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基因工程載體-噬菌體載體-展示頁

2024-09-26 21:10本頁面
  

【正文】 cI cro cII O P Q S R att int xis gam red cIII N COS COS 頭部基因 尾部基因 功能不明區(qū) 溶源化 重組 早期控制 阻遏 DNA合成 溶菌 生長非必須區(qū)段 cI基因:溶源過程控制基因。 λ 噬菌體感染細(xì)菌后的溶菌性生長和溶源性生長 溶菌性生長 ( lytic pathway) 噬菌體感染細(xì)菌后 , 借助其 2個 COS位點(diǎn)互補(bǔ)成環(huán) , 在宿主菌體內(nèi)連續(xù)復(fù)制 , 合成大量基因產(chǎn)物 , 進(jìn)而裝配成噬菌體顆粒 , 裂解宿主菌 , 釋放出來的噬菌體又可感染其他細(xì)菌 。 特點(diǎn)是功能相近的基因在基因組中聚集在一起。形成這一過程稱為溶源化 溫和噬菌體( temperate phage) 噬菌體的結(jié)構(gòu)和其核酸類型 : 結(jié)構(gòu): 無尾部結(jié)構(gòu)的二十面體型、 具尾部結(jié)構(gòu)的二十面體型、 線狀體型 核酸類型:最常見的是雙鏈線性 DNA、 雙鏈環(huán)形 DNA、 單鏈環(huán)形 DNA、 單鏈線形 DNA、 單鏈 RNA。在溶源性細(xì)菌內(nèi)存在的整合或非整合的噬菌體 DNA被稱為原噬菌體。 溶源周期中,注入寄主細(xì)胞的噬菌體 DNA是整合到寄主細(xì)胞染色體上并可以隨著寄主細(xì)胞的分裂而進(jìn)行復(fù)制。 第二節(jié) 噬菌體載體 2 噬菌體載體 ( phage vectors) 一、 ?噬菌體載體 二、單鏈?zhǔn)删w載體 三、噬菌粒載體 四、柯斯質(zhì)粒載體 一、 ?噬菌體載體 噬菌體是一類細(xì)菌病毒( Bacteriophage) (一)噬菌體的一般特性 結(jié)構(gòu): 蛋白質(zhì)外殼內(nèi)包裹著 DNA(雙鏈、單鏈、線性、環(huán)狀等)。 T4 Bacteriophage 7 1. 噬菌體的生物學(xué)特性 溶菌周期指噬菌體將 DNA注入寄主細(xì)胞后很快環(huán)化,然后進(jìn)行自我復(fù)制、蛋白衣殼合成和新噬菌體顆粒的組裝,最后使寄主細(xì)胞破裂而釋放出大量的子代噬菌體。 整合了一套完整的噬菌體基因組的細(xì)菌被稱為溶源性細(xì)菌。 噬菌體 溫和噬菌體,具有溶源生長周期和溶菌生長周期 烈性噬菌體 ,只具有溶菌生長周期 分為兩種: ( 1) 溶菌周期: 噬菌體的生活周期 烈性噬菌體( virulent phage) ( 2) 溶原周期: 感染細(xì)菌后,將自己的 DNA整合到細(xì)菌的染色體 DNA中。 λDNA的物理圖譜 λDNA為線狀雙鏈 DNA分子,兩端各有一個 12核苷酸的互補(bǔ)單鏈(粘性末端)GGGCGGCGAC CT, CCCGCCGCTGGA,稱為cos區(qū),全長 。 λ 噬菌體 組成特點(diǎn) : 雙鏈線狀 DNA分子, 全長 50kb, 含 65個基因, 在其分子兩端各含有12個堿基的互補(bǔ)單鏈,是天然的粘性末端,被稱為COS位點(diǎn)。 溶源性生長 (lysogenic pathway) 噬菌體感染細(xì)菌后 , 可將自身 DNA整合到細(xì)菌的染色體中去 , 與之一起復(fù)制 , 并遺傳給子代細(xì)胞 , 宿主細(xì)胞不被裂解 。 λ噬菌體的基因組結(jié)構(gòu) 5‘CGGGGCGGCGACCTCG3’ 3’GCCCCGCCGCTGGAGC5’ Cleavage Ligation (during packaging) (after infection) GGGCGGGCGACCTCG3’ 5’CG + GC5’ 3
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