàn)，藿總黃酮有保護(hù)血腦屏障，減少毛細(xì)血管通透性，提高腦組織對腦缺血及再灌注的耐受性，從而達(dá)到對腦細(xì)胞的保護(hù)作用。⑺其他功能 研究表明，黃酮類化合物還具有鎮(zhèn)痛、止咳、抑菌抗病毒、解痙鎮(zhèn)痛 、利膽、抗衰老、防治骨質(zhì)疏松癥、促進(jìn)體外成骨細(xì)胞增殖及分化成熟等作用等作用。 綜上所述，黃酮類化合物廣譜的藥理活性，對心腦血管系統(tǒng)、抗腫瘤方面、內(nèi)分泌系統(tǒng)等相關(guān)疾病都有顯著療效，使黃酮類化合物也成為了植物化學(xué)及醫(yī)藥保健領(lǐng)域研究的熱點之一。這些進(jìn)展必將產(chǎn)生重大的影響，提高中醫(yī)藥的國際社會地位，叩開中醫(yī)藥現(xiàn)代化的大門，為實現(xiàn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化及促進(jìn)祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)發(fā)展做出貢獻(xiàn)。而其提取是根據(jù)相似相溶原理進(jìn)行的，影響黃酮類化合物提取的控制因素是黃酮類化合物在所選用溶劑中的溶解度大小以及向溶劑擴(kuò)散的難易程度。黃酮類化合物成苷后，在有機(jī)溶劑中的溶解度減小，相應(yīng)地在水中的溶解度就增加，且糖鏈越長，在水中的溶解度就越大。由于黃酮結(jié)構(gòu)和來源的不同，溶解特性差異也很大，因此應(yīng)根據(jù)其極性和水溶性的大小來選擇合適的溶劑進(jìn)行提取。關(guān)于黃酮類化合物的提取方法，近年來發(fā)展得很快，不同的方法得到的提取率差別較大，生產(chǎn)成本上也有差別。提出的新的思想主要有超濾法、微波輔助萃取法、超聲波提取法、超臨界流體萃取法、酶提取法等。⑴溶劑提取法 黃酮類以及極性較大的苷元（如雙黃酮，橙酮，查耳酮等），一般以丙酮，甲醇，乙醇來提取，而利用黃酮類化合物與混入雜質(zhì)的極性不同，選用不同溶劑進(jìn)行萃取則可達(dá)到精制純化的目的，如可用石油醚除去一部分酯溶性雜質(zhì)（葉綠素，胡蘿卜素等），或加入多倍量濃醇，以沉淀形式去除蛋白質(zhì)，多糖等水溶性化合物。⑵堿提酸析法黃酮類物質(zhì)（除花色素外）雖然因為交叉共軛系統(tǒng)和苷上糖鏈的存在有一定的極性，但在水中較難溶解，而大多數(shù)具有酚羥基，因此可以用堿性水或堿性烯醇浸出，經(jīng)酸化后得出黃酮類物質(zhì)。氫氧化鈉水溶液的浸出能力高，但雜質(zhì)較多，純化不便。因此，可以根據(jù)提取物的性質(zhì)選擇不同的堿性溶液。 此外，在應(yīng)用堿提酸析方法提取黃酮類化合物時，溫度和堿度不宜過高，以免黃酮類化合物母核發(fā)生裂解。⑶微輔助萃取法 微波是指波長從 1103m至lm之間，頻率在300MHz至 300000MHz的電磁波，介于紅外線和無線電波之間。極性分子受到微波輻射后，通過分子偶極以每秒數(shù)十億次的高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生熱效應(yīng)，其對微波的敏感性較非極性分子強(qiáng)。微波加熱是直接穿透容器，物料整體被加熱，無溫度梯度，物料內(nèi)外升溫均勻，加熱速度快、無滯后效應(yīng)，樣品與溶劑在很短時間內(nèi)便可升到很高的溫度，比常規(guī)加熱法一般要快20~100倍。其機(jī)理主要表現(xiàn)在微波熱效應(yīng)和非熱效應(yīng)兩方面。二是微波所產(chǎn)生的電磁場加速了被萃取成分向溶劑的擴(kuò)散。一般來說，當(dāng)萃取劑為非極性物質(zhì)時，絕大部分微波被物料吸收，細(xì)胞內(nèi)物料急劇發(fā)熱而破壁，此時有利于微波熱效應(yīng)的發(fā)揮。與傳統(tǒng)提取方法相比，微波萃取有無可比擬的優(yōu)勢，主要體現(xiàn)在以下幾點:①質(zhì)量穩(wěn)定，可以在低溫下完成萃取操作，可有效保護(hù)功能成分，有利于萃取熱不穩(wěn)定物質(zhì)。③選擇性高，MAE可對體系中的不同組分進(jìn)行選擇性加熱，可以使目標(biāo)組分直接從機(jī)體中分離。⑷酶提取法 酶技術(shù)是近年來廣泛應(yīng)用于有效成分提取的一種生物技術(shù)，酶法提取可降低提取條件，加速有效成分的釋放或提取。常用的酶主要有纖維素酶、果膠酶等。例如:由于黃酮類物質(zhì)部分被以纖維素為主的細(xì)胞壁所包圍，并且這些細(xì)胞間尚有果膠粘結(jié)，因此采用酶法要比一般方法(醇提法)的提取率要高。常用的酶主要有纖維素酶、果膠酶等。在總黃酮回流提取前先進(jìn)行酶解，將大分子物質(zhì)降解成小分子物質(zhì)，有利于黃酮類物質(zhì)的溶出。由于CO2具有臨界條件好、無污染等優(yōu)點，是最常用的流體。但是由于設(shè)備昂貴，生產(chǎn)成本高，且提取物中烷基酚含量較高，目前仍很難應(yīng)用于生產(chǎn)。它和上述提取工藝相比較，具有提取效率高、無溶劑殘留、天然植物中活性成分和熱不穩(wěn)定成分不易被分解破壞等優(yōu)點。因此，在當(dāng)今人們渴望回歸大自然的潮流中，該提取方法倍受青睞。超聲提取技術(shù)的基本原理主要是利用超聲波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取，另外超聲波的次級效應(yīng):如機(jī)械振動、乳化、擴(kuò)散擊碎和化學(xué)效應(yīng)等，也能加速與提取成分的擴(kuò)散釋放并充分與試劑混合，利于提取。而且超聲提取技術(shù)能避免高溫高壓對有效成分的破壞，但對容器壁的厚薄及容器放置位置要求較高，否則會影響藥材浸出效果。 近年來，針對黃酮類化合物的藥理活性的研究有很多。經(jīng)研究表明，黃酮具有很好的心血管系統(tǒng)活性，不少治療冠心病的中成藥里均含有黃酮類化合物。黃酮除了具有心血管活性之外，還具有抗菌及抗病毒活性、抗菌及抗病毒活性、抗炎、鎮(zhèn)痛活性、保肝活性、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)作用。 黃酮類化合物由于具有很好抗氧化作用，且在自然界中分布具有廣泛性的特點，所以從植物中提取黃酮用于治療疾病的發(fā)展前景是十分廣闊的。紫外可見分光光度計UV2754。超級恒溫槽。 FD21C250 冷凍干燥機(jī) 試劑及藥品蘆丁 標(biāo)準(zhǔn)品硝酸鋁 國產(chǎn)分析純（配成5 %）亞硝酸鈉 國產(chǎn)分析純（配成10 %）氫氧化鈉 國產(chǎn)分析純配成（配成1mol/L）95%乙醇，無水乙醇 國產(chǎn)分析純（配成60%乙醇 50%乙醇）DPPH [ 2, 239。聯(lián)氮雙(3乙基苯并噻唑啉6磺酸)]VC（Ascrobic acid，維生素 C，抗壞血酸）沒食子酸對照品：基準(zhǔn)純。根據(jù)查閱文獻(xiàn)總黃酮在波長為510nm處吸收值最大。、 ,分別置于10mL 容量瓶中,各加5 % 搖勻,放置6min ,加10% 搖勻,放置6min ,加1mol /L氫氧化鈉溶液4mL ,再用60%乙醇溶液稀釋至刻度,放置15min 后,分別在510nm 處測定其吸光度。用最小二乘法進(jìn)行線性擬合,得c與A 的線性回歸方程以及相關(guān)系數(shù)R2。取黃酮提取液，根據(jù)提取液顏色的深淺，適當(dāng)用60%乙醇稀釋5倍得到稀釋液，以便于后續(xù)的吸光值測量。其余各份各加5% 搖勻,放置6min ,加10% 搖勻,放置6mi