發(fā)酵工程余龍江版第4章發(fā)酵工業(yè)無菌技術(shù)-展示頁
2024-09-26 20:39本頁面
【正文】 染雙球菌 、 芽孢桿菌和莢膜桿菌 ? 檸檬酸：怕染青霉菌 ? 肌苷 （ 酸 ） ：怕染芽孢桿菌 ? 谷氨酸：怕染噬菌體 ， 易造成連續(xù)污染 （ 3）不同發(fā)酵時(shí)期染菌對(duì)發(fā)酵的影響 ? 種子擴(kuò)大時(shí)期染菌 : ? 發(fā)酵前期染菌 ： ? 發(fā)酵中期染菌：挽救困難，應(yīng)早發(fā)現(xiàn)，快處理 ，處理方法應(yīng)根據(jù)各種發(fā)酵的特點(diǎn)和具體情況來決定 ? 抗生素發(fā)酵 ? 檸檬酸發(fā)酵 a. 污染細(xì)菌：加大通風(fēng)，加速產(chǎn)酸，調(diào) ，抑制細(xì)菌 b. 污染酵母：加入 ~；通風(fēng)加大，加速產(chǎn)酸。 ：在 pH很低下能夠生長 。 ? 發(fā)酵 后期污染 ? 染菌量不太多 ， 可繼續(xù)發(fā)酵 ? 污染嚴(yán)重 ， 則提前放罐 殺菌劑的添加： 前期無必要 ， 增加成本 ； 發(fā)現(xiàn)后加入 ， 效果要具體評(píng)價(jià) （ 4）雜菌污染對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物提取和產(chǎn)品質(zhì)量的影響 ? 絲狀菌發(fā)酵被產(chǎn)酸菌污染： pH不斷下降，菌絲大量自溶，發(fā)酵液粘度增加，過濾困難 處理方法：①將發(fā)酵液加熱后再加助濾劑；②先加絮凝劑使蛋白質(zhì)凝聚后沉淀 ? 雜菌分泌較多蛋白質(zhì)雜質(zhì)時(shí)，對(duì)發(fā)酵后處理過程中采用溶媒萃取的提取工藝非常不利，使水相和溶媒之間極易發(fā)生乳化 1. 染菌的檢查與判斷 ? 顯微鏡檢查法 鏡檢出雜菌需要一定時(shí)間 ? 平板劃線培養(yǎng)或斜面培養(yǎng)檢查法：菌落 噬菌體檢查可采用雙層平板法：噬菌斑 ? 肉湯培養(yǎng)檢查法 ? 發(fā)酵過程的異?，F(xiàn)象判斷 ? DO2水平異常變化 ? pH異常變化 ? 尾氣 CO2異常變化 1 2 2. 污染原因分析 ? 主要原因： ① 種子帶菌 ② 無菌空氣帶菌 ③ 設(shè)備滲漏 ④ 滅菌不徹底 ⑤ 操作失誤 ⑥ 技術(shù)管理不善 ? ? 從污染時(shí)間看：早期污染可能與 ①②④⑤ → 接種操作不當(dāng)有關(guān)；后期污染可能與 ③⑤ 及中間補(bǔ)料有關(guān) 。 2. 污染原因分析 3. 預(yù)防 ? 種子帶菌的防治 ? 滅菌徹底 ? 接種可靠：無菌室及設(shè)備可靠，無菌操作可靠 ? 保藏可靠 ? 過濾空氣帶菌的防治 ? 設(shè)備的滲漏或 “ 死角 ” 造成的染菌及其防治 “死角 ” ? 發(fā)酵罐的 “ 死角 ” 法蘭、內(nèi)襯、接口、表頭、罐內(nèi)部件及其支撐件如攪拌軸拉桿、聯(lián)軸器、冷卻盤管、擋板、空氣分布管及其支撐件 口：人孔（或手孔）、排風(fēng)管接口、燈孔、視鏡口、進(jìn)料管口 發(fā)酵罐罐底 膿皰狀積垢 造成 “ 死角 ” 消除方法：加強(qiáng)清洗并定期鏟除污垢；安裝 放汽邊閥 ? 管道安裝不當(dāng)或配置不合理 形成的 “ 死角 ” 污水 膿皰罐底 發(fā)酵罐罐底膿皰狀積垢造成“死角” 法蘭連接不當(dāng)造成的“死角” 滅菌時(shí)蒸汽不易通達(dá)的“死角”及其消除方法 ? 培養(yǎng)基與設(shè)備滅菌不徹底的防治 ? 原料性狀：大顆粒的原料過篩除去 。 ? 滅菌過程中產(chǎn)生的泡沫造成染菌：添加消泡劑 防止泡沫升頂 ? 連消不徹底 ：最好采用自動(dòng)控制裝置 ? 滅菌后期罐壓驟變 ? 死角 ? 操作不當(dāng)造成染菌 ? 噬菌體染菌及其防治 3. 預(yù)防 采取哪些措施能夠保持無菌發(fā)酵？ ? 物料、培養(yǎng)基、中間補(bǔ)料要滅菌； ? 發(fā)酵設(shè)備及輔助設(shè)備（空氣過濾裝置、各種發(fā)酵罐進(jìn)出口連接裝置）和管道要滅菌； ? 好氣發(fā)酵通入的空氣要除菌； ? 種子無污染；接種無菌操作過關(guān) ； ? 為了保持發(fā)酵的長期無菌狀態(tài)，需維持正壓。 k↓ ， 熱阻 ↑, t↑ kNdtdN ?? ktNN t ??0ln? 當(dāng)溫度 T一定時(shí)， k隨微生物不同而不同，具體計(jì)算時(shí)，可取細(xì)菌芽孢的 k值為標(biāo)準(zhǔn)。 一般采用 Nt=， 即 1000次滅菌中只有一次失敗 。 kR ks NR Ns ND dNR/dt=kR NR dNs/dt =kR NR ks Ns →Nt/N0=KR/(kRkS) [ekstks/kR ekRt] 式中 NR： 耐熱性活芽孢數(shù)； Ns： 敏感性活芽孢數(shù) ND： 死亡的芽孢數(shù) ； kR： 耐熱性芽孢的比死亡速率 ； ks： 敏感性芽孢的比死亡速率； N0： 初始活芽孢數(shù)。 3. 滅菌溫度和時(shí)間的選擇 ? 培養(yǎng)物質(zhì)受熱破壞也可看作一級(jí)反應(yīng)： 式中 C： 對(duì)熱不穩(wěn)定物質(zhì)的濃度； k’： 分解速度常數(shù) ； k’的變化也遵循阿累尼烏斯方程： 都與相應(yīng)的活化能及 T有關(guān) CkdtdC 39。ex p (39。 RTEAk ???)ex p ( RTEAk ???當(dāng) T1 →T2 ㏑ (k2/k1)/㏑ (k2’/k1’)=ΔE/ΔE’1 (∵ ΔEΔE’) ∴ 隨著
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1