新人教版生物選修312基因工程的基本操作程序-展示頁
2024-11-29 19:44本頁面
【正文】 結(jié)果 堿基互補(bǔ)配對(duì) 四種脫氧核苷酸 模板、能量、酶 DNA在高溫下變性解旋 解旋酶催化 體外復(fù)制 細(xì)胞核內(nèi) 熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶 細(xì)胞內(nèi)的 DNA聚合酶 大量的 DNA片段 形成整個(gè) DNA分子 目的基因的 mRNA 單鏈 DNA (cDNA） 雙鏈 DNA (即目的基因 ) 反轉(zhuǎn)錄 合成 1）反轉(zhuǎn)錄法： 以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使 RNA為模板，反轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的單鏈 DNA，然后在酶的作用下合成雙鏈 DNA，從而獲得所需的基因。 ： 見課本 P9 提取某種生物的全部 DNA 用適當(dāng)?shù)南拗泼盖? 一定大小的 DNA片段 將 DNA片段與載體連接 導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存 基因組文庫 （ 1）直接分離法 (鳥槍法 ) 某種生物的單鏈 mRNA 單鏈互補(bǔ) DNA 雙鏈 cDNA片段 導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存 與載體連接 cDNA文庫 反（逆）轉(zhuǎn)錄酶 DNA聚合酶 反轉(zhuǎn)錄法： cDNA的合成流程圖解 基因組文庫和部分基因組文庫 (cDNA文庫 )比較 概念 ： PCR全稱為 _______________，是一項(xiàng) 在生物 ____復(fù)制 ___________的核酸合成技術(shù) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 體外 特定 DNA片段 原理： DNA復(fù)制 利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 四種脫氧核苷酸 (dNTP) 一對(duì)引物： 熱穩(wěn)定 DNA聚合酶 (Taq酶） 模板 DNA( 需含有目的基因 ) Mg2+(激活劑 ) 條件： 緩沖溶液 一對(duì)寡核苷酸序列：與目的基因的起始段互補(bǔ) 一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物 前提： 過程 高溫變性（ 解旋為單鏈 ） 低溫退火（ 引物與單鏈互補(bǔ)結(jié)合 ） 適溫延伸 （ 在 Taq酶的作用下合成 與模板互補(bǔ)的 DNA雙鏈 ） 重復(fù)循環(huán) 預(yù)變性（ 增加 DNA變性的概率 ） 具體過程 PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ) ① 概念： PCR全稱為 _______________，是一項(xiàng) 在生物 ____復(fù)制 ___________的核酸合成技術(shù) ③ 條件： _______________________、 _______________、 ___________ 、 ② 原理： __________ ④ 方式：以 _____方式擴(kuò)增，即 ____（ n為擴(kuò)增循 環(huán)的次數(shù)） ⑤ 結(jié)果： 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 體外 特定 DNA片段 DNA復(fù)制 四種脫氧核苷酸 一對(duì)引物 DNA聚合酶 指數(shù) 2n 使目的基因的片段在短時(shí)間內(nèi)成百萬倍地?cái)U(kuò)增 要有一段已知目的基因的核苷酸序列（前提條件） ⑥ 過程： a、 DNA變性 （ 90℃ 95℃ ）：雙鏈 DNA模板 在熱作用下， _____斷裂，形成 ___________ b、退火 （ 復(fù)性
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