高效液相色譜儀ppt課件-在線瀏覽
2025-06-22 07:32本頁面
【正文】 精度在 1%左右 ? 輸出壓力高，通常 20~30MPa，最高 50 MPa ? 流量范圍寬，一般在 ~10mL/min范圍內(nèi) ? 能抗溶劑腐蝕 ? 壓力波動(dòng)小、更換溶劑方便、容易清洗、具梯度洗脫 ? 操作方便、容易維修 ? 根據(jù)泵的操作原理不同，分為恒壓泵和恒流泵 氣動(dòng)放大泵（恒壓泵） 往復(fù)泵 （恒流泵）是目前液相色譜使用最普遍的一種 高 壓泵。 往復(fù)泵的優(yōu)點(diǎn)是泵頭內(nèi)腔體積小，容易洗凈，故更換 溶劑十分方便，尤其適合做色譜條件試驗(yàn)時(shí)使用。當(dāng)將扳手扳至“進(jìn)樣 inject”位時(shí)，進(jìn)樣閥的 流路發(fā)生了改變，流動(dòng)相通過樣品管，將注入的樣品帶入色譜柱進(jìn)行分析。 樣品環(huán) (Loop) 規(guī)格：有 10181。L、 50181。 作用：用來貯液，也用來測(cè)量樣品溶液的體積。 用定量環(huán)進(jìn)樣精密度好，在使用外標(biāo)法時(shí)，應(yīng)使用此種操作方式。 （ 3） 色譜柱 色譜柱流速方向 色譜柱的參數(shù) 色譜柱（ Column） 結(jié)構(gòu)：柱管多用不銹鋼制成，色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有 篩板，目的是防止填料漏出。 發(fā)展趨勢(shì)是減小填料粒度和柱徑以提高柱效。 C8是修飾的帶 8個(gè)碳原子的硅烷， C18是修飾的帶 18個(gè)碳原子的硅烷。 C18柱（ C8柱）性能影響因素 物理性質(zhì) ?硅膠純度 ?色譜柱尺寸 ?顆粒形狀 ?粒徑 ?表面積 ?孔徑 ?鍵合類型 ?碳覆蓋率 ?封端 化學(xué)性質(zhì) 正相柱 ： 固定相通常為硅膠以及其他具有極性官能團(tuán)，如胺基 (NH2)和 氰基 (CN)的鍵合相填料。 反相柱 ： 固定相通常是以硅膠為基質(zhì)，表面鍵合有極性相對(duì)較弱官能團(tuán)的 鍵合相。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)的組分最先被 沖洗出 ， 而極性弱的組分會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留 。 正相柱和反相柱 預(yù)柱和保護(hù)柱 從泵來的流動(dòng)相 預(yù)柱 進(jìn)樣口 保護(hù)柱 分析柱 檢 測(cè) 器 預(yù)柱是針對(duì)流動(dòng)相來保護(hù)色譜柱 保護(hù)柱是針對(duì)樣品來保護(hù)色譜柱 precolumn——預(yù)柱 ， guard column——保護(hù)柱 安裝位置不同： 預(yù)柱是泵后進(jìn)樣口前，途經(jīng)流動(dòng)相；保護(hù)柱是進(jìn)樣口后分析柱前，途經(jīng)樣品和流動(dòng)相。保護(hù)柱除了可以過濾顆粒物外，因?yàn)閹?1厘米長(zhǎng)的填料，強(qiáng)保留物質(zhì)就先留在保護(hù)柱的柱芯填料里面，這樣可以避免色譜柱被強(qiáng)保留物質(zhì)污染。 即用特定波長(zhǎng)的紫外光照射樣品池，通過檢測(cè)透光率的變化來測(cè)定樣品濃度的檢測(cè)器。 a. 紫外檢測(cè)器 (UVD)： 應(yīng)用最廣泛的選擇性檢測(cè)器。 線性范圍寬， 對(duì)流速和溫度波動(dòng)不靈敏， 適用于梯度洗脫。 而且對(duì)流動(dòng)相也有一定的限制， 即流動(dòng)相的 截止波長(zhǎng) 應(yīng)小于檢測(cè)波長(zhǎng)。 所以在使用紫外檢測(cè)器時(shí)，檢測(cè)波長(zhǎng)應(yīng)至少比所用溶劑的截止波長(zhǎng)大 20nm以上。 特點(diǎn) ：通用性檢測(cè)器； 對(duì)溫度變化比較敏感，要保持在 177。 b. 示差折光 檢測(cè)器 (RID) 原理 : 利用某些溶質(zhì)在紫外光激發(fā)后能發(fā)射可見光 (熒光 ) 的性質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。 c. 熒光檢測(cè)器 (FLD) 特點(diǎn) : 選擇性檢測(cè)器， 靈敏度比紫外檢測(cè)器高 23個(gè)數(shù)量級(jí)， 可達(dá)到 1012g； 選擇性好，對(duì)流量和溫度敏感性低。 通過 熒光衍生化 可以使本來沒有熒光的化合物轉(zhuǎn)變 成熒光衍生物，從而擴(kuò)大了熒光檢測(cè)器的應(yīng)用范圍。色譜柱后流出物在通向檢測(cè)器途中，被高速載氣 (氮?dú)?)噴成霧狀液滴，再進(jìn)入蒸發(fā)漂移管中，流動(dòng)相不斷蒸發(fā)，含溶質(zhì)的霧狀液滴形成不揮發(fā)的微小顆粒，被載氣載帶通過檢測(cè)器。 d. 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器 (evaporative lightscatting detector, ELSD) 適用范圍 ： 適用檢測(cè)揮發(fā)性低于流動(dòng)相的組分 ，主要用于檢測(cè)糖類，高級(jí)脂肪酸，磷脂， 維生素，氨基酸，甘油三酯及甾體等。 消除溶劑的干擾，不受溫度變化影響， 靈敏度比較低（尤其對(duì)有紫外吸收的組分） 流動(dòng)相必須是揮發(fā)性的，不能含有緩沖鹽等。流動(dòng)相組成改變，極性改變，可顯著改變各組分
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