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生物工藝學(xué)下游技術(shù)第三章細(xì)胞破碎-展示頁(yè)

2025-01-25 17:53本頁(yè)面
  

【正文】 的數(shù)量和其交聯(lián)的程度,如果交聯(lián)程度大,則網(wǎng)結(jié)構(gòu)就致密。短肽接在 N-乙酰胞壁酸上,相鄰的短肽又交叉相聯(lián),形成了網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。 ? 短肽一般由四或五個(gè)氨基酸組成,如 L-丙氮酸- D-谷氨酸- L-賴氨酸- D-丙氨酸。 細(xì)胞破碎的主要阻力來(lái)自于細(xì)胞壁 。微生物的細(xì)胞外圍通常包括 細(xì)胞壁和細(xì)胞膜 。 ? 對(duì)于 胞外產(chǎn)物 只需直接將發(fā)酵液預(yù)處理及過(guò)濾,獲得澄清的濾液,作為進(jìn)一步純化的出發(fā)原液, ? 對(duì)于 胞內(nèi)產(chǎn)物 ,則需首先收集菌體進(jìn)行細(xì)胞破碎,使代謝產(chǎn)物轉(zhuǎn)入液相中,然后,再進(jìn)行細(xì)胞碎片 的分離。微生物細(xì)胞的破碎 微生物細(xì)胞的破碎 ? 微生物的代謝產(chǎn)物有的分泌到細(xì)胞或組織之外,稱為 胞外產(chǎn)物 。 (例如細(xì)菌產(chǎn)生的堿性蛋白酶,霉菌產(chǎn)生的糖化酶等 ) ? 還有許多是存在于細(xì)胞內(nèi) (例如青霉素酰化酶,堿性磷酸酯酶等 )稱為 胞內(nèi)產(chǎn)物 。 細(xì)胞壁的組成和結(jié)構(gòu) ? 細(xì)胞破碎 是為了破壞細(xì)胞外圍使細(xì)胞 內(nèi)含物釋放出來(lái) 。 ? 細(xì)胞膜 使細(xì)胞內(nèi)外保持一定的 濃度差 ,它主要由蛋白質(zhì)和脂質(zhì)組成 ,強(qiáng)度比較差,易受滲透壓沖擊而破碎。 細(xì)菌的細(xì)胞壁 ? 幾乎所有細(xì)菌的細(xì)胞壁都是由堅(jiān)固的骨架 —— 肽聚糖 組成,是由肽聚糖鏈借短肽交聯(lián)而成,使細(xì)胞具有一定的形狀和強(qiáng)度。 ? 肽聚糖鍵是 N-乙酰葡萄糖胺和 N-乙酰胞壁酸交替地通過(guò) β -( l→4 )糖苷鍵聯(lián)接而成。 革蘭氏 陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁 革蘭氏 陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁 細(xì)菌的細(xì)胞壁 ? 革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁較厚( 15- 50 nm),肽聚糖占 40%一 90%,其余是多糖和磷壁酸, ? 革蘭氏陰性菌的肽聚糖層較?。?- ),最外面還有一較厚的外壁層( 8— 10 nm),外壁層主要由脂蛋白,脂多糖組成。 革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌 酵母菌的細(xì)胞壁 ? 主要成分為 葡聚糖與甘露聚糖以及蛋白質(zhì) 等,比革蘭氏陽(yáng)性菌稍厚,而且其厚度隨菌齡增加而增加。有甘露聚糖-酶的復(fù)合物,它可以共價(jià)連接到網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)上,也可以不連接。 ? 真菌細(xì)胞壁的強(qiáng)度和聚合物的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)有關(guān) ? 它還含有幾丁質(zhì)或纖維素的纖維狀結(jié)構(gòu),所以強(qiáng)度有所提高。 為了研究細(xì)胞的破碎,提高其破碎率,有必要了解各種微生物細(xì)胞壁的組成和結(jié)構(gòu)(表 1): 微生物 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌 革蘭氏陰性細(xì)菌 酵母菌 霉菌 壁厚 /nm 2080 1013 100300 100250 層次 單層 多層 多層 多層 主要組成 肽聚糖 ( 4090%) 多糖 胞壁酸 蛋白質(zhì) 脂多糖 ( 14%) 肽聚糖 ( 510%) 脂蛋白 脂多糖 ( 1122%) 磷脂 蛋白質(zhì) 葡聚糖 ( 3040%
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