基因工程考試重點-展示頁
2024-11-08 09:59本頁面
【正文】 一生物的全部 DNA 序列）的不同 DNA 片段的克隆所構(gòu)成的群體 。 聚合酶的種類 真核細胞： DNA 聚合酶 α、 DNA 聚合酶 β、 DNA 聚合酶 γ、線粒體 DNA 聚合酶 原核細胞： DNA 聚合酶Ⅰ、 DNA 聚合酶 Ⅱ、 DNA 聚合酶 Ⅲ 大腸桿菌 DNA 聚合酶Ⅰ、 Klenow DNA 聚合酶、 T4 噬菌體 DNA 聚合酶、 T7 噬菌體 DNA 聚合酶、耐熱 DNA 聚合酶、反轉(zhuǎn)錄酶、末端轉(zhuǎn)移酶 —— 依賴于 DNA 的 RNA 聚合酶包括 SP6 噬菌體 DNA 聚合酶、 T4 噬菌體 DNA 聚合酶、 T7 噬菌體 DNA 聚合酶 —— RNase One 是唯一可在所有 4 個堿基處切割磷酸二酯鍵的酶。 引起其原因：甘油濃度高，酶過量，離子強度低， PH 過高，加有機溶劑，其它 2 價離子代替鎂離子。 ：穩(wěn)定 PH 的緩沖劑、鎂離子、 DTT、 BSA 法： EDTA 可螯合鎂離子，終止酶切反應(yīng)，終止?jié)舛葹?10mmol/L；加熱；用苯酚抽提去出蛋白，或用試劑盒純化 DNA。 ：是指在建議使用的緩沖液及溫度下，在 20ｕ l 反應(yīng)液中反應(yīng) 1h，使 1ugDNA完全消化所需的酶量。 EcoRⅠ G↓ AATTC Hind Ⅲ A↓ AGCTT BamHⅠ G↓ GATCC ：識別相同序列的限制酶稱為同裂酶，但它們的切割位點可能不同。 ：依次取宿主屬名第一字母、種名頭兩個字母、菌株號、序號（羅馬字）。 。 結(jié)構(gòu)基因：轉(zhuǎn)錄啟動區(qū)，核糖體識別區(qū)，編碼區(qū)，轉(zhuǎn)錄終止區(qū)。 6． 起始密碼： AUG 終止密碼： UAA,UAG,UGA ： 初始克隆中 的外源 DNA 片段往往較長，含有許多目的基因以外的 DNA 片段，在諸如表達、序列分析和突變等操作中不便進行，因此必須將目的基因所對應(yīng)的小段 DNA找出來，這個過程就叫亞克隆。 5． RNA 聚合酶：核心酶和 σ 因子。 3． 1997 年轉(zhuǎn)基因番茄上市，俗稱“百日鮮”。第一章 ：通過工具酶，在體外將目的基因、基因片段或其他 DNA 元件進行切割，與適當(dāng)?shù)妮d體進行連接和重組，導(dǎo)入相應(yīng)的受體細胞，并使外源基因進行復(fù)制和表達，定向改造受體生物性狀或獲得表達產(chǎn)物。 ：從一個親本細胞增殖而來的細胞群體。 4． DNA 的組成：五碳糖，即脫氧核糖；磷酸基團； 4 種含氮堿基。轉(zhuǎn)錄終止子：依賴 ρ 因子，不依賴 ρ 因子。 8．原核生物基因組成：啟動區(qū)， SD 區(qū)，基因區(qū)，轉(zhuǎn)錄終止子和終止因子；真核生物基因組成：轉(zhuǎn)錄啟動區(qū)，基因區(qū)，轉(zhuǎn)錄終止子。 第二章 DNA，維護宿主遺傳穩(wěn)定的保護機制。宿主細胞通過甲基化作用達到識別自身遺傳物質(zhì)和外來遺傳物質(zhì)的目的 。 4 限制與修飾系統(tǒng)的比較 Ⅱ （所占比例最大） Ⅰ Ⅲ 酶分子 內(nèi)切酶與甲基化酶 三亞基雙功能酶 二亞基雙功能酶 分子不在一起 識別位點 46bp, 大多數(shù)為 二分非對稱
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