【正文】 (qi225。)、種類和壁厚度)； 目標(biāo)產(chǎn)物對(duì)破碎條件的敏感性； 破碎程度； 目標(biāo)產(chǎn)物的選擇性釋放,50,第五十頁(yè)，共七十四頁(yè)。)方法的依據(jù)：,細(xì)胞處理量； 細(xì)胞壁強(qiáng)度和結(jié)構(gòu)(高聚物交聯(lián)程度(ch233。,選擇破碎(p242。o)法,48,第四十八頁(yè)，共七十四頁(yè)。 氣流干燥主要適用于酵母菌，一般在2530℃的氣流中吹干； 真空干燥多用于細(xì)菌。當(dāng)采用(cǎiy242。,47,第四十七頁(yè)，共七十四頁(yè)。 一方面能使細(xì)胞膜的疏水鍵結(jié)構(gòu)破裂，從而增加細(xì)胞的親水性能， 另一方面胞內(nèi)水結(jié)晶，形成冰晶粒，引起細(xì)胞膨脹而破裂。 b236。ngji233。,46,第四十六頁(yè)，共七十四頁(yè)。)滲透壓的突然變化，胞外的水迅速滲入胞內(nèi)，引起細(xì)胞快速膨脹而破裂。)滲透壓的作用，細(xì)胞內(nèi)水分便向外滲出，細(xì)胞發(fā)生收縮，當(dāng)達(dá)到平衡后，將介質(zhì)快速稀釋，或?qū)⒓?xì)胞轉(zhuǎn)入水或緩沖液中，由于(y243。,1）滲透壓沖擊(chōngjī)法,滲透壓沖擊是較溫和的一種破碎方法， 將細(xì)胞放在高滲透壓的溶液中（如一定濃度的甘油或蔗糖溶液），由于(y243。,3 物理(w249。)滲透法特點(diǎn)：,缺點(diǎn)(quēdiǎn),對(duì)產(chǎn)物釋放有一定的選擇性，可使一些較小分子量的溶質(zhì)如多肽和小分子的酶蛋白透過(guò)，而核酸等大分子量的物質(zhì)仍滯留在胞內(nèi)； 細(xì)胞外形完整，碎片少，漿液粘度低，易于固液分離和進(jìn)一步提取。u)產(chǎn)物的純化帶來(lái)困難， 并影響最終產(chǎn)物純度,化學(xué)(hu224。 化學(xué)試劑的加入常會(huì)給隨后(su237。,43,第四十三頁(yè)，共七十四頁(yè)。ich237。 有機(jī)溶劑可采用丁酯、丁醇、丙酮、氯仿和甲苯等,（3）有機(jī)溶劑,（4）EDTA螯合劑,處理G細(xì)菌，對(duì)細(xì)胞壁外層有破壞作用。zh236。ng)的，既能和水作用也能和脂作用， 能與細(xì)胞壁上的脂蛋白結(jié)合，形成微泡，使膜的通透性增加或溶解,42,第四十二頁(yè)，共七十四頁(yè)。,（2）表面(biǎomi224。n jī)硫酸鈉（SDS，陰離子型）；。,（1）酸、堿處理(chǔlǐ)法,41,第四十一頁(yè)，共七十四頁(yè)。 成本低，反應(yīng)激烈(jīli232。,酸處理可以使蛋白質(zhì)水解成氨基酸，通常采用6mol/L HCl。)細(xì)胞壁膜的結(jié)構(gòu)與組成。xu233。u)出來(lái)。u)性），從而使胞內(nèi)物質(zhì)有選擇地滲透(sh232。,某些化學(xué)試劑，如有機(jī)溶劑、變性劑、表面活性劑、抗生素、金屬螯合劑等，可以改變細(xì)胞壁或膜的通透性（滲透(sh232。)，過(guò)濾速度下降。 自溶作用：改變其生長(zhǎng)環(huán)境（溫度、ｐＨ、緩沖液），可以誘發(fā)產(chǎn)生過(guò)剩的這種酶或激發(fā)產(chǎn)生其它的自溶酶，以達(dá)到自溶目的。ng),自溶作用是酶解的另一種方法，利用生物體自身產(chǎn)生的酶來(lái)溶胞，而不需外加其他的酶。,酶解自溶作用(zu242。)的存在。) 能選擇性地釋放產(chǎn)物 胞內(nèi)核酸等泄出量少，細(xì)胞外形較完整,缺點(diǎn)： 溶酶價(jià)格高， 溶酶法通用性差（不同菌種需選擇不同的酶) 產(chǎn)物抑制(y236。,37,第三十七頁(yè)，共七十四頁(yè)。)采用幾種酶的混合物會(huì)產(chǎn)生更好的效果，加入時(shí)需確定相應(yīng)的次序。,外加(w224。 植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素，常采用纖維素酶和半纖維素酶裂解。但對(duì)于革蘭氏陰性菌，單獨(dú)采用溶菌酶無(wú)效果，必須與螯合劑EDTA一起使用。 溶菌酶（lysozyme)能專一性地分解細(xì)胞壁上肽聚糖分子的β1,4糖苷鍵，因此主要用于細(xì)菌類細(xì)胞壁的裂解。ijiā)酶法,酶解法的特點(diǎn)(t232。 1）外加酶法,35,第三十五頁(yè)，共七十四頁(yè)。,二,34,第三十四頁(yè)，共七十四頁(yè)。)法,非機(jī)械方法很多 1 酶解 2 化學(xué)法溶胞 3 物理法 滲透壓沖擊 凍結(jié)和融化 干燥(gānz224。)破碎法（chemical treatment） 去垢劑破碎法（detergents） 滲透壓沖擊破碎法（osmotic shock） 凍融破碎法（freezing and thawing）,33,第三十三頁(yè)，共七十四頁(yè)。)方法,酶溶破碎法（enzyme lysis） 化學(xué)(hu224。,非機(jī)械破碎(p242。 t243。,31,第三十一頁(yè)，共七十四頁(yè)。 但超聲波產(chǎn)生的化學(xué)自由基團(tuán)能使某些敏感性活性物質(zhì)失活。 一般桿菌比球菌易破碎，G細(xì)菌比G+細(xì)菌易破碎，對(duì)酵母菌的效果(xi224。 su236。,30,第三十頁(yè)，共七十四頁(yè)。r)使細(xì)胞破碎。bāo)粉碎機(jī),一般認(rèn)為在超聲波作用下液體發(fā)生空化作用（cavitation), 液體中局部空穴的形成、增大和閉合產(chǎn)生極大的沖擊波和剪切力，引起的粘滯性旋渦在細(xì)胞上造成了剪切力，使細(xì)胞內(nèi)液體發(fā)生流動(dòng)，從而(c243。 su236。,29,第二十九頁(yè)，共七十四頁(yè)。ngd249。 超聲波振蕩器以可分為槽式和探頭直接插入介質(zhì)兩種型式，一般破碎效果后者比前者好。 su236。,28,第二十八頁(yè)，共七十四頁(yè)。nɡ)，一種與軸傾斜， 徑向盤使磨料沿徑向運(yùn)動(dòng)，傾斜盤則產(chǎn)生軸向運(yùn)動(dòng)。nɡ)震動(dòng)俠縫分離器 D變速馬達(dá) 1和2料液進(jìn)出口 3和4 攪拌冷卻劑進(jìn)出口 5和6磨室冷卻劑進(jìn)出口,園盤以兩種位置交錯(cuò)地安裝在軸上， 一種處于徑向(j236。 jī),A具有冷卻夾套的圓筒形磨室 B具有冷卻裝置的攪拌軸和圓盤 C環(huán)形(hu225。,27,第二十七頁(yè)，共七十四頁(yè)。o)滾動(dòng)引起 在出口處，旋轉(zhuǎn)園盤和出口平 板之間的狹縫很小，可阻擋玻 璃小珠，使不被料液帶出。 jī)工作原理,磨室內(nèi)放置玻璃小珠，裝在同心軸上的園盤攪拌器高速旋轉(zhuǎn)，使細(xì)胞懸浮液和玻離小珠相互攪動(dòng)； 細(xì)胞破碎是由剪切力層之間的碰撞和磨料(m243。o)全能珠磨機(jī),26,第二十六頁(yè)，共七十四頁(yè)。 在工業(yè)規(guī)模的破碎中，常采用(cǎiy242。,25,第二十五頁(yè)，共七十四頁(yè)。 主要用于實(shí)驗(yàn)室中。ng)細(xì)胞從高壓閥小孔中擠出。,高壓勻漿(y,影響高壓勻漿器細(xì)胞(x236。 破碎性能還隨菌體種類和生長(zhǎng)環(huán)境的不同而不同 大腸桿菌的細(xì)胞比酵母(ji224。,升高壓力有利于破碎， 減少細(xì)胞的循環(huán)次數(shù)，甚至一次通過(guò)勻漿閥就可達(dá)到幾乎完全的破碎，這樣就可避免細(xì)胞碎片不至過(guò)小。 不宜使用高壓勻漿法。