其它標(biāo)記免疫分析技術(shù)-展示頁
2025-01-27 18:53本頁面
【正文】 g*）和非標(biāo)記抗原（ Ag）與限量抗體 (Ab)競爭性結(jié)合 ?Ag*和 Ag具有等同的與 Ab結(jié)合能力 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) Ab限量， Ag*定量 , Ag*和 Ag的量大于 Ab結(jié)合位點，二者 通過競爭方式與 Ab 結(jié)合；隨著 Ag增加，Ag*與 Ab結(jié)合形成Ag*Ab復(fù)合物的放 射量降低 ,二者變化 成函數(shù)關(guān)系。 交叉反應(yīng)率 = ED50（ B） / ED50（ A） 100% 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) ③ 抗體的效價 抗體效價： ◇ 是抗體和抗原發(fā)生反應(yīng)的抗體最高稀釋度?？贵w與相應(yīng)抗原結(jié)合能力強，而與該抗原結(jié)構(gòu)類似物 (同類物、前體、降解物和代謝物等 )結(jié)合能力弱，則特異性高。 抗體 Ka值越大，放射免疫分析的靈敏度越高，抗體 Ka值達到 109——1012mol/L，才適合放射免疫分析 。 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) （ 2）標(biāo)記物的鑒定 標(biāo)記化合物的質(zhì)量指標(biāo)： ◇ 放射性核純度 ◇ 放射化學(xué)純度 ◇ 放射性比活度 ◇ 生物活性和免疫活性 ◇ 標(biāo)記位置和定量分布情況 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) （ 3）抗體的選用 ① 抗體親和性 ② 抗體特異性 ③ 抗體的效價 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) ① 抗體親和性 是抗體與抗原之間相互作用的一種結(jié)合能力或強度。 （二）抗原或抗體 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 在 RIA中，標(biāo)記抗原質(zhì)量的優(yōu)劣，直接影響測定結(jié)果，必須制備比放射性強、純度高的標(biāo)記抗原，并保持免疫活性不受喪失。 目前以 125I應(yīng)用最為廣泛。人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 第九章 其它標(biāo)記免疫分析 技術(shù) 李士軍 教授 大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗科 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 返回總目錄 目 錄 放射免疫分析技術(shù) 1 金標(biāo)記免疫分析技術(shù) 2 發(fā)光免疫分析技術(shù) 3 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 第一節(jié) 放射免疫技術(shù) （ radioimmunoassay） 放射免疫技術(shù)基本類型： ★ 經(jīng)典的放射免疫分析（ radioimmunoassay， RIA） ★ 免疫放射分析或免疫放射度量分析（ immunoradiometric assay, IRMA） 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 放射性核素是指原子核能自發(fā)產(chǎn)生成分或能級的變化，變成另一種核素，同時伴有射線發(fā)射的元素。 放射性核素根據(jù)其衰變方式分為 α 、 β 、 γ 三種，用于放射標(biāo)記的有 β （ 14C、 3H）、 γ （ 131I和 125I）兩種，分別用液體閃爍技術(shù)和 γ 計數(shù)器測定。 一、放射性核素標(biāo)記物 （一）常用的放射性核素 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 用于標(biāo)記的抗原純度要高，有完整的 免疫活性，抗體的親和常數(shù)要高，抗體滴度高并且交叉反應(yīng)率低。 常用的標(biāo)記方法： ◇ 直接標(biāo)記法 ◇ 間接標(biāo)記法 （三）放射性核素標(biāo)記物的制備 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) （四） 放射性核素標(biāo)記物的純化與鑒定 （ 1）標(biāo)記物的純化 常用的純化方法： △ 凝膠過濾法或薄層層析法 △ 離子交換法 △ 透析法 △ 電泳法（聚丙烯酰胺凝膠電泳法） △ 高效液相色譜法。 親和力的大小用親和常數(shù) Ka值來表示。 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) ② 抗體特異性 抗體特異性： 指抗體分別與相應(yīng)抗原和抗原結(jié)構(gòu)類似物的結(jié)合能力的比較。 交叉反應(yīng) 是指抗體與抗原結(jié)構(gòu)類似物的結(jié)合。 ◇ 是反映血清中有效抗體含量的相對參數(shù)。 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) （二）實驗方法 Ag* Ag Ab 反應(yīng)條件 體積 溫度 時間 pH 平衡法 非平衡法 ★ 抗原抗體反應(yīng) 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) ★ 免疫復(fù)合物（ B）與游離標(biāo)記物（ F）的分離 雙抗體法 化學(xué)沉淀法 PR 試劑法 吸附法 固相分離法 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析
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