【正文】 手動調諧 電離室參數(shù) 四極桿參數(shù) 離子源參數(shù) 電子倍增器電壓 輪廓圖 連續(xù)掃描 離子豐度隨 離子源參數(shù) 變化曲線 Slide 90 Restricted 影響質量軸 影響峰寬 (分辨與靈敏度 ) 影響靈敏度 (傳輸效率 ) Slide 91 Restricted 通過手動調諧檢漏 Slide 92 Restricted Vacuum 菜單 Slide 93 Restricted Execute菜單 Slide 94 Restricted Calibrate菜單 Slide 95 Restricted Parameters 菜單 Slide 96 Restricted Edit tune and display parameters Slide 97 Restricted 選擇參數(shù) 把當前修改納入調諧參數(shù) Slide 98 Restricted Status菜單 Slide 99 Restricted 第四章 色譜進樣技術 Slide 100 Restricted 分流 /不分流毛細管柱進樣口分解圖 插入件組件 襯管 絕緣層 墊圈 變徑接頭 保溫層 墊圈 柱螺母 進樣墊固定螺母 進樣墊 O形環(huán) 分流出口管線 分流 /不分流 進樣口實體 固定螺母 分流平板 保溫套 Slide 101 Restricted 襯管的作用 ? 保護色譜柱：不揮發(fā)組分滯留在襯管內。如：HMDS、 BSTFA、 BSA、 TSIM等。 注意：高溫下工作 3，硅烷化的有效期只有幾天。 Slide 102 Restricted 溶劑膨脹方程 溶劑蒸汽體積 = 22,400 x A x B x C x I A = 溶劑密度 /溶劑分子量 B = 15/(15 + 柱頭壓 [in psi]) C = (進樣口溫度 [?C] + 273)/273 I = 液體進樣體積 [mL] 例如 1 mL 水于 250 ?C 15 psi 柱頭壓產生 22,400 x 1/18 x 15/30 x 523/273 x 1 = 1,192 mL 蒸汽 Slide 103 Restricted 18740 80220 19251 60540 18740 60840 900 uL 250 uL 1000 uL 1000 uL 工廠去活處理 殺蟲劑襯管 未去活 普通型 250 uL 直接進樣 不分流 分流 /不分流 不分流 分流 51834711 5181 8818 直接連接襯管可以減少進樣時樣品損失 底部 Slide 104 Restricted 分流平板的維護 ? 在溶劑中超聲處理 烘干 ? 用非氯化劑去活化 – HMDS – BSTFA – BSA – TSIM 用溶劑清洗 – 先惰性洗滌 甲苯 – 再用醇類清洗 甲醇 烘干 此部件須非常清潔 Slide 105 Restricted 分流過濾裝置 (Cartridge Assembly) Cartridge Split Vent Trap Assembly P/N G154460610 Slide 106 Restricted 分流進樣需注意的問題 ? 盡量減少分流歧視：分流比越大，越有可能造成分流歧視 ? 保證樣品快速汽化（適當添加經硅烷化處理的玻璃毛） ? 分流進樣時，柱的初始溫度盡可能高一些 ? 柱安裝時注意柱與襯管同軸 Slide 107 Restricted 分流進樣 總流量 50 mL/min 隔墊吹掃流量 3 mL/min 分流出口流量 46 mL/min 柱流量 1 mL/min Internal Detail 襯管 密封圈 柱子 槽 Slide 108 Restricted 進 樣 Column Flow 1 mL/min Split Vent Flow 46 mL/min (Septum) Purge Vent Flow 3 mL/min Total Flow 50 mL/min 注射針 Sample Slide 109 Restricted 3 mL/min 柱流量 1 mL/min 分流出口流量 46 mL/min 隔墊吹掃 總流量 50 mL/min 樣品汽化 Slide 110 Restricted 過 載 Column Flow 1 mL/min Split Vent Flow 46 mL/min (Septum) Purge Vent Flow 3 mL/min Total Flow 50 mL/min = Solvent = Analyte Slide 111 Restricted 節(jié)省載氣 節(jié)省載氣功能會在樣品進入色譜柱后 ， 減少分流出口的載氣流量 以節(jié)約載氣 。 可用于分流和不分流方式 。 分流出口 流量 (mL/min) 200 175 150 100 75 50 25 2 1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 預運行 時間 節(jié)省載氣 流量 進樣 節(jié)省載氣啟動時間設在 分鐘。溶劑要與柱子固定相匹配。 最好使用直通式襯管 ,對于比較臟的樣品 ,要加經硅烷化處理的玻璃毛并注意經常更換 ? 根據(jù)樣品 (溶劑沸點 ,待測組分沸點 ,濃度等 )優(yōu)化開啟分流閥的時間 ,一般在 3080秒之間 ,多用，可以保證 95%以上的樣品進入柱子 . Slide 113 Restricted 溶劑效應 Solvent BP Temp Dichloromethane 40 1030 Chloroform 61 2550 Carbon Disulfide 46 1035 Diethyl Ether 35 1025 Pentane 36 1025 Hexane 69 4060 IsoOctane 99 7090 溶劑與固定相須諧調 . Slide 114 Restricted 不分流進樣 總流量 4 mL/min 隔墊吹掃 3 mL/min 分流出口流量 0 mL/min 柱流量 1 mL/min Slide 115 Restricted Column Flow 1 mL/min (Septum) Purge Vent Flow 3 mL/min 進 樣 Split Vent Flow 0 mL/min Total Flow 4 mL/min Syringe Needle Sample Slide 116 Restricted 樣品進入柱子 結束 Split Vent Flow 0 mL/min Total Flow 4 mL/min = Solvent Vapor Column Flow 1 mL/min (Septum) Purge Vent Flow 3 mL/min = Analyte Vapor Slide 117 Restricted Vent Flow 3 mL/min Total Flow 50 mL/min Column Flow 1 mL/min Split Vent Flow 46 mL/min Purge 閥打開 – 不分流結束 = Solvent = Analyte Slide 118 Restricted 超 載 Column Flow 1 mL/min Split Vent Flow (Septum) Purge Vent Flow 3 mL/min Total Flow 0 mL/min 4 mL/min = Solvent Vapor = Analyte Vapor Slide 119 Restricted 30psi () 柱頭壓 10psi () 衡流方式 70C 10C/min () 280C Time Column : 30m, Carrier : Helium Detector : MS Pulsed Splitless Injection Slide 120 Restricted 冷柱上進樣 冷柱上進樣是將樣品直接注入處于室溫或更低溫度下的色譜柱內，再逐步升高溫度使樣品各組分依次汽化。 ? 避免熱分解 ? 容易利用溶劑效應 ? 準確度與精密度均高于分流 /不分流進樣 缺點 ? 進樣體積小 ? 操作復雜，對初始溫度、溶劑種類、進樣速度等要求較嚴格 ? 易污染毛細管 適用于熱不穩(wěn)定化合物及痕量分析 Slide 121 Restricted 冷柱頭進樣 注射器針 柱子 固定相 樣品 Slide 122 Restricted 其它進樣口 程序升溫汽化進樣口 ? 使用 PTV進樣口大體積進樣 (LVI)， 用于較晚流出組分 或不凈樣品的痕量分析 ? 在冷的進樣口進行大體積進樣，然后進樣口采用溫度 階程進樣升溫。 Slide 124 Restricted 程序升溫汽化進樣（ PTV） 程序升溫汽化進樣（ PTV）是將液體或氣體樣品注射于低溫的進樣口襯管內，再按程序升高進樣口的溫度。 ? 減少注射針尖歧視：每次進樣速度盡量一致，玻璃毛放在襯管中間偏下位置，即針尖到達的位置。 t R 我們希望知道組分保留在固定相中的真實時間。 W h 2 t R t m = t R 39。 = 調整保留時間 n = 有效理論塔板數(shù) Wh=半峰寬 Slide 132 Restricted 柱長 (cm) 不保留組分的保留時間 (sec) 線速度 = 估算不保留組分的保留時間 ? 如果溶劑是流出的第一個組分，就使用它的保留時間。 ? GC/MS用空氣的保留時間 使用如下公式來估算柱長： Length = ? dk 其中 d = 柱卷成的圈的直徑 k = 柱圈圈數(shù) ? = 使用下面的公式，可利用線速度計算流量 流量 (ml/min) = ?r 2 m60 其中 r = 柱半徑 cm m = 平均線速度 cm/sec 60 = 從 sec 到 min 的轉換因子 測量線速度和流量 Slide 133 Restricted HETP C 傳質阻力項 A 渦流項 分子擴散項 m ( opt m) } } B { HETP = A + + C m B m 柱效受載氣線速度和流量影響。 毛細管柱中不存在“ A‖項。 曲線最低點的線速度值即為可獲得最好柱效的最佳線速度值。 GC/MS要用 。 ?減小進樣量。 ?使用程序升溫改善后流出組分峰形 。進樣應該緊湊快速， 以免峰展寬。 通過兩個欲分離相鄰峰的分開程度來測算分離度 。 ( RT RT ) 2 1 (W + W ) 1 2 R = R = 認為可以實現(xiàn)基線分離 W1=化合物 1的半峰寬 W2=化合物 2的半峰寬 分離度 Slide 136 Restricted 1. 欲分離樣品 2. 柱內徑 3. 固定相 4. 柱長 5. 膜厚或填充劑 %量 A. 柱容量 B. 保留能力 C. 惰性 D. 柱效 E. 流失 柱選擇方面的考慮 Slide 137 Restricted ? 先試手邊的柱子 ? 向同事咨詢 ? 查詢已發(fā)表的相似應用 ? 如果難以確定 ， 先用一個非極性柱 ， 如 HP1或 HP5 這只是一些好的開端 ， 而操作者必須自行優(yōu)化條件 。