酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)ppt課件-在線瀏覽
2025-04-10 15:39本頁(yè)面
【正文】 ① ? 假定 [Et]表示酶的總濃度 ， [E]表示游離的酶濃度 ， [ES]為與底物結(jié)合的酶濃度 ， 則 [Et]＝ [E]+[ES]。 high Km means weak substrate binding. ? Km equals to the substrate concentration at which v=1/2vmax 121k kkK m ?? ?ESSE ?k1 k1 ? ?11][ ][ kkES SEK d ???? ? ][][ 11 ESkSEk ??Km的物理意義 Understanding Vmax The theoretical maximal velocity ? Vmax is a constant ? Vmax is the theoretical maximal rate of the reaction but it is NEVER achieved in reality ? To reach Vmax would require that ALL enzyme molecules are tightly bound with substrate ? Vmax is asymptotically approached as substrate is increased 米氏方程的雙重性 ? 當(dāng)?shù)孜餄舛群艿偷那闆r下，即 [S]Km，米氏方程可轉(zhuǎn)變?yōu)椋? ? 這時(shí)反應(yīng)速度與底物濃度成正比，符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)； ? 當(dāng)?shù)孜餄舛群芨叩那闆r下，即 [S]Km，米氏方程可轉(zhuǎn)變?yōu)椋? ? 這時(shí)酶反應(yīng)速度接近最大值，如果繼續(xù)增加底物的濃度， v不可能繼續(xù)增加，反應(yīng)速度與底物濃度的關(guān)系符合零級(jí)動(dòng)力學(xué)。在一定條件下，可以使用它來(lái)表示酶與底物的親和力。 ? Km可以幫助判斷體內(nèi)一個(gè)可逆反應(yīng)進(jìn)行的方向。否則，有利于逆反應(yīng)。隨著底物濃度的增加， V只能接近此值。 kcat的單位是 s1。 ? 4. 解讀 kcat/Km ? kcat/Km通常被用來(lái)衡量酶的催化效率 ,可以表示一個(gè)酶的催化效率或者完美程度。 ① Km是酶的一個(gè)特征常數(shù)， Km的大小只與酶的性質(zhì)有關(guān)，而與酶濃度無(wú)關(guān)。 ③ Km與 Ks： Km=k2+k3/k1， Ks=k2/k1 ④ 若已知某酶的 Km值，就可以計(jì)算在某一底物濃度時(shí)，其反應(yīng)速率相當(dāng)于 Vmax的百分率。 米氏常數(shù)在實(shí)際應(yīng)用中重要意義 米氏方程的線性轉(zhuǎn)換 ? 直接使用米氏方程中的 v對(duì) [S]作圖得到的是一條曲線，從圖中雖然也能得到 Km 值和 Vmax值，然而，由于實(shí)驗(yàn)誤差的客觀存在，只要出現(xiàn)任何可見(jiàn)的誤差使數(shù)據(jù)點(diǎn)偏離真實(shí)的位置，那么就很難畫出一個(gè)很完美的曲線，但在同樣的條件下，畫直線更容易。 米氏酶的雙倒數(shù)作圖 EadieHofstee作圖 HanesWolff 作圖 The turnover number A measure of catalytic activity ? kcat, the turnover number, is the number of substrate molecules converted to product per enzyme molecule per unit of time, when E is saturated with substrate. ? If the MM model fits, k2 = kcat = Vmax/Et ? Values of kcat range from less than 1/sec to many millions per sec The catalytic efficiency Name for kcat/Km ? An estimate of how perfect the enzyme is ? kcat/Km is an apparent secondorder rate constant ? It measures how the enzyme performs when S is low ? The upper limit for kcat/Km is the diffusion limit the rate at which E and S diffuse together
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