酶標儀的工作原理與基本結構-展示頁
2025-06-27 01:31本頁面
【正文】 比爾定律相結合而成的，所以又稱朗伯比爾定律。根據(jù)前面所敘述的理由可知，選擇濾光片的原則應是：濾光片的顏色應與待測溶液的顏色為互補色。至于不被有色溶液吸收的光線，則應設定在未透過有色溶液之前或之后將其消除掉。如可用綠色光來對高錳酸鉀溶液進行比色測定。從圖2中還可以看出，溶液的濃度越大，對（綠）光的吸收程度越大。濃度不同的同一種溶液，其吸收光譜的形狀和最大吸收波長是一樣的，也就是說，不同的物質都具有其特定的吸收光譜。對于任何一種有色溶液，都可以測繪出它的吸收曲線。圖2中CCC3分別代表不同的濃度，C1 C2 C3。讓不同波長的光通過一定濃度的有色溶液，分別測出它對各種波長的光的吸收程度（用吸光度A來表示），以波長為橫坐標，吸光度為縱坐標作圖，所得到的曲線稱為溶液的吸收曲線或吸收光譜圖。透過光中只剩下紫色光，所以高錳酸鉀呈紫色。如一束白光通過高錳酸鉀溶液時，綠光大部分被選擇吸收，其他的光透過溶液。各種溶液之所以會呈現(xiàn)不同的顏色，其原因是因為溶液中的有色質點（分子或離子）選擇性地吸收某種顏色的光所致。不透明物質的顏色是其反射光波的顏色。由于物質的性質和形態(tài)不同，所以呈現(xiàn)出不同的顏色。如綠光和紫光為互補色，黃光和藍光為互補色等等。二、光的互補及有色物質的顯色原理若把某兩種顏色的光按照一定的比例混合，能夠得到白色光的話，則這兩種顏色的光就叫做互補色。反之亦然。由式中可知，不同波長的光子具有不同的能量。同樣，光被吸收時，其能量一份一份地被吸收的。在輻射能量時，光是以單個的、一份一份的能量（E＝hυ）的形式輻射的。各種色光及紅外線、紫外線的近似波長范圍如表1所示。不同波長的光被人眼所感受到的顏色是不同的?？梢杂妹枋鲭姶挪ǖ男g語，如振動頻率（υ）、波長（λ）、速度（c ）、周期（T ）來描述它。在一些場合，光的波動性比較明顯；在另一些場合，光則主要表現(xiàn)為微粒性。光電比色計屬于吸收光譜儀器范圍。后來改用光電檢測元件代替目視來測量被測溶液中物質的含量，這種方法叫光電比色法。如納氏管比色法，它是按濃度由高到低，配好一系列標準濃度管，然后拿待測樣品和標準管逐個比較，看和哪一個標準管的顏色最相近，便讀取該標準管的濃度值為待測樣品的濃度值，這就是（目視）比色法。濃度越大，顏色越深；濃度越小，顏色越淺。. . . .酶免測試的工作原理吸光度測試的準確性對于酶免測試結果的重要性酶標儀的組成部分和工作原理第一節(jié) 比色分析的基本理論許多化學物質具有顏色，有些無色的化合物也可以和顯色劑作用而生成有色物質。事實證明，當有色溶液的濃度改變時，顏色的深淺也隨著改變。因此，可以通過比較溶液顏色深淺的方法來確定有色溶液的濃度，對溶液中所含的物質進行定量分析。這種方法雖然比較簡便，但是系列標準管不易保存，誤差較大。利用這種方法制成的儀器叫光電比色計。一、光的性質從物理學中我們知道，光具有波動和微粒兩種性質，通稱光的波粒兩象性。首先，光是一種電磁波。我們日常所見到的白光，便是波長在400～760nm之間的電磁波，它是由紅橙黃綠青藍紫等色，按照一定比例混合而成的復合光。在可見光之外是紅外線和紫外線。表1 各種色光及紅外線、紫外線的近似近波范圍 單位：nm顏色波長范圍顏色波長范圍遠紅外線10001～1000000綠501～560中紅外線2501～10001青481～500近紅外線761～2500藍431～480紅621～760紫401～430橙591～620普通紫外線191～400黃561～590真空紫外線1190除了波動性外，光還具有微粒性。式中υ是光的頻率，h為普朗克常量。因此，我們可以說，光是由具有能量（hυ）的微粒所組成的，這種微粒被稱為光子。波長越短，即頻率越高，能量越大。光子的存在可以從光電效應中得到充分的證明。圖1中處于直線關系的兩種光為互補色。圖1 互補色光示意圖 圖2 高錳酸鉀溶液的光吸收曲線物質的顏色與光的吸收、透過、反射有關。透明物質的顏色就是它透過光波的顏色。有色溶液對光的吸收是有選擇性的。實踐證明，溶液所呈現(xiàn)的顏色是它的主要吸收光的互補色。從互補色示意圖可以看出，透過光中除紫色外，其他顏色的光兩兩互補。通常用吸收曲線來描述溶液對各種波長的光的吸收情況。例如，高錳酸鉀吸收曲線如圖所示。從圖2中可以看出，在可見光范圍內，高錳酸鉀溶液對波長為525nm左右的綠色光吸收程度最大，而對紫色和紅色光很少吸收。光吸收最大處所對應的波長叫最大吸收波長。如同根據(jù)指紋可以辨認眾人一樣，在光譜分析中，可以根據(jù)吸收光譜的不同來鑒別物質。因此，可以利用這部分光線通過溶液后被吸收的程度來確定溶液的濃度。由于有色物質對光的吸收具有選擇性，因此，在進行比色測定時，只能用光波中能被有色溶液吸收的那部分光線，即應該有單色光進行比色測定。濾光片就起這個作用。三、朗伯比爾（LamberBeer）定律溶液顏色的深淺與濃度之間的數(shù)量關系可以用吸收定律來描述。當一束平行單色光照射到均勻、非散射的溶液時，光的一部分被吸收，一部分透過溶液，一部分被比色皿的表面所反射。則它們之間有如下關系：Io＝Ia+Ir+It在實際比色分析時，所用的比色皿都是同質料、同規(guī)格的，因此反射光的強度為一定值，
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