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trizol法提取rna實驗步驟及原理(新手詳細注釋版)-展示頁

2025-07-05 00:03本頁面
  

【正文】 的塑料制品放入一個可以高溫滅菌的容器中,注入DEPC水溶液,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中。處理步驟如下: 1)在玻璃燒杯中注入去離子水,%。 料制品的處理 盡可能使用無菌,一次性塑料制品,已標明RNaseFree 的塑料制品,如沒有開封使用過通常沒有必要再次處理。一般情況下采用用DEPC(焦炭酸二磷脂,一種RNase抑制劑)配制的70%乙醇擦洗取液器的內(nèi)部和外部,基本達到要求。它廣泛存在于人的皮膚上,因此,在與RNA制備有關(guān)的分子生物學(xué)實驗時,必須戴手套。它在一些極端的條件可以暫時失活,但限制因素去除后有迅速復(fù)性。Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速破碎細胞,抑制細胞釋放出的核酸酶。Trizol法使用步驟 一、分離純化的基本原理 研究基因的表達和調(diào)控時常常要從組織和細胞中分離和純化RNA。RNA質(zhì)量的高低常常影響cDNA庫,RTPCR和Northern Blot等分子生物學(xué)實驗的成敗。 二、用戶需自備的試劑和材料 無水乙醇、氯仿、Glycogen(可能需要)、 Eppendorf管(RNasefree)、 Tips(RNasefree) 三、準備工作 RNase酶非常穩(wěn)定,是導(dǎo)致RNA降解最主要的物質(zhì)。用常規(guī)的高溫高壓蒸氣滅菌方法和蛋白抑制劑都不能是RNase完全失活。 RNase的又一污染源是取液器,根據(jù)取液器制造商的要求對取液器進行處理。取RNasefree的物品時必須戴手套。對于國產(chǎn)塑料制品,原則上都必須處理方可使用。注意:DEPC為
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