生物工藝學(xué)下游技術(shù)第三章細(xì)胞破碎-文庫(kù)吧資料
2025-01-22 17:53本頁(yè)面
【正文】 應(yīng)力，促使細(xì)胞液體發(fā)生流動(dòng)，從而使細(xì)胞破碎。 在 1525 kHz的頻率下操作。 原理： 在工業(yè)規(guī)模的細(xì)胞破碎中，對(duì)于酵母等難破碎的及高濃度的細(xì)胞，常采用多次循環(huán)的操作方法。 （ Highpressure homogenization） —— 大規(guī)模細(xì)胞破碎的常用方法 利用高壓使細(xì)胞懸浮液通過(guò)針形閥，由于突然減壓和高速?zèng)_擊撞擊環(huán)使細(xì)胞破碎，細(xì)胞懸浮液自高壓室針形閥噴出時(shí)，每秒速度高達(dá)幾百米，高速?lài)姵龅臐{液又射到靜止的撞擊環(huán)上，被迫改變方向從出口管流出。 珠磨法的破碎率一般控制在 80%以下：降低能耗、減少大分子目的產(chǎn)物的失活、減少由于高破碎率產(chǎn)生的細(xì)胞小碎片不易分離而給后續(xù)操作帶來(lái)的困難。破碎中產(chǎn)生的熱量一般采用夾套冷卻的方式帶走。 二、常用破碎方法 分 類(lèi) 作 用 機(jī) 理 適 應(yīng) 性 機(jī) 械 法 珠磨法 固體剪切作用 可達(dá)較高破碎率，可較大規(guī)模操作，大分子目的產(chǎn)物易失活，漿液分離困難 高壓勻漿法 液體剪切作用 可達(dá)較高破碎率，可大規(guī)模操作，不適合絲狀菌和革蘭氏陽(yáng)性菌 超聲破碎法 液體剪切作用 對(duì)酵母菌效果較差，破碎過(guò)程升溫劇烈，不適合大規(guī)模操作 Xpress法 固體剪切作用 破碎率高，活性保留率高，對(duì)冷凍敏感目的產(chǎn)物不適合 非 機(jī) 械 法 酶溶法 酶分解作用 具有高度專(zhuān)一性，條件溫和，漿液易分離，溶酶價(jià)格高，通用性差 化學(xué)滲透法 改變細(xì)胞膜的滲透性 具一定選擇性，漿液易分離，但釋放率較低，通用性差 滲透壓法 滲透壓劇烈改變 破碎率較低，常與其他方法結(jié)合使用 凍結(jié)融化法 反復(fù)凍結(jié) 融化 破碎率較低，不適合對(duì)冷凍敏感目的產(chǎn)物 干燥法 改變細(xì)胞膜滲透性 條件變化劇烈，易引起大分子物質(zhì)失活 進(jìn)入珠磨機(jī)的細(xì)胞懸浮液與極細(xì)的玻璃小珠、石英砂、氧化鋁等研磨劑（直徑小于 1mm）一起快速攪拌或研磨，研磨劑、珠子與細(xì)胞之間的互相剪切、碰撞，使細(xì)胞破碎，釋放出內(nèi)含物。 ? 幾丁質(zhì)就是由 N 乙酰葡萄糖胺分子，以 b 1,4 葡萄糖苷鍵連接而成的多聚糖。 真菌的細(xì)胞壁 ? 大多數(shù)真菌的多糖壁，主要存在三種聚合物，葡聚糖（主要以 β －（ 1→3 ）鍵連接，某些以 β －（ l→6 ）鍵連接），幾丁質(zhì)（以微纖維狀態(tài)存在） ,糖蛋白。 ? 細(xì)胞壁的最里層是由葡聚糖的細(xì)纖維組成，它構(gòu)成了細(xì)胞壁的剛性骨架，使細(xì)胞具有一定的形狀 ? 覆蓋在細(xì)纖維上面的是一層糖蛋白， ? 再外面是由 1， 6－磷酸二酯鍵共價(jià)連接而成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的 甘露聚糖 。 ? 破碎細(xì)菌的主要阻力是來(lái)自于肽聚糖的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，其網(wǎng)結(jié)構(gòu)的致密程度和強(qiáng)度取決于聚糖鏈上所存在的膚鍵
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