人教版選修三12基因工程的基本操作程序-展示頁
2025-01-18 17:04本頁面
【正文】 ____；核酸酶 H的作用是 ________。青島市高二期末 )1970年，科學(xué)家證實了 RNA病毒能依賴 RNA合成DNA的過程，并發(fā)現(xiàn)了催化此過程的酶。 蛋白質(zhì) 抗原 — 抗體雜交 個體生物學(xué) 要點突破講練互動 要點一 “ 目的基因的獲取 ” 應(yīng)注意的幾個問題 1..PCR技術(shù)與 DNA復(fù)制的比較 比較項目 DNA復(fù)制 PCR技術(shù) 區(qū)別 解旋方式 解旋酶催化 DNA在高溫下變性解旋 場所 細(xì)胞內(nèi) (主要在細(xì)胞核內(nèi) ) 細(xì)胞外 (主要在PCR擴增儀中 ) 比較項目 DNA復(fù)制 PCR技術(shù) 區(qū)別 酶 DNA解旋酶、DNA聚合酶 耐熱的 DNA聚合酶 溫度 細(xì)胞內(nèi)溫和條 件 控制溫度，需 90℃ ～95℃ 高溫 結(jié)果 合成 DNA分子 合成 DNA片段或基因 聯(lián)系 (1)模板：均需要脫氧核苷酸雙鏈作為模板 (2)原料：均為四種脫氧核苷酸 (3)酶：均需 DNA聚合酶 (4)引物：都需要引物，使 DNA聚合酶從引物的 3′端開始連接脫氧核苷酸 人工合成目的基因的方法主要有兩種 。 ___________水平的鑒定。 ________,方法是采用 __________技術(shù) 。 顯微注射 受精卵 Ca2＋ 感受態(tài) 想一想 2． 從細(xì)胞器的功能上分析 ， 若通過基因工程生產(chǎn)人的糖蛋白 ， 可以用大腸桿菌嗎 ？ 【 提示 】 不可以，糖蛋白上的糖鏈?zhǔn)窃趦?nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體上加工完成的，而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體存在于真核細(xì)胞中，大腸桿菌是原核生物，細(xì)胞中不含有這兩種細(xì)胞器。 (3)將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法： ① 用 _______處理細(xì)胞 ， 使細(xì)胞處于能吸收周圍環(huán)境中 DNA分子的生物狀態(tài) ,這種細(xì)胞稱為 ________細(xì)胞 。 目的基因 農(nóng)桿菌 (2)將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞：最常用的方法是 __________技術(shù) 。 小 目的基因 三 、 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 1..轉(zhuǎn)化 ___________進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi) ， 并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程 ， 稱為轉(zhuǎn)化 。 如果基因比較 ___,核苷酸序列又已知 ,也可以通過 DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成 。 (5)特點：指數(shù)形式擴增。 第二步：冷卻至 _________℃ ， 引物與兩條單鏈 DNA相應(yīng)互補序列結(jié)合； 第三步：加熱至 70～ 75℃ ， 熱穩(wěn)定 DNA聚合酶 (Taq酶 )從引物起始進(jìn)行互補鏈的合成 。 (3)原理： ________________。 PCR技術(shù)擴增目的基因 (1)PCR的含義：是一項在生物 ______復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù) 。 [要點 ] 新知初探思維啟動 一 、 目的基因的獲取 1..從基因文庫中獲取目的基因 將含有某種生物的不同 ______的 DNA片段導(dǎo)入受體菌的群體中儲存 ， 各個受體菌分別含有這種生物不同的基因 ， 稱為基因文庫 。 [重點 ] 。1． 2 基因工程的基本操作程序 學(xué)習(xí)導(dǎo)航 。 [難點 ] 。 。 基因 基因文庫包括兩種： ________文庫，即包含一種生物所有基因的文庫； __________文庫 ,即只包含一種生物的一部分基因的文庫，如 cDNA文庫。 (2)目的：短時間內(nèi)大量擴增目的基因 。 基因組 部分基因 體外 DNA雙鏈復(fù)制 (4)過程： 第一步：加熱至 9
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