微生物學(xué)實驗報告-在線瀏覽
2025-05-22 23:23本頁面
【正文】 片，更嚴(yán)重的是損壞鏡頭，故必須極其仔細(xì)地學(xué)習(xí)油鏡的使用方法：為使低倍鏡取得最適之光源，可將低倍鏡頭調(diào)節(jié)到離載物臺約1cm的高度，將聚光器提高，光圈完全打開，然后調(diào)節(jié)電壓旋鈕至視野最合適。在雙目側(cè)視下，下旋粗調(diào)節(jié)器，使油鏡頭浸入油中幾乎與標(biāo)本片相接觸。如鏡頭已離開油面還未看到物像，則再重新操作。 油鏡觀察完畢后，按“顯微鏡保護(hù)”中（6）項處理。四、思考題使用顯微鏡時為何調(diào)節(jié)下列構(gòu)造？反光鏡，光圈，聚光器，粗調(diào)節(jié)器，細(xì)調(diào)節(jié)器，鏡頭回轉(zhuǎn)器。光圈的放大或縮小也可控制視野明亮程度。鏡頭回轉(zhuǎn)器為裝置物鏡和轉(zhuǎn)換物鏡之用。如何利用這一原理用好顯微鏡？答：物鏡的放大倍數(shù)愈大，其工作距離（物鏡鏡頭到標(biāo)本片之間的距離）愈短?？偟姆糯蟊稊?shù)是物鏡放大倍數(shù)與目鏡放大倍數(shù)的乘積。當(dāng)以香柏油（n=）為介質(zhì)時，由于它的折射率與玻璃相近，光線經(jīng)過載玻片后可直接通過香柏油進(jìn)入物鏡而不發(fā)生折射，不僅增加了視野的照明度，更重要的是通過增加數(shù)值孔徑達(dá)到提高分辨率的目的。顯微鏡有哪幾種？各自的主要特征是什么？答：光學(xué)顯微鏡中除明視野顯微鏡外，還有暗視野顯微鏡、相差顯微鏡和熒光顯微鏡；除光學(xué)顯微鏡外，還有電子顯微鏡。相差顯微鏡：相差顯微鏡成像的原理和普通光學(xué)顯微鏡一樣，所不同的是相差顯微鏡包括有環(huán)狀光闌、裝有相板的相差物鏡和全軸調(diào)整望遠(yuǎn)鏡三個特殊部分。由于用熒光素標(biāo)記的菌體各種結(jié)構(gòu)中的溶解、吸附或化合情況不一，于是發(fā)出不同色調(diào)和亮度的熒光，從而可以觀察細(xì)菌的不同結(jié)構(gòu)。第二部分：細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查方法一、目的要求 了解不染色標(biāo)本檢查法，用懸滴法觀察活細(xì)菌及其動力。 了解其它常用染色法。常用的堿性染料有結(jié)晶紫、美藍(lán)、堿性復(fù)紅等。單染色法即僅用一種染料著色，所有的細(xì)菌均被染成一種顏色，無鑒別細(xì)菌的作用。 最常用的細(xì)菌復(fù)染色法是革蘭氏染色法（Gram stain）。凡能使第一種染料結(jié)晶紫保留藍(lán)色的細(xì)菌叫革蘭氏陽性細(xì)菌，凡被灑精脫色后染上對比顏料沙黃或稀釋復(fù)紅而呈紅色的細(xì)菌叫做革蘭氏陰性細(xì)菌。玻片，接種環(huán)，酒精燈，吸水紙等。① 取玻片一塊，拭凈。③ 左手斜持菌種試管，右手將菌種試管棉塞稍加轉(zhuǎn)動，以便拔下。⑤ 試管口再通過火焰，塞好棉塞。⑦ 接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌。（3）固定 干燥后將涂片在火焰上緩緩?fù)ㄟ^三次，此為“固定”。（4）染色 初染→媒染→脫色→復(fù)染① 加結(jié)晶紫染液于標(biāo)本上，使其覆滿標(biāo)本，染1~2分鐘。③ 加路哥氏碘溶液經(jīng)1分鐘。⑤ 加95%酒精于玻片上來回流動，傾去酒精。⑥ 水洗。⑧ 水洗，用吸水紙吸干。三、實驗記錄革蘭氏染色過程：取玻片一塊，在玻片上滴三小滴水（有一定的距離），分別用接種環(huán)取EC（大腸桿菌）和BS（金黃色葡萄球菌）與兩邊的水滴上，并混勻，灼燒接種環(huán)后再分別取EC和BS于中間的水滴上混勻（即中間水滴是兩種菌的混合物），并在酒精燈下灼燒至干（小心不要將玻片炸裂），用結(jié)晶紫進(jìn)行初染，細(xì)水沖洗后，加路哥氏碘液進(jìn)行媒染，水洗后加酒精脫色2~3次，水沖洗后加稀釋復(fù)紅染液復(fù)染一分鐘，水洗，并用吸水紙吸干。普葡萄球菌為革蘭氏陽性菌，染色后呈現(xiàn)藍(lán)紫色。2．比較復(fù)染色法與單染色法的優(yōu)缺點。缺點：但無鑒別細(xì)菌的作用。缺點：使用試劑較多，過程較單染色法更復(fù)雜繁瑣。結(jié)晶紫溶液進(jìn)行初染，路哥氏碘液進(jìn)行媒染，95%酒精進(jìn)行脫色，稀釋復(fù)紅染液進(jìn)行復(fù)染。微生物學(xué)實驗報告實驗二
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