生物：12基因工程的基本操作程序課件1新人教版選修-展示頁
2025-01-27 02:18本頁面
【正文】 模板、能量、酶 DNA在高溫下變性解旋 解旋酶催化 體外復制 細胞核內(nèi) 熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶 細胞內(nèi)的 DNA聚合酶 大量的 DNA片段 形成整個 DNA分子 目的基因的 mRNA 單鏈 DNA (cDNA） 雙鏈 DNA (即目的基因 ) 反轉(zhuǎn)錄 合成 1）反轉(zhuǎn)錄法： 以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使 RNA為模板，反轉(zhuǎn)錄成互補的單鏈 DNA，然后在酶的作用下合成雙鏈 DNA，從而獲得所需的基因。 ： 見課本 P9 基因組文庫與部分基因文庫的關(guān)系 提取某種生物的全部 DNA 用適當?shù)南拗泼盖? 一定大小的 DNA片段 將 DNA片段與載體連接 導入受體菌中儲存 基因組文庫 （ 1）直接分離法 (鳥槍法 ) 某種生物的單鏈 mRNA 單鏈互補 DNA 雙鏈 cDNA片段 導入受體菌中儲存 與載體連接 cDNA文庫 反（逆）轉(zhuǎn)錄酶 DNA聚合酶 反轉(zhuǎn)錄法： cDNA的合成流程圖解 基因組文庫和部分基因組文庫 (cDNA文庫 )比較 概念 ： PCR全稱為 _______________，是一項 在生物 ____復制 ___________的核酸合成技術(shù) 聚合酶鏈式反應 體外 特定 DNA片段 原理： DNA復制 利用 PCR技術(shù)擴增目的基因 四種脫氧核苷酸 (dNTP) 一對引物： 熱穩(wěn)定 DNA聚合酶 (Taq酶） 模板 DNA( 需含有目的基因 ) Mg2+(激活劑 ) 條件： 緩沖溶液 一對寡核苷酸序列：與目的基因的起始段互補 一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物 前提： ? 過程 變性、退火、延伸三步曲 ?變性： 加熱至 90～ 95℃雙鏈 DNA解鏈成為單鏈DNA ?退火： 冷卻至 55～ 60℃部分引物與模板的單鏈DNA的特定互補部位相配對和結(jié)合 ?延伸： 加熱至 70～ 75℃以目的基因為模板，合成互補的新 DNA鏈 變性 退火 延伸 具體過程 PCR(多聚酶鏈式反應 ) ① 概念： PCR全稱為 _______________，是一項 在生物 ____復制 ___________的核酸合成技術(shù) ③ 條件： _______________________、 _______________、 ___________ 、 ② 原理： __________ ④ 方式：以 _____方式擴增，即 ____（ n為擴增循 環(huán)的次數(shù)） ⑤ 結(jié)果： 聚合酶鏈式反應 體外 特定 DNA片段 DNA復制 四種脫氧核苷酸 一對引物 DNA聚合酶 指數(shù) 2n 使目的基因的片段在短時間內(nèi)成百萬倍地擴增 要有一段已知目的基因的核苷酸序列（前提條件） ⑥ 過程： a、 DNA變性 （ 90℃ 95℃ ）：雙鏈 DNA模板 在熱作用下， ____
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