搖床培養(yǎng)確定酵母菌的培養(yǎng)條件或營養(yǎng)條件-在線瀏覽
2024-08-06 19:38本頁面
【正文】 接測定酵母菌的生物量大小，進行比較。五、實驗步驟（一）菌種的活化培養(yǎng)基的配置（1）菌種試管斜面（活化）培養(yǎng)基及母種擴大培養(yǎng)基馬鈴薯瓊脂糖培養(yǎng)基：馬鈴薯（去皮）200 g 、葡萄糖20 g、瓊脂15～20g、蒸餾水1000 ml ， pH自然。① 稱量 取去皮馬鈴薯40g，葡萄糖兩份，每份2g。② 將馬鈴薯切成小塊，放入鍋中，加水200mL，煮沸30 min。 ③ 取100mL濾液，裝入250mL的錐形瓶內(nèi)，加入2g葡萄糖，攪拌使糖溶解，然后加塞包扎，等待滅菌。④ 將剩余100mL馬鈴薯濾液放回鍋中，加入瓊脂，加熱熔化。 ⑤ 加入2g葡萄糖，葡萄糖溶解后，加入適量的水以補充加熱過程中損失的水分，定容到100mL。分裝三角瓶的容量以不超過三角瓶容積之一半為宜。棉塞可過濾空氣，防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱。 ⑩ 擱置斜面 將滅菌的試管培養(yǎng)基豎直放置，冷至50℃左右(以防斜面上冷凝水太多)，將試管口端擱在玻棒或其他合適高度的器具上，擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。② 將馬鈴薯切成小塊，放入鍋中，加水900mL，煮沸30 min。 ③ 分裝 將煮好的培養(yǎng)基分裝于9個錐形瓶中，每支錐形瓶100mL培養(yǎng)基，編號（1）（9），用記號筆注明。序號（1） （2）（3）（4）（5）（6）（7）（8）（9）葡萄糖用量/g pH值 6 7 8 6 7 8 6 7 8⑤ 加塞 攪拌充分后，在瓶口塞上棉塞。⑧ 包扎 加塞后，再在棉塞外包一層報紙，以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道線繩扎好。制備斜面菌種接種半小時前，打開無菌操作室和超凈工作臺的紫外燈，紫外照射滅菌。貼標簽 接種前在試管上貼上標簽，注明菌名、接種日期，放入超凈工作臺。將接種環(huán)用酒精燈外焰灼燒滅菌，冷卻后用接種環(huán)將菌種移接到貼好標簽的試管斜面上。塞棉塞時，不要用試管迎棉塞，以免試管在移動時帶入不潔空氣。將斜面試管置于30℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，大約一天后即可觀察到斜面菌種的生長情況。（二）、酵母菌的擴大培養(yǎng)在超凈工作臺上，將活化的酵母菌斜面菌種從試管中接種到酵母菌擴大培養(yǎng)的培養(yǎng)基中。（三）、酵母菌轉(zhuǎn)接，搖床培養(yǎng)菌種經(jīng)過24h擴大培養(yǎng)后，在超凈工作臺上
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