微生物學實驗教學大綱-在線瀏覽
2025-05-22 23:23本頁面
【正文】 當中有一圓形凹窩，做懸滴觀察活細菌及血清學試驗用。1德漢氏小管觀察細菌在糖發(fā)酵培養(yǎng)基內(nèi)產(chǎn)氣情況時，一般在小試管內(nèi)再套一倒置的小套管（約6mm36mm），此小管即為德漢氏小管，又稱發(fā)酵小套管。1接種工具接種工具有接種環(huán)，接種針，接種鉤，接種鏟，玻璃涂布器等。接種環(huán)常裝于鋁質(zhì)的握柄上，用壞后可隨時更換。舊玻璃器皿的洗滌（1）試管、培養(yǎng)皿、三角瓶：洗衣粉和去污粉洗刷，自來水沖洗。B 帶菌的器皿：2%%，然后洗滌。（2）玻璃吸管：吸管尖端與裝在水龍頭上的橡皮管連接，反復(fù)沖洗。B 塞有棉花的吸管：用水將棉花沖出，然后沖洗。D 吸管內(nèi)壁有油垢：洗滌液中浸泡數(shù)小時，再沖洗。洗滌后，若內(nèi)壁的水均勻分布成一薄層，表示完全洗凈，若還掛有水珠，則需用洗滌液浸泡數(shù)小時，然后再用自來水沖洗。 吸管的包扎：， cm長的棉花（勿用脫脂棉），目的是避免將外界或嘴中雜菌吹入管內(nèi)，或不慎將菌液吸出管外。試管和三角瓶等的包扎： 試管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅膠塞；用二層報紙包扎好（如有牛皮紙，效果更好），進行干熱或濕熱滅菌。附：棉塞的制作：棉塞可過濾空氣，防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水份的蒸發(fā)，故在微生物工作中一直普遍使用著。棉花要求采用普通棉花，它能防潮不易吸水，不要用脫脂藥棉，它易吸水又昂貴。（二）實驗二 環(huán)境微生物的檢查目的要求證明實驗室環(huán)境與體表存在微生物；比較來自不同場所與不同條件下細菌的數(shù)量和類型；觀察不同類群微生物的菌落形態(tài)特征；體會無菌操作的重要性。每一種細菌所形成的菌落都有它自己的特點，例如菌落的大小，表面干燥或濕潤、隆起或扁平、粗糙或光滑，邊緣整齊或不整齊，菌落透明或半透明或不透明，顏色以及質(zhì)地疏松或緊密等。實驗內(nèi)容環(huán)境微生物的檢測：倒平板、接種環(huán)境微生物；滅菌器皿的準備：學習包扎平皿、移液管。（三）實驗三 顯微鏡的構(gòu)造、性能和使用方法目的要求學習掌握油鏡的規(guī)范使用方法；復(fù)習掌握光學顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)及使用方法。它與接物鏡的數(shù)值孔徑成正比，與光的波長成反比。實驗材料和用品學生顯微鏡、細菌三型裝片；雙層瓶(內(nèi)裝香柏油和乙醚——酒精擦拭液)、擦鏡紙。實驗原理簡單染色法是利用單一染料對細菌進行染色的一種方法。常用堿性染料進行簡單染色，這是因為：在中性、堿性或弱酸性溶液中，細菌細胞通常帶負電荷，而堿性染料在電離時，其分子的染色部分帶正電荷(酸性染料電離時，其分子的染色部分帶正電荷)，因此堿性染料的染色部分很容易與細菌結(jié)合使細菌著色。常用作簡單染色的染料有：美藍、結(jié)晶紫、堿性復(fù)紅等。實驗內(nèi)容微生物菌落形態(tài)的觀察：幾種代表類型微生物菌落形態(tài)特征了解、辨識；細菌簡單染色及個體形態(tài)的觀察：無菌接種操作；涂片、干燥、固定、染色、水洗、干燥、鏡檢。（五）實驗五 革蘭氏染色目的要求學習并初步掌握革蘭氏染色法；了解革蘭氏染色法的原理及其在細菌分類鑒定中的重要性。該染色法能將細菌分為G－菌和G＋菌，是基于這兩類細菌的細胞壁結(jié)構(gòu)和成分不同。G＋菌細胞壁中肽聚糖層厚且交聯(lián)度高，類脂質(zhì)含量少，經(jīng)脫色劑處理后反而使肽聚糖層的孔徑縮小，通透性降低，因此細菌仍保留初染時的顏色。實驗材料和用品材料：大腸桿菌、金黃色葡萄球菌；用品：學生顯微鏡、酒精燈、載玻片、接種環(huán)、雙層瓶(內(nèi)裝香柏油和乙醚——酒精擦拭液)、擦鏡紙；革蘭氏染色液(結(jié)晶紫染液、盧戈氏碘液、95％乙醇、番紅液)。觀察芽孢的形態(tài)特征：形狀、大小及著生位置。芽孢壁厚，透性低，著色、脫色均較困難，所以我們必須采取著色力強、濃度高的孔雀綠染液（5%）進行染色：染色過程中延長染色時間，10分鐘（一般為2～3分鐘）并且在加熱條件下進行染色。實驗內(nèi)容涂片：將培養(yǎng)24小時枯草桿菌作涂片、干燥、固定。 沖洗：取下冷卻，取掉濾紙，沖洗至孔雀綠不再退色為止。 鏡檢：待干燥后，置油鏡觀察，芽孢呈綠色，菌體呈紅色。 （七）實驗七 細菌鞭毛染色及運動性觀察目的要求學習并初步掌握鞭毛染色法，觀察細菌鞭毛的形態(tài)特征；學習用壓滴法觀察細菌的運動性。細菌的鞭毛很纖細，～，所以，除了很少數(shù)能形成鞭毛束(由許多根鞭毛構(gòu)成)的細菌可以用相差顯微鏡直接觀察到鞭毛束的存在外，一般細菌的鞭毛均不能用光學顯微鏡直接觀察到，而只能用電子顯微鏡觀察。實驗內(nèi)容硝酸銀染色法染色；壓滴法觀察細菌的運動性。（八）實驗八 酵母菌的形態(tài)觀察及死活細胞的鑒別目的要求觀察酵母菌的形態(tài)及出芽生殖方式，學習區(qū)分酵母菌死活細胞的實驗方法。實驗原理酵母菌是不運動的單細胞真核微生物，其大小通常比常見細菌大幾倍甚至十幾倍。用美藍對酵母的活細胞進行染色時，由于細胞的新陳代謝作用，細胞內(nèi)具有較強的還原能力，能使美藍由藍色的氧化型變?yōu)闊o色的還原型，因此，具有還原能力的酵母活細胞是無色的、而死細胞或代謝作用微弱的衰老細胞則呈藍色或淡藍色，借此即可對酵母菌的死細胞和活細胞進行鑒別。實驗材料和用品材料：釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)；用品：學生顯微鏡、酒精燈、載玻片、接種環(huán)；％％呂氏堿性美藍染色液。實驗原理霉菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察：霉菌可產(chǎn)生復(fù)雜分枝的菌絲體，分為基內(nèi)菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲生長到一定階段分化產(chǎn)生繁殖菌絲，由繁殖菌絲產(chǎn)生孢子。霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細菌和放線菌粗得多(約為3～10微米)，常是細菌菌體寬度的幾倍至幾十倍，因此，用低倍顯微鏡即可觀察。實驗材料和用品材料：細黃鏈霉菌或青色鏈霉菌、黑曲霉、根霉；用品：學生顯微鏡、體視鏡、酒精燈、載玻片、鑷子等。實驗原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。根據(jù)微生物的種
化學相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1